新型抗人BDCA-2抗体制造技术

本发明专利技术的目的在于提供一种抗人BDCA‑2抗体，其与人BDCA‑2结合，经由人BDCA‑2而调节浆细胞样树突状细胞的功能，由此预防或治疗自身免疫疾病。本发明专利技术人对抗人BDCA‑2抗体进行研究，提供了一种抗人BDCA‑2抗体，包含：由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的轻链可变区、由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区、以及由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型的抗人BDCA-2抗体。
技术介绍
BDCA-2(BloodDendriticCellAntigen2，血树突状细胞抗原2)为单次跨膜型的膜蛋白质。已知BDCA-2在人浆细胞样树突状细胞(plasmacytoiddendriticcells；pDCs)中限制性表达。BDCA-2通过向pDCs的细胞内传递信号而起到调节pDCs的功能的作用(Int.Immunol.,Vol.25,p.271-277,2013)。已知BDCA-2对于活化了的免疫反应而抑制性地起作用(非专利文献1)。关于该机制的详细内容，不清楚的部分仍然较多，但如后所述，据报道通过使用针对BDCA-2的抗体将BDCA-2分子交联，可以抑制处于活化状态的pDCs(专利文献1、非专利文献1～4)。已知作为BDCA-2的特异性表达细胞的pDCs在系统性红斑狼疮、硬皮病、多发性肌炎·皮肌炎、牛皮癣、Sjoegren综合征、类风湿性关节炎、Graves病、桥本氏病等自身免疫疾病中，在末梢血中或紊乱部位异常地活化，大量地产生干扰素(interferon；IFN)α，显然pDCs与这些自身免疫疾病的病态密切相关。(ArthritisRheum.，Vol.65，p.853-863，2013)。据报道在作为自身免疫疾病的一种的系统性红斑狼疮中，有时候患者的重症度与血中IFNα浓度存在正的相关性(Lupus，Vol.9，p.664-671，2000)。另外，当对于系统性红斑狼疮病态模型小鼠以不产生pDCs的方式实施基因改变时，抑制了系统性红斑狼疮的发病，由此直接证明了pDCs与系统性红斑狼疮病态有关(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，Vol.110，p.2940-2945，2013)。作为针对人BDCA-2的抗体，已知有作为小鼠单克隆抗体的AC144(专利文献1、非专利文献1～4)，据报道AC144通过将BDCA-2分子交联，可以抑制处于活化状态的pDCs。具体而言，据报道pDCs所诱导的IFNα的产生等可以使用AC144而得到抑制，其中pDCs被针对Toll样受体(Toll-likereceptor；TLR)9的配体所刺激(非专利文献1～4)。另外，据报道当将系统性红斑狼疮患者的血清用于刺激剂时，由pDCs诱导了IFNα产生，但是该IFNα的产生同样也可以使用AC144而得到抑制(非专利文献4)。现有技术文献专利文献专利文献1：国际公开第2001/036487号非专利文献非专利文献1：“PLoS生物学(PLoSBiology)”，(美国)，Sep.112007，Vol.5，10，p.2190-2200非专利文献2：“欧洲免疫学杂志(EuropeanJournalofImmunology)”，(德国)、Nov.162007，Vol.37，p.3564-3575非专利文献3：“细胞免疫学(CellularImmunology)”，(荷兰)，Jul.62010，Vol.265，p.15-22非专利文献4：“实验医学杂志(TheJournalofExperimentalMedicine)”，(美国)，Dec.172001，Vol.194，12，p.1823-1834
技术实现思路
专利技术要解决的课题本专利技术的课题在于提供一种抗人BDCA-2抗体，其通过与人BDCA-2结合、经由人BDCA-2来调节pDCs的功能从而预防或治疗自身免疫疾病。解决课题的手段本专利技术人在抗人BDCA-2抗体的制作中反复进行了大量的深入研究，结果发现：制作这样的抗体，其各自含有：由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的轻链可变区、由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区、以及由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区(实施例5)，将这些抗体与人BDCA-2的胞外区结合(实施例7)，经由人BDCA-2来调节pDCs的功能，从而抑制由pDCs产生IFNα(实施例8)。因此，提供了上述抗人BDCA-2抗体，从而完成了本专利技术。本专利技术包含以下的专利技术作为医学上或工业上有用的物质或方法。(1)一种抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，其选自以下的1)～4)中的任一个。1)包含由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段；2)包含由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段；3)包含由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段；以及4)作为通过上述1)～3)中的任一个抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段的翻译后修饰而生成的抗体或其抗原结合片段的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段。(2)如上述(1)所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，其包含由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的轻链可变区。(3)如上述(1)所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，其包含由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区。(4)如上述(1)所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，其包含由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区。(5)如上述(1)所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，其为通过以下的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段的翻译后修饰而生成的抗体或其抗原结合片段，所述抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段包含由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗人BDCA‑2抗体或其抗原结合片段，其选自以下(1)～(4)中的任一个：(1)包含由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗人BDCA‑2抗体或其抗原结合片段；(2)包含由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗人BDCA‑2抗体或其抗原结合片段；(3)包含由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的重链可变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变区的抗人BDCA‑2抗体或其抗原结合片段；以及(4)作为通过上述(1)～(3)中的任一个抗人BDCA‑2抗体或其抗原结合片段的翻译后修饰而生成的抗体或其抗原结合片段的抗人BDCA‑2抗体或其抗原结合片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.12.24 JP 2013-2653041.一种抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，其选自以下(1)～(4)
中的任一个：
(1)包含由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的
重链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的
轻链可变区的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段；
(2)包含由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的
重链可变区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的
轻链可变区的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段；
(3)包含由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的
重链可变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成
的轻链可变区的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段；以及
(4)作为通过上述(1)～(3)中的任一个抗人BDCA-2抗体或其抗原
结合片段的翻译后修饰而生成的抗体或其抗原结合片段的抗人
BDCA-2抗体或其抗原结合片段。
2.根据权利要求1所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，
包含由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变
区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的轻链可变
区。
3.根据权利要求1所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，
包含由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重链可变
区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链可变
区。
4.根据权利要求1所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，
包含由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的重链可
变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻链

\t可变区。
5.根据权利要求1所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，
其为通过下述抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段的翻译后修饰而
生成的抗体或其抗原结合片段：所述抗人BDCA-2抗体或其抗原结
合片段包含由序列号2的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重
链可变区及由序列号4的氨基酸序号1至109的氨基酸序列构成的轻
链可变区。
6.根据权利要求1所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，
其为通过下述抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段的翻译后修饰而
生成的抗体或其抗原结合片段：所述抗人BDCA-2抗体或其抗原结
合片段包含由序列号6的氨基酸序号1至120的氨基酸序列构成的重
链可变区及由序列号8的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成的轻
链可变区。
7.根据权利要求1所述的抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段，
其为通过下述抗人BDCA-2抗体或其抗原结合片段的翻译后修饰而
生成的抗体或其抗原结合片段：所述抗人BDCA-2抗体或其抗原结
合片段包含由序列号10的氨基酸序号1至122的氨基酸序列构成的
重链可变区及由序列号12的氨基酸序号1至108的氨基酸序列构成
的轻链可变区。
8.根据权利要求1及5至7中任一项所述的抗人BDCA-2抗体
或其抗原结合片段，其中，翻译后修饰为重链可变区N末端的焦谷
氨酰化和/或重链C末端的赖氨酸缺失。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的抗人BDCA-2抗体或其
抗原结合片段，包含作为人Igγ1恒定区的重链恒定区。
10.根据权利要求1至8中任一项所述的抗人BDCA-2抗体或
其抗原结合片段，包含作为人Igκ恒定区的轻链恒定区。
11.根据权利要求1至8中任一项所述的抗人BDCA-2抗体或
其抗原结合片段，包含作为人Igγ1恒定区的重链恒定区、以及作为
人Igκ恒定区的轻链恒定区。
12.根据权利要求2所述的抗人BDCA-2抗体，包含由序列号2
所示的氨基酸序列构成的重链以及由序列号4所示的氨基酸序列构
成的轻链。
13.根据权利要求3所述的抗人BDCA-2抗体，包含由序列号6
所示的氨基酸序列构成的重链以及由序列号8所示的氨基酸序列构
成的轻链。
14.根据权利要求4所述的抗人BDCA-2抗体，包含由序列号
10所示的氨基酸序列构成的重链以及由序列号12所示的氨基酸序列
构成的轻链。
15.根据权利要求1至11中任一项所述的抗原结合片段，其为
单链可变区片段、Fab、Fab’、或F(ab’)2。
16.一种抗人BDCA-2抗体，其为通过权利要求12至14中任
一项所述的抗人BDCA-2抗体的翻译后修饰而生成的抗体。
17.根据权利要求16所述的抗人BDCA-2抗体，其中，翻译后
修饰为重链可变区N末端的焦谷氨酰化和/或重链C末端的赖氨酸缺
失。
18.根据权利要求16所述的抗人BDCA-2抗体，包含由其中氨

\t基酸序号1的谷氨酰胺被修饰为焦谷氨酸的序列号2的氨基酸序号1
至449的氨基酸序列构成的重链以及由序列号4所示的氨基酸序列构
成的轻链。
19.根据权利要求16所述的抗人BDCA-2抗体，包含由序列号
6的氨基酸序号1至449的氨基酸序列构成的重链以及由序列号8所
示的氨基酸序列构成的轻链。
20.根据权利要求16所述的抗人BDCA-2抗体，包含由其中氨
基酸序号1的谷氨酰胺被修饰为焦谷氨酸的序列号10的氨基酸序号
1至451的氨基酸序列构成的重链以及由序列号12所示的氨基酸序
列构成的轻链。
21.一种多核苷酸，含有编码权利要求1至4中任一项所述的抗
人BDCA-2抗体或其抗原结合片段的重链可变区的碱基序列。
22.一种多核苷酸，含有编码权利要求1至4中任一项所述的抗
人BDCA-2抗体或其抗原结合片段的轻链可变区的碱基序列。
23.一种表达载体，包含根据权利要求21和/或22所述的多核<...

【专利技术属性】
技术研发人员：中尾慎典，伊藤昌之，天田由幸，
申请(专利权)人：安斯泰来制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP