表达嗜热子囊菌光孢变种lgh基因的毕赤酵母工程菌株制造技术

技术编号:8449124 阅读:300 留言:0更新日期:2013-03-21 02:41
本发明专利技术是一种表达嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus?aurantiacus?var.levisporus)热稳定脂肪酶基因1gh的毕赤酵母工程菌GS-TA-LGH。通过RT-PCR及RACE等方法从嗜热子囊菌光孢变种中获得脂肪酶基因1gh,构建表达载体pPIC9K/1gh,并导入毕赤酵母GS115,从中筛选出一种表达脂肪酶的酵母工程菌GS-TA-LGH。该工程菌脂肪酶的酶活性可达19.92U/mg,酶在50℃保温60min,不损失活性,在60℃保温60min,仍有66%的活性。具有较高的热稳定性,作为热稳定脂肪酶的生产菌株,具有经济价值和社会价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程,具体地说是一种表达嗜热子囊菌光孢变种Thermoascu aurantiacus var. Ievisporus热稳定脂肪酶基因Igh的毕赤酵母工程菌株 Pichiapastoris GS-TA-LGH。
技术介绍
脂肪酶(lipase)全称三酰甘油酰基水解酶,属于α/β折叠酶家族。它能够分解生物产生的各种天然油和脂肪,在生物体内参与胞内脂的代谢等重要生命活动。脂肪酶的应用涉及洗涤剂、食品、油脂、皮革、医药等工业,近些年来又被研究用于制备化学方法难以得到的手性化合物,以及用于生产作为绿色可再生能源的生物柴油,使得它再度成为生物及化工工业的研究热点。因为微生物脂肪酶种类多、周期短,耐受性好且易于工业生产,所以在酶理论研究和工业应用中有着更重要的作用。嗜热子囊菌光抱变种(Thermoascusaurantiacus var. blevisporus)在以撤揽油为诱导源的培养基中50°C条件下可以产生热稳定的脂肪酶,但要使之用于规模化工业生产,还存在一些尚未解决的问题。如嗜热子囊菌光孢变种培养条件比较苛刻,高温发酵需要特殊设备,产酶效率低,造成成本增加,因此限制了本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种表达嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus?aurantiacus?var.levisporus)脂肪酶基因lgh的酵母工程菌株,其特征在于该菌为一种毕赤酵母,通过RT?PCR及RACE等方法从嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascusaurantiacus?var.levisporus)获得热稳定脂肪酶基因lgh,将该基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,获得表达重组质粒pPIC9K/lgh,转化毕赤酵母GS115,从中筛选出表达热稳定脂肪酶基因lgh的毕赤酵母工程菌株GS?TA?LGH。

【技术特征摘要】
1.一种表达嗜热子囊菌光抱变种(Thermoascus aurantiacus var. levisporus)脂肪酶基因Igh的酵母工程菌株,其特征在于该菌为一种毕赤酵母,通过RT-PCR及RACE等方法从嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascusauran...

【专利技术属性】
技术研发人员:李多川李萌郭晓红黄刚
申请(专利权)人:山东农业大学
类型:发明
国别省市:

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