一种体外扩增γδT细胞的方法技术

本发明专利技术涉及γδT细胞培养方法，具体涉及一种体外扩增γδT细胞的方法，该方法的操作步骤如下：抗TCRγδ抗体和CD28McAb预先包被T75培养瓶，备用。分离患者外周血单个核细胞（PBMC），用含5%自体血浆的无血清培养基将PBMC浓度调整为1×106?/ml，再将PBMC细胞悬液转入T75培养瓶中，加入含有适当浓度Zoledronat，HSP70，IL-2，IL-7，IL-15的初始培养基，37℃、5%CO2的饱和湿润环境中培养，根据细胞的生长情况，每2~3天更换培养基，将细胞浓度控制在2.5×106?/ml左右，同时全量补充Zoledronat，HSP70，IL-2和IL-7，IL-15，持续培养12~16天后，即可获得大量较高纯度的γδT细胞。

【技术实现步骤摘要】
一种体外扩增Y δ T细胞的方法本专利技术涉及Y δ T细胞培养方法，具体涉及一种体外扩增Y δ T细胞的方法。根据T细胞表面受体(TCR)的不同可将T淋巴细胞分为两种α β T淋巴细胞和Y s T淋巴细胞。在人体中，α β T淋巴细胞是参与免疫应答的主要细胞群，占成熟T细胞的90 95%，而Y δ T细胞仅占外周血T淋巴细胞的O. 5%_5%，但Y δ T细胞是先于α β T细胞出现的，主要分布于皮肤，小肠、食道、肺和生殖器官等上皮组织内。Y S T细胞属于机 体的第一线防御细胞，在抗微生物感染免疫，尤其是在皮肤黏膜表面的免疫防御功能中，以及抗分枝杆菌感染中发挥重要作用。此外，研究还发现，Y S T细胞具有无MHC限制性的杀瘤作用，对多种自体、同种异体或异种肿瘤细胞均表现出显著的杀伤活性，因此，Y ST细胞作为一类重要的肿瘤过继免疫治疗的候选细胞正在引起越来越多国内外学者的关注。但是另一方面，由于Y S T细胞在人体中所含比例较低，分离纯化到大量的Y δ T细胞较为困难，因而限制了其临床使用。因此Y ST细胞体外高效扩增是解决这一问题的主要方法。在这一领域，人们做了很多有益的尝试，国本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体外扩增γδT细胞的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：a.用抗TCRγδ抗体和CD28McAb预先包被T75培养瓶以备用，b.将外周血单个核细胞转入包被的T75培养瓶中，加入含有唑来膦酸、HSP70、IL?7、IL?15和IL?2的无血清培养基，放入二氧化碳培养箱培养12~16天后获得大量较高纯度的γδT细胞。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：解尚云，叶永清，谭令兵，
申请(专利权)人：上海柯莱逊生物技术有限公司，
类型：发明
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