鸡毒支原体灭活疫苗的效力检验方法及其应用技术

技术编号:8681364 阅读:349 留言:0更新日期:2013-05-09 01:25
本发明专利技术涉及兽用生物制品技术领域。公开了一种鸡毒支原体灭活疫苗的效力检验方法,同时本发明专利技术还可应用于疫苗的质量控制,具体包括免疫攻毒保护率、疫苗质量标准的确定、免疫期限的测定和临床监测。实验证实发明专利技术使用血清学检测方法(包括ELISA和HI)替代本动物攻毒试验,方法简便、快速、结果准确、重复性强、特异性强,该方法的建立减少免后攻毒看气囊病变积分的主观性及避免散毒,也为建立合理的免疫程序提供依据,具有普遍推广的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种鸡毒支原体灭活疫苗的效力检验方法及其应用,属于生物

技术介绍
鸡毒支原体是家禽最常见的病原菌之一。该病在规模化鸡场中经常缓慢流行,给养鸡业造成的主要损失是发病鸡群的死淘率明显上升;肉鸡和生长鸡的发育受阻、饲料报酬降低;产蛋鸡的产蛋下降;随着我国养鸡业集约化程度的提高,鸡毒支原体的流行势头愈加猛烈,继发感染其他疾病,近年来常有呼吸道疾病混合感染为主的疾病致使大量鸡死亡,且抗生素的频繁使用,使得耐药性增强,给本病的防治带来很大的困难,因此对该病的预防也越来越重要。目前在生产中广泛应用灭活疫苗免疫是控制鸡毒支原体的有效办法。检验疫苗效力的方法是免疫攻毒保护试验,判断气囊病变积分情况。上述实验评价结果时常因主观因素偏差造成检验结果常有误差,并且强毒攻击也存在生物安全隐患,易散毒。本专利技术可用血清学测抗体效价的方法替代本动物攻毒试验,结果客观、准确、重复性强、操作简单,安全可靠,具有普遍推广的意义。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的主要目的在于提供一种鸡毒支原体灭活疫苗的效力检验方法,包括如下步骤:I)用鸡毒支原体灭活疫苗免疫鸡后25-35天后采血并分离血清;2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸡毒支原体灭活疫苗的效力检验方法及其应用,其特征在于:包括如下步骤:1)用鸡毒支原体灭活疫苗免疫鸡后25~35天后采血并分离血清;2)用血清学方法(ELISA方法或HI方法)测定血清的抗体效价替代免疫攻毒保护。

【技术特征摘要】
1.种鸡毒支原体灭活疫苗的效力检验方法及其应用,其特征在于:包括如下步骤: 1)用鸡毒支原体灭活疫苗免疫鸡后25 35天后采血并分离血清; 2)用血清学方法(ELISA方法或HI方法)测定血清的抗体效价替代免疫攻毒保护。2.据权利要求1所述方法,其特征在于,所述鸡毒支原体灭活疫苗免疫方法为皮下注射或肌肉注射。3.据权利要求1所述方法,其特征在于,所述免疫剂量为I羽份,每羽份的量为0.2ml 0.6ml。4.据权利要求1所述方法,其特征在于,所述MG抗体ELISA(ELISA,MGAb)试剂盒为美国IDEXX公司生产(试剂包括:包被的微量反应板、样品稀释液、阳性对照、阴性对照、酶标二抗、底物溶液和终止液),购自北京爱德士世纪元亨有限公司。ELISA检测方法按IDEXXMG抗体ELISA(ELISA,MGAb)试剂盒方法进行。5.据权利要求1所述方法,其特征在于,所述血凝抑制效价的测定方法,包括如下步骤: I)鸡毒支原体血球凝集试验:HA抗原二倍系列稀释。将30ul鸡红细胞悬液加入含有30ul稀释抗原的反应孔内,充分振荡,在室温静置30min,判定结果时将反应板倾斜与水平呈45°C角,对照孔内和HA阴性孔的红细胞完全沉淀到孔底中心,呈泪珠样流淌;HA阳性孔的红细胞均匀分布在孔底或呈锯齿样凝集,使红细胞凝集的最大稀释倍数为该抗原的HA效价;2)鸡毒支原体血凝抑制试验:在96孔V型微量反应板,每行第I...

【专利技术属性】
技术研发人员:丁美娟王伟尹秀凤黄显明许秀梅汪爱芬吴娟张海涛徐延伟薛家宾张小飞
申请(专利权)人:南京天邦生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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