分泌生产谷胱甘肽的重组菌株及其制备方法技术

技术编号:8677812 阅读:249 留言:0更新日期:2013-05-08 21:59
本发明专利技术公开了一种分泌产谷胱甘肽重组菌株,其谷胱甘肽胞外向胞内运输蛋白基因失活,并且表达外源谷胱甘肽胞内向胞外运输蛋白基因。本发明专利技术提供的重组菌株改变了谷胱甘肽运输通路,使合成的谷胱甘肽向胞外分泌,大大提高了谷胱甘肽产量,其细胞外谷胱甘肽的浓度是细胞内谷胱甘肽浓度2倍以上。本发明专利技术提供的重组菌株,GSH总产量可达到10g/L以上,运输到胞外的GSH的产量也可到7g/L以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物生物
,涉及发酵产谷胱甘肽的重组菌株及其制备方法。
技术介绍
谷胱甘肽(GSH)是生物体内一种重要的非蛋白巯基化合物,在医学和化妆品,食品加工,蛋白纯化等领域有着广泛的应用[Sies H.(1999)Free Rad Biol Med.27,916—921 ;Henry Jay Forman et, al, (2009)Molecular Aspects of Medicine 30,1-12;郑云朗(1995)生物学通报 30,22-24 ;Castro, VM.et, al (1993), Biochem J 292,371-377]。自上世纪70年代日·本协和公司(Kyowa Hakko Kogyo C0.)使用发酵法生产谷胱甘肽工业化以后,发酵法生产GSH就成为其工业生产研究的主要方法[Sakato,K.andTanaka H.1992, Biotechnol.Bioeng.40,904-912]。为此,上世纪七十年代后,各国开始对生物法合成GSH进行了大量研究,发表了大量文章和申请并公布了一系列相关专利[Kimura A.(1986)Adv.Bi本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分泌产谷胱甘肽重组菌株,其特征在于,其谷胱甘肽胞外向胞内运输蛋白基因失活,并且表达外源谷胱甘肽胞内向胞外运输蛋白基因。

【技术特征摘要】
1.一种分泌产谷胱甘肽重组菌株,其特征在于,其谷胱甘肽胞外向胞内运输蛋白基因失活,并且表达外源谷胱甘肽胞内向胞外运输蛋白基因。2.根据权利要求1所述的重组菌株,其特征在于,所述的谷胱甘肽胞外向胞内运输蛋白基因为Hgtl基因。3.根据权利要求1所述的重组菌株,其特征在于,所述的外源谷胱甘肽胞内向胞外运输蛋白基因为高等生物谷胱甘肽胞内向胞外运输蛋白基因或其突变体。4.根据权利要求3所述的重组菌株,其特征在于,所述的外源谷胱甘肽胞内向胞外运输蛋白基因为人MRP2突变体,其核苷酸序列如SEQ ID N0.23所示。5.根据权利要求1 4所述的重组菌株,其特征在于,其谷胱甘肽合成转录调控失调,并且其半胱氨酸向高半胱氨酸循环途径上的基因被失活或敲除。6.根据权利要求5所述的重组菌株,其特征在于,采用组成型或诱导型启动子表达谷胱甘肽相关合成酶基因gshl和gsh2基因或表达谷胱甘肽双功能合成酶gshF基因,使谷胱甘肽合成转录调控失...

【专利技术属性】
技术研发人员:许善峰
申请(专利权)人:镇江市德尔生物制品研究所有限公司
类型:发明
国别省市:

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