一种从蒲公英中提取多糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种从蒲公英中提取多糖的方法，其操作步骤如下：1.材料预处理，将新鲜的蒲公英根洗净，切成小片，60℃干燥至恒重，用粉碎机磨成粉末，过40-60目筛备用；2.脱脂，将蒲公英粉末用滤纸包好，放入索氏提取器，40℃石油醚回流脱脂2-3h；3.单糖和寡糖的去除，将脱脂后的滤纸包风干，用70-90％乙醇回流，以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质，用蒽酮-浓硫酸法测定回流后样品的总糖含量；4.热水浸提，60-80℃，料水比为1：20-1:40，提取时间2-4h，提取1-3次。本方法制备工艺简单，质量稳定，回收率高，适合工业化生产，具有一定的应用前景和市场价值。

【技术实现步骤摘要】
一种从蒲公英中提取多糖的方法
本专利技术属于生物制药领域，尤其是一种从蒲公英中提取多糖的方法。
技术介绍
蒲公英是常见的农田杂草，也是重要的中药材，属于国家重要保护品种之一，具有清热、散结和利尿通淋的功效，临床上主要用于治疗乳疮肿毒等症，蒲公英富含甾醇、多糖，大量实验表明，多糖是重要的信息分子，参与许多生理和病理过程，一些天然药物其有效成分多糖有这多种药理活性，在医疗上具有抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、抗辐射、抗突变、降血糖、增强免疫等多方面的作用。从蒲公英中提取多糖的很多方法提取时间长，提取效率低，且对环境有一定污染。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对当前从蒲公英中提取多糖的方法存在的问题，提供一种从蒲公英中提取多糖的方法。该方法多糖提取率和纯度都得到了很大的提高，该方法具有提取时间短、方法简单、提取率高、质量稳定等优点，适合工业化生产。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种从蒲公英中提取多糖的方法，包括以下步骤：(1)材料预处理，将新鲜的蒲公英根洗净，切成小片，60℃干燥至恒重，用粉碎机磨成粉末，过40-60目筛备用；(2)脱脂，将蒲公英粉末用滤纸包好，放入索氏提取器，40℃石油醚回流脱脂2-3h；(3)单糖和寡糖的去除，将脱脂后的滤纸包风干，用70-90％乙醇回流，以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质，用蒽酮-浓硫酸法测定回流后样品的总糖含量；(4)热水浸提，60-80℃，料水比为1：20-1:40，提取时间2-4h，提取1-3次；(5)浓缩，用旋转蒸发仪对提取液进行浓缩；(6)脱蛋白，Sevag法，向提取液中加入1/4倍体积的氯仿-正丁醇，3000-4000r/min离心5-10min，中层白色絮状沉淀即为蛋白质，取上清，重复5-6次，至中间无明显沉淀为止；(7)醇析，脱蛋白后，向提取液中加入80-95％乙醇，3000-4000r/min离心5-10min，沉淀即为粗多糖；(8)纯化，将粗多糖复溶于水，透析24-36h，用80-95％乙醇沉淀多糖，3000-4000r/min离心5-10min，多糖沉淀分别用无水乙醇、丙酮洗3-5次，真空干燥得精制多糖。作为进一步方案，步骤(1)中材料预处理中，将蒲公英粉碎至40目。作为进一步方案，步骤(2)中所述的脱脂回流时间为2.5h。作为进一步方案，步骤(3)中所述乙醇为80％乙醇。作为进一步方案，步骤(4)中热水浸提温度为80℃，料水比为1:30，提取时间为3h，提取次数为2次。作为进一步方案，步骤(6)中离心速度为3500r/min，离心5min，重复5次。作为进一步方案，步骤(7)乙醇浓度为90％，离心速度为3500r/min，离心5min。作为进一步方案，步骤(8)透析时间为36h，乙醇浓度为85％，离心速度为3500r/min，离心5min，多糖沉淀分别用无水乙醇、丙酮洗3次，真空干燥得精制多糖。本专利技术中的提取方法的提取率和纯度都得到了很大的提高，具有提取时间短、方法简单、提取率高、质量稳定、回收率高等优点。本专利技术优点是：1.本专利技术中多糖的回收率达到97％以上。2.本专利技术的提取方法具有提取时间短、方法简单、提取效率高、质量稳定、回收率高等优点，适合工业化生产。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明实施例1一种从蒲公英中提取多糖的方法，包括以下步骤：(1)称取蒲公英样品100g,干燥,粉碎至一定粒度,40目筛备用；(2)脱脂，将蒲公英粉末用滤纸包好，放入索氏提取器，40℃石油醚回流脱脂2.5h；(3)单糖和寡糖的去除，将脱脂后的滤纸包风干，用80％乙醇回流，以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质，用蒽酮-浓硫酸法测定回流后样品的总糖含量；(4)热水浸提，80℃，料水比为1：30，提取时间3h，提取2次；(5)浓缩，用旋转蒸发仪对提取液进行浓缩；(6)脱蛋白，Sevag法，向提取液中加入1/4倍体积的氯仿-正丁醇，3500r/min离心5min，中层白色絮状沉淀即为蛋白质，取上清，重复5次，至中间无明显沉淀为止；(7)醇析，脱蛋白后，向提取液中加入90％乙醇，3500r/min离心5min，沉淀即为粗多糖；(8)纯化，将粗多糖复溶于水，透析36h，用85％乙醇沉淀多糖，3500r/min离心5min，多糖沉淀分别用无水乙醇、丙酮洗3次，真空干燥得精制多糖。该法得蒲公英根部多糖占蒲公英根干重的60.08％，多糖的回收率达到97％。实施例2一种从蒲公英中提取多糖的方法，包括以下步骤：(1)称取蒲公英样品100g,干燥,粉碎至一定粒度,40目筛备用；(2)脱脂，将蒲公英粉末用滤纸包好，放入索氏提取器，40℃石油醚回流脱脂2h；(3)单糖和寡糖的去除，将脱脂后的滤纸包风干，用70％乙醇回流，以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质，用蒽酮-浓硫酸法测定回流后样品的总糖含量；(4)热水浸提，60℃，料水比为1：20，提取时间2h，提取2次；(5)浓缩，用旋转蒸发仪对提取液进行浓缩；(6)脱蛋白，Sevag法，向提取液中加入1/4倍体积的氯仿-正丁醇，3000r/min离心10min，中层白色絮状沉淀即为蛋白质，取上清，重复5次，至中间无明显沉淀为止；(7)醇析，脱蛋白后，向提取液中加入80％乙醇，3000r/min离心10min，沉淀即为粗多糖；(8)纯化，将粗多糖复溶于水，透析24h，用80％乙醇沉淀多糖，3000r/min离心10min，多糖沉淀分别用无水乙醇、丙酮洗3次，真空干燥得精制多糖。该法得蒲公英根部多糖占蒲公英根干重的56.12％，多糖的回收率达到93％。实施例3一种从蒲公英中提取多糖的方法，包括以下步骤：(1)称取蒲公英样品100g,干燥,粉碎至一定粒度,40目筛备用；(2)脱脂，将蒲公英粉末用滤纸包好，放入索氏提取器，40℃石油醚回流脱脂3h；(3)单糖和寡糖的去除，将脱脂后的滤纸包风干，用90％乙醇回流，以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质，用蒽酮-浓硫酸法测定回流后样品的总糖含量；(4)热水浸提，70℃，料水比为1:40，提取时间4h，提取2次；(5)浓缩，用旋转蒸发仪对提取液进行浓缩；(6)脱蛋白，Sevag法，向提取液中加入1/4倍体积的氯仿-正丁醇，4000r/min离心5min，中层白色絮状沉淀即为蛋白质，取上清，重复5次，至中间无明显沉淀为止；(7)醇析，脱蛋白后，向提取液中加入95％乙醇，4000r/min离心5min，沉淀即为粗多糖；(8)纯化，将粗多糖复溶于水，透析36h，用95％乙醇沉淀多糖，4000r/min离心5min，多糖沉淀分别用无水乙醇、丙酮洗3次，真空干燥得精制多糖。该法得蒲公英根部多糖占蒲公英根干重的58.26％，多糖的回收率达到90％。以上所述，仅是本专利技术的较佳实施例而已，并非对本专利技术的技术方案作任何形式上的限制。凡是依据本专利技术的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本专利技术的技术方案的范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从蒲公英中提取多糖的方法，其特征在于，其操作步骤如下：(1)材料预处理，将新鲜的蒲公英根洗净，切成小片，60℃干燥至恒重，用粉碎机磨成粉末，过40‑60目筛备用；(2)脱脂，将蒲公英粉末用滤纸包好，放入索氏提取器，40℃石油醚回流脱脂2‑3h；(3)单糖和寡糖的去除，将脱脂后的滤纸包风干，用70‑90％乙醇回流，以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质，用蒽酮‑浓硫酸法测定回流后样品的总糖含量；(4)热水浸提，60‑80℃，料水比为1：20‑1:40，提取时间2‑4h，提取1‑3次；(5)浓缩，用旋转蒸发仪对提取液进行浓缩；(6)脱蛋白，Sevag法，向提取液中加入1/4倍体积的氯仿‑正丁醇，3000‑4000r/min离心5‑10min，中层白色絮状沉淀即为蛋白质，取上清，重复5‑6次，至中间无明显沉淀为止；(7)醇析，脱蛋白后，向提取液中加入80‑95％乙醇，3000‑4000r/min离心5‑10min，沉淀即为粗多糖；(8)纯化，将粗多糖复溶于水，透析24‑36h，用80‑95％乙醇沉淀多糖，3000‑4000r/min离心5‑10min，多糖沉淀分别用无水乙醇、丙酮洗3‑5次，真空干燥得精制多糖。...

【技术特征摘要】
1.一种从蒲公英中提取多糖的方法，其特征在于，其操作步骤如下：(1)材料预处理，将新鲜的蒲公英根洗净，切成小片，60℃干燥至恒重，用粉碎机磨成粉末，过40-60目筛备用；(2)脱脂，将蒲公英粉末用滤纸包好，放入索氏提取器，40℃石油醚回流脱脂2-3h；(3)单糖和寡糖的去除，将脱脂后的滤纸包风干，用70-90％乙醇回流，以除去样品中的单糖、寡糖以及其它小分子物质，用蒽酮-浓硫酸法测定回流后样品的总糖含量；(4)热水浸提，60-80℃，料水比为1：20-1:40，提取时间2-4h，提取1-3次；(5)浓缩，用旋转蒸发仪对提取液进行浓缩；(6)脱蛋白，Sevag法，向提取液中加入1/4倍体积的氯仿-正丁醇，3000-4000r/min离心5-10min，中层白色絮状沉淀即为蛋白质，取上清，重复5-6次，至中间无明显沉淀为止；(7)醇析，脱蛋白后，向提取液中加入80-95％乙醇，3000-4000r/min离心5-10min，沉淀即为粗多糖；(8)纯化，将粗多糖复溶于水，透析24-36h，用80-95％乙醇沉淀多糖，3000-4000r/min离心5-10min，多糖沉淀分别用无水乙醇、丙...

【专利技术属性】
技术研发人员：季延滨，李涛，侯继明，
申请(专利权)人：芝圣天津生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12