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一株产葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其构建与应用制造技术

技术编号:8484720 阅读:322 留言:0更新日期:2013-03-28 03:59
本发明专利技术公开了一种产葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明专利技术采用重组DNA技术将黑曲霉葡萄糖氧化酶(GOD)基因克隆连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K,并转化Pichia?pastoris?GS115,经筛选鉴定得到一株可以产较高活性葡萄糖氧化酶的重组毕赤酵母Pichia?pastoris?GS115-pPIC9K-GOD,保藏编号为CCTCC?NO:M2012266。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在摇瓶中的酶活为52U/mL,比野生菌的酶活提高了近24倍,为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一株产葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其构建与应用,特别是一株诱导表达葡萄糖氧化酶基因的工程菌及其构建方法和应用。
技术介绍
葡萄糖氧化酶是生物领域中最主要的工具酶之一。自1967年Updike和Hicks将 GOD固定在Clark氧电极表面,将其应用于血糖测定以来,GOD被广泛应用于食品、饲料、医药等许多相关领域。在食品工业中,由于氧的存在,引起许多不利于产品质量的化学反应,并为许多微生物生长创造了条件。目前,许多国家已将GOD作为工人的安全抗氧剂而广泛应用于各种食品和食品加工工艺中。虽然用途多样,GOD的作用主要在于除葡萄糖、除氧、形成过氧化氢、形成葡萄糖酸四个方面。利用其专一氧化酶的原理,制成葡萄糖氧化酶分析仪,能快速准确简易地测定各种食品中的葡萄糖含量,指导生产。在医药工业中,GOD作为试剂盒、酶电极等用于血清(浆)、尿液及脑脊液中葡萄糖的体外定量分析;G0D制成的酶制剂还可用于除去或缓解牙斑、牙垢和龋齿的形成防止口腔疾病和牙病的发生。此外,由于可以催化生成H2O2,还可用于对H2O2敏感的淋巴瘤的导向目标的治疗。GOD还是一种新型的酶饲料添加剂,能够改善动物肠道环本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株产葡萄糖氧化酶的基因工程菌,于2012年7月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC?NO:M?2012266。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈坚顾磊张娟堵国成沈依娜李梦洁李婷王丹丁雪殷政
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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