核酸或免疫色谱法用试剂组合物、核酸或免疫色谱法测定方法及核酸或免疫色谱法测定用试剂盒技术

本发明专利技术提供一种试剂组合物，其在进行核酸色谱法或免疫色谱法测定时，通过降低由分析对象物以外的成分的非特异性反应产生的结合，且提高分析对象物的分散能力，将色谱载体上的展开性优化，同时促进特异性反应，从而即使使用低浓度的分析对象物也能够进行准确且迅速的判断。一种核酸色谱法或免疫色谱法用试剂组合物，其含有重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物、2价或3价的金属的盐、非离子性表面活性剂、及水溶性非质子性有机化合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及核酸色谱法或免疫色谱法中使用的试剂组合物、使用其的核酸色谱法或免疫色谱法测定方法、及包含其的核酸色谱法或免疫色谱法测定用试剂盒。
技术介绍
以往，在核酸色谱法或免疫色谱法测定中，为了提高灵敏度，惯用方法是增加涂布到固相上的抗体、核酸的量或者增加与标记物结合的抗体、核酸的量。但是，存在以下问题:若增加抗体、核酸等反应体，则容易产生非特异性的反应，此夕卜，若为少量则得不到充分的灵敏度。在核酸色谱法或免疫色谱法中，出于各种目的而使用各种试剂成分。进行以下尝试:添加聚阴离子等水溶性高分子化合物、无机盐类、表面活性剂等添加物，来抑制非特异性的反应、或者提高灵敏度(专利文献I 11)。但是，所有添加物的组合均尚未充分达成非特异性反应的抑制或灵敏度、色谱载体上的展开性的提高。现有技术文献专利文献专利文献1:日本特开2001-21560号公报专利文献2:日本特开2006-215044号公报专利文献3:日本特开2006-317226号公报专利文献4:日本特开2007-121204号公报专利文献5:日本特开2007-121205号公报专利文献6:日本特开2007-322310号公报专利文献7:日本特开2009-52945号公报专利文献8:日本特开2010-14507号公报专利文献9:日本特开2010-19794号公报专利文献10:日本特开2010-44094号公报专利文献11:日本特表2010-50055号小册子
技术实现思路
专利技术要解决的问题本专利技术的课题在于，在进行核酸色谱法或免疫色谱法测定时，通过降低由分析对象物以外的成分的非特异性反应产生的结合，且提高分析对象物的分散能力而将色谱载体上的展开性优化，同时促进特异性反应，从而即使使用低浓度的分析对象物也能够进行准确且迅速的判断。用于解决问题的方案本专利技术人发现，通过使用特定的添加剂的组合可解决上述的课题，从而达成本专利技术。本专利技术为一种核酸色谱法或免疫色谱法用试剂组合物，其含有重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物、2价或3价的金属的盐、非离子性表面活性剂、及水溶性非质子性有机化合物。本专利技术为一种核酸色谱法或免疫色谱法测定方法，其包括使用上述的核酸色谱法或免疫色谱法用试剂组合物将待测物展开的工序。本专利技术为一种核酸色谱法或免疫色谱法测定用试剂盒，其包含上述的色谱法用试剂组合物作为待测物的展开液。专利技术的效果根据本专利技术，在进行核酸色谱法或免疫色谱法测定时，通过降低由分析对象物以外的成分的非特异性反应产生的结合，且提高分析对象物的分散能力，同时促进特异性反应，从而即使使用低浓度的分析对象物也能够进行准确且迅速的判断。附图说明图1是核酸色谱法测定的简略工序图。图2是核酸色谱法测定用试剂盒的简略图。图3是表示核酸色谱法测定的测定原理的简略图。具体实施例方式本专利技术的核酸色谱法或免疫色谱法用试剂组合物含有重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物、2价或3价的金属的盐、非离子性表面活性剂、及水溶性非质子性有机化合物。(重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物)重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物只要是重均分子量为8000以上、并且具有水溶性的化合物，则没有特别限定。重均分子量优选为10000以上。前述水溶性高分子只要重均分子量为8000以上则可以使用重均分子量已知的市售的化合物。当使用合成的水溶性高分子时，使用通过高分子的分子量测定中通用的凝胶渗透色谱法(以下GPC)测定得到的重均分子量为8000以上的化合物。当重均分子量低于8000时，在核酸的杂交、抗原抗体反应中见到的形成与分析对象物的特异性复合体的结合力降低，利用色谱法检测的检测灵敏度降低。更优选使用重均分子量为2万 100万的水溶性高分子。重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物的“水溶性”是指，相对于IL的20°C的水，IOg以上、优选50g以上的化合物发生溶解。重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物例如为选自由聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇/聚丙二醇嵌段共聚物等聚亚烷基二醇类；甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素等纤维素类；聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙烯基甲基醚等乙烯基系高分子类；聚甲基丙烯酰胺、聚丙烯酰胺等酰胺系高分子类；及聚阴离子组成的组中的I种以上。作为聚阴离子，可列举出多糖阴离子、聚谷氨酸、聚天冬氨酸等合成肽系阴离子、合成核酸系聚阴离子，优选多糖阴离子。作为多糖阴离子，例如可列举出选自由硫酸葡聚糖、硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、透明质酸、肝素及其盐组成的组中的I种以上。作为盐，有钠、钾、镁盐等。其中，从获得的容易性和经济性出发，更优选硫酸葡聚糖及其盐。相对于试剂组合物，重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物的量优选为0.1 5重量％，更优选为0.5 3重量％。分子量为8000以上的水溶性高分子化合物提高形成与分析对象物的特异性复合体的结合力，促进特异性反应。(2价或3价的金属的盐)2价或3价的金属只要是2价或3价的金属则没有特别限定，例如可列举出镁、钙等碱土金属(2价)、硼、铝等铝族金属(3价)，优选镁、钙或铝，特别优选镁或钙，最优选镁。当使用碱金属(I价)时，展开速度降低，并且非特异反应也增大。2价或3价的金属的盐的阴离子没有特别限定，例如可列举出氯化物、溴化物等卤化物；硫酸盐；磷酸盐；碳酸盐；硼酸盐。优选使用氯化物、溴化物等卤化物。2价或3价的金属的盐优选为选自由氯化镁、硫酸镁、磷酸镁、碳酸镁等镁盐；氯化钙、硫酸钙、磷酸钙等钙盐及氯化铝、硫酸铝、碳酸铝等铝盐组成的组中的I种以上。相对于试剂组合物，2价或3价的金属的盐的量优选为0.1 IOOmM,更优选为0.5 50mM，进一步优选为I 10mM。2价或3价的金属的盐提高毛细管现象的展开速度，且不会引起免疫复合体的非特异反应。(非离子性表面活性剂)非离子性表面活性剂例如可列举出聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基苯酚醚、烷基葡糖苷、聚氧乙烯脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、脂肪酸链烷醇酰胺。非离子性表面活性剂的HLB优选为10 18，更优选为13 18。作为非离子性表面活性剂，优选聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，例如特别优选选自由单月桂酸聚氧乙烯山梨糖醇酐、单硬脂酸聚氧乙烯山梨糖醇酐、三硬脂酸聚氧乙烯山梨糖醇酐及单油酸聚氧乙烯山梨糖醇酐组成的组中的I种以上。相对于试剂组合物,非离子性表面活性剂的量优选为0.1 5重量％,更优选为0.5 2.5重量％，进一步优选为0.5 I重量％。(水溶性非质子性有机化合物)水溶性非质子性有机化合物只要是为水溶性、且不具有质子性的有机化合物则没有特别限定。“水溶性”是指在不发生相分离的情况下可与水以任意的比率混合的性质，优选为相对于IL的20°C的水，IOg以上、优选50g以上化合物发生溶解的有机化合物。“非质子性”是指不含酸性氢，不作为氢键供体起作用的性质。作为水溶性非质子性有机化合物，可列举出亚砜类、N，N’- 二烷基酰胺类、酮类、腈类、环状醚类等。作为亚砜类，可列举出二甲基亚砜、甲基乙基亚砜、二乙基亚砜、丁基乙基亚砜等。作为N，N’ - 二烷基酰胺类，可列举出二甲基乙酰胺等二烷基乙本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.09.08 JP 2010-2007931.一种核酸色谱法或免疫色谱法用试剂组合物，其含有重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物、2价或3价的金属的盐、非离子性表面活性剂、及水溶性非质子性有机化合物。2.根据权利要求1所述的试剂组合物，其中，重均分子量为8000以上的水溶性高分子化合物为选自由聚亚烷基二醇类、纤维素类、乙烯基系高分子类、酰胺系高分子类及聚阴离子组成的组中的I种以上。3.根据权利要求2所述的试剂组合物，其中，聚阴离子为多糖阴离子。4.根据权利要求3所述的试剂组合物，其中，多糖阴离子为选自由硫酸葡聚糖、硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、透明质酸、肝素及其盐组成的组中的I种以上。5.根据权利要求1 4中任一项所述的试剂组合物，其中，水溶性非质子性有机化合物为选自由亚砜类及N，N’ - 二烷基酰胺类组成的组中的I种以上。6.根据权利要求1 5中任一项所...

【专利技术属性】
技术研发人员：榊原雄广，
申请(专利权)人：田中贵金属工业株式会社，
类型：
国别省市：