本发明专利技术公开了一种植物与微生物天然多糖的纯物理制备方法，具体过程如下：将样品烘干，粉碎，过60-80目筛；然后将所得粉末加水混匀，物料注入高压均质机，经过一定压力均质，离心取上清液；将所得上清液首先通过截留分子量大于植物或微生物活性多糖分子量2-5倍的超滤膜得透过液，透过液再经截留分子量为植物或微生物活性多糖分子量1/5-1/2的超滤膜分离得截留液，截留液浓缩，冷冻干燥，得样品活性多糖。本发明专利技术的突出特点是多糖提取率高，耗时短，脱蛋白效果优于传统sevage法，多糖提取过程中不使用任何有机试剂，生产成本降低，无污染。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种植物与微生物多糖的制备方法，具体地说是一种提取植物与微生物多糖的纯物理制备方法。
技术介绍
多糖是由二十多个单糖到上万个单糖通过糖苷键连接成的一类重要的大分子物质，生物活性多糖主要分为植物多糖、微生物多糖、动物多糖，其作为一种重要的生物体内大分子，与核酸和蛋白质一样与生物体的机能密切相关。越来越多的研究表明多糖具有抗肿瘤、抗衰老、抗菌、抗氧化、降血糖和调节免疫等功能，因此，多糖具有较好的开发价值和应用价值。而多糖提取工艺一直是研究者关注的重点，针对目前多糖传统提取工艺的 缺陷，本专利技术提供了一种针对植物多糖与微生物多糖的纯物理制备方法，由于专利技术中涉及超滤膜的选择，且根据生物种类的不同，多糖分子量呈现出较大差异，分子量范围可由几千到几十万，为获得一定分子量范围的活性多糖，孔径较大的超滤膜截留分子量大于植物或微生物活性多糖分子量的2-5倍，孔径较小的超滤膜截留分子量为植物或微生物活性多糖分子量的1/5-1/2。例如本专利技术选取植物材料九华山多花黄精(活性多糖分子量8. 9KDa)、霍山细茎石斛(活性多糖分子量28KDa)，微生物材料福建古田猴头菇(活性多糖分子量20KDa)、白茯苓(活性多糖分子量10-40KDa)为代表材料，超滤膜分子量范围为3_50KDa。目前多糖的提取方法主要采用水提醇沉法，而水提醇沉法存在诸多缺点，例如CN 101255199 A公开了 “一种从黄精中提取黄精多糖的方法”，该方法将黄精加热煎煮0. 5-1. 5小时，提取多次，醇沉12-36小时，得黄精多糖。该工艺提取时间长，高温煎煮对多糖结构造成破坏，醇沉过程只能作为粗略分级，且消耗大量酒精，增加了生产成本，难以达到高效、绿色工业化生产需求。CN 101698684 A (一种从人参中提取多糖的方法及应用)和CN 101613418 A (一种提取双胞蘑燕多糖的方法)等所述,都采用sevage法脱蛋白，需用大量有毒试剂氯仿与正丁醇，操作繁琐，多糖损失严重；醇沉与除蛋白后得到的多糖由于有机试剂的残存，更不能直接应用于食品、医药等领域，而且废液排放还造成环境污染。因此，常规水提醇沉法已日益不适于当今工业化生产需求。本专利技术采用高压均质技术与超滤技术联用提取多糖，两种技术的联用至今未见文献报道。高压均质技术已广泛应用于食品行业的物料细化与乳化，采用高压均质技术对物料进行超微粉碎，使多糖更容易渗透与扩散，提取率升高，均质过程只需5-10分钟，耗时短，高压均质法提取的同时可将与多糖结合的蛋白分离，脱蛋白效果显著。超滤技术兼有分离、浓缩的功能，具有操作简单、无相变、能对特定分子量范围多糖分离等特点。本专利技术不使用任何有机试剂，两种技术联用为天然活性多糖提取提供了一条高效、简洁、绿色环保的物理制备方法，非常适合工业化生产，具有广阔的应用前景。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种提取植物与微生物多糖的纯物理方法，所要解决的问题是通过高压均质技术与超滤技术的联用，使多糖提取率升高，耗时缩短，蛋白含量降低，提取过程无污染。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案 植物与微生物多糖的纯物理制备方法，包括以下步骤 (1)将植物或微生物样品前处理，烘干，根据物料软硬程度，用粉碎机粉碎2-4次，每次30-50秒,得样品粉,将样品粉过60-80目筛； (2)称取步骤(I)所得粉末放于容器中，加入10-30倍水，搅拌混匀；(3)调节低温循环泵温度，设置上下限温度，保证高压均质机内部工作温度为riO°C； (4)将步骤(2)所得混合物料倒入均质机中，物料首先在低压强5-10MPa条件下循环2-4次，然后调节阀门压强为20-100MPa，待压强稳定后，均质1_3次； (5)将步骤(4)所得均质液离心15-22min，收集上清液，残渣烘干保存； (6)将步骤(5)得到的上清液进行超滤分离，分为一次超滤和二次超滤，分别设置两次超滤条件； (7)一次超滤选用截留分子量大于样品活性多糖分子量2-5倍的超滤膜进行分离，保留透过液，去除截留液； (8)将步骤(7)所得样品透过液进行二次超滤，超滤膜截留分子量为样品活性多糖分子量的1/5-1/2，保留截留液； (9)将步骤(8)所得截留液浓缩到原体积的1/9-1/10，冷冻干燥即得样品活性多糖； (10)检测样品多糖蛋白含量与糖含量。所述的步骤(I)中烘干温度为40 45°C。所述的步骤(3)中上限温度为(T_7°C，下线温度为_15'9°C 所述的步骤(3)中离心转速为3000-4500r/min。所述的步骤(6)中一次超滤条件为压力0. 1-0. 2MPa，温度25 35°C，二次超滤条件为压力 0. 05-0. IMPa，温度 25 35。。。所述的步骤(10)中检测蛋白含量采用考马斯亮蓝法，糖含量检测采用苯酚硫酸法。 本专利技术使用仪器=AH-PILOT高压均质机(加拿大ATS公司) 与现有多糖水提醇沉技术相比，本专利技术的有益效果 本专利技术采用纯物理方法提取天然活性多糖，将高压均质技术与超滤技术联用，广泛适用于植物与微生物多糖的提取，制备工艺简单易行，为天然活性多糖提取提供了一条高效、绿色无污染通道。本方法与水提醇沉法相比具有以下特点(I)本专利技术与传统水提醇沉法相比，显著特点是高效节能，多糖提取率普遍提高8%以上，无需进行长时间高温水提过程与醇沉过夜，大大缩短了多糖提取分离所需时间；(2)高压均质技术与超滤技术联用提取多糖，无需乙醇、氯仿、正丁醇等任何有机试剂，特别适合对有机试剂敏感的活性多糖物质提取，显著提高产品的质量与安全性，成本低，对环境无任何污染；(3)本专利技术获得的多糖纯度高，高压均质在高效提取多糖的同时，可将与多糖结合的蛋白分离，获得的多糖无需进行传统工艺脱蛋白过程，由于避免了高温提取与有机试剂脱蛋白，因此能够很好地保持多糖的生物活性与结构完整性。(4)本专利技术两项技术的联用符合现代工业高效、绿色的生产方式，具有广阔的应用前景。具体实施例方式实施例I:植物与微生物活性多糖的制备新鲜黄精40°c烘干，将烘干黄精用粉碎机粉碎3次，每次30秒。将粉碎的黄精过60目筛，称取过筛后的黄精300g放入容器中，加入20倍水，搅拌均匀。打开低温循环泵，使高压均质机内部工作环境维持在riO°C，将混合液投入高压均质机中，首先调节压强为5MPa，物料循环3次，然后调节高压均质机压强为80MPa，均质次数为两次，得均质液。在3000r/min条件下，用离心机离心均质液20分钟，收集上清溶液置于容器中，残渣烘干保存。将上清液通过不同孔径的超滤膜分级纯化，进行一次超滤和二次超滤，一次超滤分离压力为0. 2MPa，温度为30°C，二次超滤压力为0. IMPa，温度为25°C。首先上清液透过分子量为30KDa的超滤膜，得透过液，然后将透过液用分子量为3KDa的超滤膜再次分离，保留截留液。截留液旋转蒸发至原体积的1/10，采用真空冷冻干燥机冷冻干燥得黄精多糖85. 59g。新鲜食用菌猴头菇40°C烘干，将烘干猴头菇用粉碎机粉碎2次，每次30秒。将粉碎的猴头菇过80目筛，称取过筛后的猴头菇300g放入容器中，加入30倍水，搅拌均匀。打开低温循环泵，使高压均质机内部工作环境维持在rio°c，将混合液投入高压均质机本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种植物与微生物多糖的纯物理制备方法，其特征在于包括以下步骤：????（1）将植物或微生物样品前处理，烘干，根据物料软硬程度，用粉碎机粉碎2?4次，每次30?50秒，得样品粉，将样品粉过60?80目筛；（2）称取步骤（1）所得粉末放于容器中，加入10?30倍水，搅拌混匀；（3）调节低温循环泵温度，设置上下限温度，保证高压均质机内部工作温度为4~10℃；（4）将步骤（2）所得混合物料倒入均质机中，物料首先在低压强5?10MPa条件下循环2?4次，然后调节阀门压强为20?100MPa，待压强稳定后，均质1?3次；（5）将步骤（4）所得均质液离心18?22min，收集上清液，残渣烘干保存；（6）将步骤（5）得到的上清液进行超滤分离，分为一次超滤和二次超滤，分别设置两次超滤条件；（7）一次超滤选用截留分子量大于样品活性多糖分子量2?5倍的超滤膜进行分离，保留透过液，去除截留液；（8）将步骤（7）所得样品透过液进行二次超滤，超滤膜截留分子量为样品活性多糖分子量的1/5?1/2,保留截留液；（9）将步骤（8）所得截留液浓缩到原体积的1/9?1/10，真空冷冻干燥即得样品活性多糖；（10）检测样品多糖的蛋白含量与糖含量。...
【技术特征摘要】
1.一种植物与微生物多糖的纯物理制备方法，其特征在于包括以下步骤(I)将植物或微生物样品前处理，烘干，根据物料软硬程度，用粉碎机粉碎2-4次，每次30-50秒,得样品粉,将样品粉过60-80目筛； (2)称取步骤(I)所得粉末放于容器中，加入10-30倍水，搅拌混匀；(3)调节低温循环泵温度，设置上下限温度，保证高压均质机内部工作温度为riO°C； (4)将步骤(2)所得混合物料倒入均质机中，物料首先在低压强5-10MPa条件下循环2-4次，然后调节阀门压强为20-100MPa，待压强稳定后，均质1_3次； (5)将步骤(4)所得均质液离心18-22min，收集上清液，残渣烘干保存； (6)将步骤(5)得到的上清液进行超滤分离，分为一次超滤和二次超滤，分别设置两次超滤条件； (7)—次超滤选用截留分子量大于样品活性多糖分子量2-5倍的超滤膜进行分离，保留透过液，去除截留液； (8)将步骤(7)所得样品透过液进行二次超滤，超滤膜截留分子量为样品活性多糖分子量的1/5-1/2，保...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈彦，翟天龙，段培鲁，丁兢娜，徐存吉，郭文强，王萌萌，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：
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