【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种集成基因代谢工程和全基因组重排构建工业酿酒酵母工程菌的方法。
技术介绍
酒精浓醪发酵，简单来说就是发酵过程中的高浓度发酵，具体表现在生产有以下特点:1、高酒份；2、高渗透压；3、高酵母数。就酒精生产而言，不同原料、不同时期浓醪发酵的界限存在着明显的差别；大概区分如下:淀粉质原料:酒精浓度在14 16% (V/V)，糖蜜原料:酒精浓度在10 12% (V/V)0实现酒精浓醪发酵技术，可极大地提高设备利用率、减少工艺用水、降低蒸煮蒸馏能耗和生产成本，对提高乙醇生产的效率与经济和社会效益具有重要现实意义和应用价值。与常规酒精发酵相比，酿酒酵母在浓醪发酵过程中，不仅面临着更加严峻的环境胁迫(高渗、高酒精胁迫等)，还会因甘油、乙酸等副产物生成的增多而降低葡萄糖乙醇转化率。因此,为达到工业化生产对发酵速率、乙醇产量和糖醇转化率等技术指标的要求,选育副产物合成低并具有高耐性的工业酿酒酵母菌株是突破浓醪发酵技术瓶颈的关键所在。甘油是酿酒酵母发酵生产乙醇过程中主要的副产物，约消耗4% 10%的总碳源，如这些碳源用于生成乙醇，全球每年无需增加成本即可增产乙醇13亿...
【技术保护点】
一种集成基因代谢工程和全基因组重排构建工业酿酒酵母工程菌的方法，所述方法包括：（1）诱导酿酒酵母菌株产孢，分离纯化单倍体菌株，鉴定单倍体菌株交配型，选取交配型a的单倍体菌株Y1和交配型α的 单倍体菌株Y2作为出发菌株；（2）然后分别敲除菌株Y1和菌株Y2的编码甘油转运蛋白的基因FPS1，并在FPS1位点整合表达变链球菌（Streptococcus mutans）的3‑磷酸甘油醛脱氢酶（GAPN），对单倍体Y1和Y2分别采用G418r和Zeor抗性标记筛选，获得单倍体基因工程菌株：G418r抗性菌株YFG1和Zeor抗性菌株YFG2；（3）分别使用紫外和EMS对菌株YFG1和...
【技术特征摘要】
1.一种集成基因代谢工程和全基因组重排构建工业酿酒酵母工程菌的方法，所述方法包括: (1)诱导酿酒酵母菌株产孢，分离纯化单倍体菌株，鉴定单倍体菌株交配型，选取交配型a的单倍体菌株Yl和交配型α的单倍体菌株Υ2作为出发菌株； (2)然后分别敲除菌株Yl和菌株Υ2的编码甘油转运蛋白的基因FPSl，并在FPSl位点整合表达变链球菌(Streptococcus mutans)的3-磷酸甘油醒脱氢酶(GAPN),对单倍体I和Y2分别采用GMSlr和Zeolr抗性标记筛选，获得单倍体基因工程菌株:6418^抗性菌株YFGl和Zeolr抗性菌株YFG2 ； (3)分别使用紫外和EMS对菌株YFG...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴雪昌，王品美，郑道琼，陶香林，刘天喆，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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