一种培养扩增人类毛囊干细胞及重编程为诱导多能干细胞的方法技术

本发明专利技术涉及一种培养扩增人类毛囊干细胞及重编程为诱导多能干细胞的方法，其具体步骤为：将准备拔取毛发的部位贴根部剪去至仅留0.2-0.3cm左右毛发根，75％酒精消毒10min；漂洗；将单根毛发种入培养皿中，采用毛囊干细胞培养基培养；1周后每3-4天换液一次；E、逆转录病毒包装；诱导毛囊干细胞重编程为iPS细胞；毛囊干细胞来源的iPS细胞维持培养及鉴定。本发明专利技术过程简单；无需蛋白酶消化成单细胞；扩增的毛囊干细胞中β-整合素和角蛋白-19阳性率达90％以上；为皮肤缺损的快速修复、毛囊干细胞的生长与发生的分子机理研究、表观遗传学研究和重编程为诱导多能干细胞提供充足的种子细胞来源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及干细胞领域，特别涉及。
技术介绍
根据细胞发育进程可将干细胞分为成体干细胞(adult stem cells)和胚胎干细胞(embryonic stem cells),根据干细胞的分化潜能等特点,可将干细胞可分为全能干细胞(totipotent stem cells)、多倉泛干细胞(pluripotent/multipotent stem cells)、专倉泛干细胞(unipotent stem cells)和终末分化细胞。全能干细胞可以分化形成人体所具有的全部细胞、或发育形成新的个体，是指在早期胚胎发育过程中的受精卵及受精卵进一步分裂形成2个、4个或8个卵裂球时期的细胞。多能干细胞(英文表述为pluripotent stem cells)可以分化形成人体所具有的全部细胞、但不能发育形成新的个体，主要存在于胚胎之中。在早期胚胎发育过程中，受精卵进一步分裂形成的桑椹胚，桑椹胚再进一步分化形成胚泡；胚泡的成胚体细胞，及在此阶段以前的细胞，只要提取一个细胞，都可以可以分化形成人体所具有的全部细胞。另一概念上的多能干细胞(英文表述为multipotent stem cells本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种培养扩增人类毛囊干细胞及重编程为诱导多能干细胞的方法，其特征在于，其具体步骤为：A、将准备拔取毛发的部位贴根部剪去至仅留0.2?0.3cm左右毛发根，75％酒精消毒10min；B、用清洁眉镊快速将发根拔出，并快速置入无菌的PBS中漂洗；C、将单根毛发种入培养皿中，采用毛囊干细胞培养基培养；D、每天观察毛发的生长情况，1周后每3?4天换液一次；E、逆转录病毒包装：采用试剂Fugene6和PLAT?A细胞进行逆转录病毒的包装，分别利用pMX?hOct4、pMX?hSox2、pMX?hKlf4和pMX?hc?Myc包装出四种逆转录病毒；F、通过逆转录病毒感染毛囊干细胞，促使其表达外源的人类Oct...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：谌兵来，高擎，曾桥，
申请(专利权)人：谌兵来，高擎，曾桥，
类型：发明
国别省市：