一种人角质干细胞体外诱导分化为人毛囊细胞的方法技术

本发明专利技术涉及一种人角质干细胞体外诱导分化制备人毛囊细胞的方法。其技术方案：将人角质干细胞移入装有成分确定的角质形成细胞-SFM初始培养液培养皿中进行贴壁培养，得到初始诱导的人角质干细胞，再制备成细胞膜片备用；取小鼠胚胎期13.5天的小鼠头部的下颚，去除下颚第一磨牙的上皮组织，取出牙间充质干细胞组织，吹打成单细胞悬液，离心后重聚成第一磨牙间充质干细胞团。将人角质干细胞膜片与牙间充质干细胞团重聚再植入小鼠肾包膜下继续诱导分化，得到具有毛囊细胞的组织块。本发明专利技术可成功将人角质干细胞诱导分化成人毛囊细胞，整体技术和方法既合理高效，又简便实用，人工诱导分化的人毛囊细胞可望通过移植到皮肤，长出毛发。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物
，涉及一种诱导分化细胞的方法。具体涉及。
技术介绍
角质干细胞来源于表皮基底层膜，是一种具有增殖和多向分化的潜能，能分化形成表皮各层组织，如生发层、颗粒层、透明层、角质层等。其常处于静息状态，具有非成熟细胞的形态学特征和很强的自我更新能力。毛囊与牙齿等器官的发育在最初期都具有相同的发育模式，即上皮组织受到间充质组织的诱导后，上皮细胞不断增殖，同时上皮向内凹陷形成芽蕾状结构。在一定的条件下，角质干细胞具有增殖和多向分化的潜能，能分化形成表皮各层组织，而后表皮在间充质组织的诱导作用下向内凹陷形成毛芽，进一步诱导分化形成毛囊细胞。目前角质干细胞目前已大量应用于组织工程皮肤的构建。角质干细胞诱导分化成为毛囊细胞成功的报道很少。本专利技术人角干质细胞体外诱导分化为人毛囊细胞的的整体技术和方法既合理高效，又简便实用，有较高的诱导分化的转化率。未来人工诱导分化的人毛囊细胞可以通过移植到皮肤，长出毛发，这项技术有望应用于治疗秃头症。
技术实现思路
本专利技术目的是以人角质干细胞为材料，经复合生长因子和小鼠下颚磨牙间充质干细胞联合诱导分化为人毛囊细胞。人工诱导分化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人角质干细胞体外诱导分化为人毛囊细胞的方法，其特征在于：?1）将人角质干细胞进行复苏后，移入预先装有成分确定的角质形成细胞?SFM初始培养液的培养皿中；将培养皿放置在CO2气体培养箱进行贴壁培养；当人角质干细胞贴壁生长占据培养皿底面积的50～60%时，将初始培养液替换为诱导培养液，进行初始诱导，得到初始诱导的人角质干细胞，再制备成细胞膜片备用；?2）切取小鼠胚胎期13.5天的小鼠头部的下颚，在2.0?U/ml的中性蛋白酶中消化30分钟，于体式显微镜下去除下颚第一磨牙的上皮组织，取出下颚第一磨牙间充质干细胞组织；将下颚第一磨牙间充质干细胞组织在高糖Dulbecco改良Eagle培养基中吹打成...

【技术特征摘要】
1.一种人角质干细胞体外诱导分化为人毛囊细胞的方法，其特征在于: 1)将人角质干细胞进行复苏后，移入预先装有成分确定的角质形成细胞-SFM初始培养液的培养皿中；将培养皿放置在CO2气体培养箱进行贴壁培养；当人角质干细胞贴壁生长占据培养皿底面积的50~60%时，将初始培养液替换为诱导培养液，进行初始诱导，得到初始诱导的人角质干细胞，再制备成细胞膜片备用； 2)切取小鼠胚胎期13.5天的小鼠头部的下颚，在2.0 U/ml的中性蛋白酶中消化30分钟，于体式显微镜下去除下颚第一磨牙的上皮组织，取出下颚第一磨牙间充质干细胞组织；将下颚第一磨牙间充质干细胞组织在高糖Dulbecco改良Eagle培养基中吹打成单细胞悬液，用细胞计数板取I~2 X IO6个细胞，200 X g离心5分钟，重聚成第一磨牙间充质干细胞团； 3)将备用的初始诱导的人角质干细胞膜片，与分离好的小鼠头部的下颚第一磨牙间充质干细胞团体外重聚成嵌合细胞块...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄镇，张彦定，陈素珠，林鑫，
申请(专利权)人：福建师范大学，
类型：发明
国别省市：