一种用于糖蛋白检测的电化学方法技术

技术编号:11439750 阅读:120 留言:0更新日期:2015-05-13 09:20
本发明专利技术公布了一种用于糖蛋白检测的电化学方法,属于化学领域。该方法包括制备苯硼酸-生物素-纳米金复合物、含待测物工作电极的制备,电化学测试。采用本发明专利技术所提供的方法检测糖蛋白灵敏性高,较传统的方法不需要采用价格昂贵、易变性的抗体,本发明专利技术的方法成本较低,稳定性好。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于糖蛋白检测的电化学方法,其特征在于:包括以下步骤:(A)制备苯硼酸‑生物素‑纳米金复合物,包括以下子步骤:A1:纳米金粒子的合成,采用前驱体为HAuCl4,还原剂为柠檬酸钠,将HAuCl4溶液加热至沸腾,然后快速加入柠檬酸钠溶液,继续加热沸腾10‑50分钟,然后将溶液冷却到室温,即得到柠檬酸稳定的纳米金粒子溶液;A2:苯硼酸‑生物素‑纳米金复合物的合成:用移液枪取出上述纳米金粒子溶液,然后加入包含三(2‑羧乙基)膦和多肽的PBS溶液,PBS溶液的pH 为7‑8,室温搅拌1小时以上得到生物素修饰的纳米金,再向反应溶液中加入4‑巯基苯硼酸溶液,继续搅拌0.5小时以上得到苯硼酸‑生物素‑纳米金复合物;A3:苯硼酸‑生物素‑纳米金复合物的纯化:将A2得到的反应产物离心分离,弃除上层未反应的多肽和三(2‑羧乙基)膦,将所得沉淀物用pH =7‑8的PBS溶液洗涤,将得到的纯化后的硼酸‑生物素‑纳米金复合物用PBS溶液分散,低温保存备用;(B)工作电极的制备,包括以下子步骤:B1:在金电极表面组装巯基化的核酸适配体;B2:采用6‑巯基己醇和牛血清蛋白封闭未反应的金电极表面;B3:将含糖蛋白的待测物修饰到B2得到的电极表面;B4:将步骤A制备得到的苯硼酸‑生物素‑纳米金复合物修饰到B3得到的电极表面;B5:将链霉亲和素‑碱性磷酸酶复合物修饰到B4得到的电极表面;B6:将B5得到的电极浸泡于p‑APP溶液中,催化产生电活性物质对氨基酚;(C)电化学测试:将步骤(B)制备得到的电极作为工作电极进行电性能测试。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘林夏宁邢云
申请(专利权)人:安阳师范学院
类型:发明
国别省市:河南;41

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