【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞
,具体而言,涉及一种新型成体干细胞、其筛选方法、试剂盒及其用途,特别是涉及通过化疗药物联合细胞标记的方法从啮齿动物、人类或其他哺乳动物的正常、肿瘤/癌前、肿瘤/癌性、转移瘤/癌组织的活检、离体组织样品、细胞系样品中筛选获得的干细胞,更具体地,涉及采用化疗药物预先对细胞群进行处理,清除其中的增殖性细胞群,进而筛选、富集和激活其中的干细胞群,之后,采用可以标记干细胞的标记对其和或子代进行识别的筛选方法,特别地,涉及一种用于从混合细胞群中筛选和标记新型成体干细胞的试剂盒,筛选的新型成体干细胞在临床、基础与应用研究、治疗、组织工程、药物筛选、修复和再生失去功能的病变组织或器官中的应用。技术背景众所周知,干细胞具有下述特征1)长期的自我更新能力;2)能够产生高度分化的其它种类细胞;3)本身处于未分化状态;4) 一般处于慢周期或静息状态;5)组织中处于相应的小生境(niches)内。 干细胞包括胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)和成体干细胞(Adult Stem Cells,ASCs),胚胎干细胞是全能性的,在理论 ...
【技术保护点】
一种新型干细胞,其特征在于:干细胞群来源于啮齿动物、人及其他哺乳动物的正常、肿瘤/癌前、肿瘤/癌性、转移瘤/癌组织的活检、离体样品组织、细胞系,通过化疗药物联合细胞标记筛选而获得,其中该新型干细胞群可长期保留细胞标记。
【技术特征摘要】
1.一种新型干细胞,其特征在于干细胞群来源于啮齿动物、人及其他哺乳动物的正常、肿瘤/癌前、肿瘤/癌性、转移瘤/癌组织的活检、离体样品组织、细胞系,通过化疗药物联合细胞标记筛选而获得,其中该新型干细胞群可长期保留细胞标记。2.根据权利要求I所述的一种筛选新型成体干细胞的方法,其特征在于,所述筛选、识别方法具有通用性,包括 采用化疗药物对细胞群中的成体干细胞进行筛选,之后再采用细胞标记对筛选后的干细胞群进行识别的步骤, 所述化疗药物预先加入所述细胞群中,直接清除其中的增殖性细胞群,从而筛选、富集其中的干细胞群, 所述干细胞群经耐受性筛选后激活进入细胞周期,之后,加入细胞标记对筛选后激活的所述干细胞群和或其子代进行识别, 其中,所述化疗药物选择具有清除增殖性细胞并激活干细胞群作用的试剂或物质,其中,包括已知的抗生素化疗药物、抗代谢化疗药物、烷化剂化疗药物、激素及内分泌化疗药物、植物化疗药物、亚硝脲类化疗药物、抗体阻断剂化疗药物、门冬酰胺酶、甲基苄肼、草酸钼、钼类、丙亚胺、羟基脲和氨烯咪胺的一种或两种以上的组合一种或两种以上的组合,或选择以所述抗代谢化疗药物、烷化剂化疗药物、抗生素化疗药物、植物化疗药物联合钼类化疗药物任一一种的组合,其中,所述使用的化疗药物的浓度约lmg/kg-100mg/kg细胞重量,且所述化疗药物作用细胞群的时间范围为O. lh-72h,或选择使用所述的化疗药物的浓度约10mg/kg-50mg/kg细胞重量,且所述化疗药物作用细胞群的时间为O. 5h_36h。其中,所述标记细胞的标记选择BrdU、氣标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)、5_乙炔基_2’脱氧尿嘧啶核苷(EDU)和其他可标记所述干细胞群或细胞系或其子代的任一分子或物质,其中,所述使用的标记浓度约O. lmg/kg-15mg/kg细胞重量,所述标记作用于所述筛选后干细胞群的时间为O. 01h-96h,或者,所述使用的标记浓度约O. 5mg/kg-10mg/kg细胞重量,所述标记作用于所述筛选后干细胞群的时间为O. 05h-72h。3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述标记能够识别经耐受筛选的干细胞和或其子代的个数为一个或两个以上,其中,干细胞和或其子代可长期保留标记。4.根据权利要求I或2所述的方法,其特征在于,所述干细胞群和或其子代源自啮齿动物、人类或其他哺乳动物活检/离体的正常肝脏组织、肾脏组织、心脏组织、胰腺组织、肠组织、表皮组织、卵巢组织、睾丸组织、神经组织、胃组织、肺组织、乳腺组织、脂肪组织、肌肉组织、甲状腺、间充质、脾脏组织、骨髓组织、外周血、脐带血、经血、胎盘、牙组织、眼组织和脑组织中的一种或两种以上所组成的组中。5.根据权利要求I或2所述的方法,其特征在于,所述筛选分离的干细胞群和或其子代源自介于正常与...
【专利技术属性】
技术研发人员:李福生,卢磊磊,卢淼淼,卢晶晶,
申请(专利权)人:李福生,卢磊磊,
类型:发明
国别省市:
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