独一味多糖的提取方法与检测方法技术

本发明专利技术公开了一种独一味多糖的提取方法，步骤如下：取独一味粉末，脱色，加水，回流提取，收提取液，即可。本发明专利技术还公开了一种检测独一味的多糖含量的方法。本发明专利技术独一味多糖提取方法可以高效提取独一味样品中的多糖，以此为基础建立的检测方法可以有效、准确检测独一味中的多糖含量，重复性好，准确度高，能够客观反应独一味样品中的多糖含量，应用前景良好。

【技术实现步骤摘要】
独一味多糖的提取方法与检测方法
本专利技术涉及独一味多糖的提取方法与检测方法。
技术介绍
独一味来源于唇形科植物独一味Lamiophlomisrotata的全草，是重要的青藏高原药用植物和常用大宗藏药,为一级濒危藏药品种,主要分布在甘肃、青海、四川、云南、西藏等地[2]。《四部医典》和《晶珠本草》中记载本品有强筋骨,干黄水,止痛之功[3]。2010年版《中国药典》记载其功能与主治为：活血止血，祛风止痛。用于跌打损伤，外伤出血，风湿痹痛，黄水病。文献报道独一味中主要含有环烯醚萜苷、黄酮类、苯乙醇苷以及多糖、嘧啶等成分。但是对独一味中的多糖类成分鲜有报道，现有研究表明，独一味含有一定量多糖，对其进行含量测定对于独一味药材的质量控制具有参考意义。多糖polysacharides,PS,又称多聚糖，是一种广泛生物活性的大分子。广泛存在于许多动植物体内，不仅是生物的营养成分，而且还参与多种生命活动。据现代医学报道植物多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。目前对多糖的研究报道有很多，有苯酚-硫酸比色法测定红毛五加皮的含量，对红毛五加皮多糖的提取、测定等有系统的研究；对枸杞多糖提取工艺的研究，主要对多糖的提取工艺有系统的研究。但是目前对独一味多糖的研究极少，主要有独一味多糖抗氧化性的研究，对其提取方法及含量测定的研究更是较少涉及。植物多糖的提取方法有水提法、超声提取法、微波辅助提取法以及酶法等，其中提取时间、次数、料液比以及温度等因素对提取的结果都有不同程度的影响，因此如何能够有效稳定的提取独一味多糖非常重要。目前植物多糖含量测定主要采用紫外分光光度法，以无水葡萄糖为对照品，常采用苯酚-硫酸法，或蒽酮-硫酸法。未见独一味多糖的提取方法以及其质量控制方法的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供独一味多糖的提取方法及其检测方法。本专利技术独一味多糖的提取方法，包括以下步骤：取独一味粉末，脱色，加水，回流提取，收提取液，即可。其中，所述脱色的方法是：用滤纸包裹独一味粉末，在85％乙醇中回流至提取液无色，取出，干燥，即可。优选地，所述脱色的方法是：用滤纸包裹独一味粉末，在粉末50～100倍v/w的85％乙醇中回流4～8h至提取液无色，取出，干燥，即可。v/w，即ml/g。优选地，加入的水的体积是独一味粉末重量的30倍。优选地，回流提取的温度为80～90℃，回流提取的时间为45～60min。优选地，回流提取的温度为80℃，回流提取的时间为60min。优选地，回流提取的次数是1～5次。优选地，回流提取的次数是4次。本专利技术还提供了前述检测独一味的多糖含量的方法，包括如下步骤：①、将前述提取方法得到的提取液，作为供试品溶液；②、取葡萄糖对照品，加水溶解，作为对照品溶液；③、取对照品溶液和供试品溶液，加入苯酚、浓硫酸，反应，测定488nm处的吸光度；根据对照品的吸光度建立标准曲线，确定供试品溶液中的多糖含量。优选地，步骤③中，溶液与苯酚的体积比为1:0.45，苯酚的浓度为7％，溶液与浓硫酸的体积比为1:2.5；所述反应是：40℃水浴15min，取出，冰水浴5min。本专利技术独一味多糖提取方法可以高效提取独一味样品中的多糖，以此为基础建立的检测方法可以有效、准确检测独一味中的多糖含量，重复性好，准确度高，能够客观反应独一味样品中的多糖含量，应用前景良好。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1本专利技术对照品浓度与吸光度的线性关系。具体实施方式本专利技术具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。1、实验仪器紫外分光光度仪Biomate3S(ThermoScientific)；SHD-ⅢD型循环水式多用真空泵(河南省予华仪器有限公司)；BS224S型电子天平(北京赛多斯仪器系统有限公司)；电热显恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司)；电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)。2、实验药品独一味样品，经成都医学院药学院生药教研室钟世红副教授鉴定为独一味Lamiophlomisrotata的地上部分或全草，样品为自采和购买。无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用)；苯酚、乙醇、浓硫酸等试剂均为分析纯，水为蒸馏水。3、试剂的配制7％苯酚溶液：取苯酚100g，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05g，蒸馏，收集182℃馏分。再取上述馏分约7g，精密称定，置100ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀即得。葡萄糖标准溶液：精密称取在105℃下干燥4h的无水葡萄糖26.15mg，置于100ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，得到26.15μg/ml的标准溶液。实施例1本专利技术独一味多糖的提取方法1、提取方法(1)脱色每份称取独一味粉末1g，精密称定(n＝2)，用滤纸包裹，用置于索氏提取器中，加入50ml～100ml的85％乙醇，回流提取至提取液无色(4h～8h)，残渣呈褐色，自然挥干乙醇备用，得脱色后的残渣；(2)提取取脱色后的残渣，置于圆底烧瓶中，加入30ml蒸馏水，于80℃水浴锅中回流提取60min，重复3次，合并提取液，即可。2、提取率的检测2.1检测方法取提取液，抽滤，滤液定容至250ml，再量取5ml溶液于50ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度。取2ml于试管中，加入7％苯酚0.9ml，摇匀，再加入浓硫酸5ml。40℃水浴15min，取出，冰水浴5min。测得其488nm处吸光度，利用以下公式计算其提取率(多糖百分含量)。提取率＝多糖浓度*提取液体积*稀释倍数*转换因子/样品质量*100％即：M％＝(A样/A对*C对)*V*D*f)/W*100％(2-2)其中，M％是指多糖百分含量；A样为样品溶液的吸光度；A对为对照品溶液的吸光度；C对为对照品溶液的浓度；V为提取溶液的体积(为第一次定容的体积250ml)；D为稀释倍数，稀释倍数为(50/5)*(7.9/2)；f为换算因子，本实验另行测定，为3.1048；W为样品质量。2.2检测结果经过检测，本专利技术方法提取独一味多糖的提取率为14.18％。实施例2本专利技术独一味多糖的提取方法的筛选一、提取次数1、提取方法(1)脱色每份称取独一味粉末1g，精密称定(n＝2)，用滤纸包裹，用置于索氏提取器中，加入50ml～100ml的85％乙醇，回流提取至提取液无色(4h～8h)，残渣呈褐色，自然挥干乙醇备用，得脱色后的残渣；(2)提取取脱色后的残渣，置于圆底烧瓶中，加入30ml蒸馏水，于80℃水浴锅中回流提取60min，不重复或者重复1次、重复2次、重复3次、重复4次，合并提取液，即可。2、提取率的检测2.1检测方法同实施例1。2.2检测结果检测结果如下表1：表1不同提取次数的多糖提取率提取次数12345提取率％13.2013.2913.7914.1814.23实验结果说明，采用本专利技术工艺提取独一味多糖，提取率高，为13.20～14.18％，重复的次数可以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种独一味多糖的提取方法，其特征在于：步骤如下：取独一味粉末，脱色，加水，回流提取，收提取液，即可。

【技术特征摘要】
1.一种独一味多糖的提取方法，其特征在于：步骤如下：取独一味粉末，脱色，加水，回流提取，收提取液，即可。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述脱色的方法是：用滤纸包裹独一味粉末，在85％乙醇中回流至提取液无色，取出，干燥，即可。3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于：所述脱色的方法是：用滤纸包裹独一味粉末，在粉末50～100倍v/w的85％乙醇中回流4～8h至提取液无色，取出，干燥，即可。4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：加入的水的体积是独一味粉末重量的30倍。5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：回流提取的温度为80～90℃，回流提取的时间为45～60min。6.根据权利要求5所述的提取方法，其特征在于：回流提取的温度为80℃，回...

【专利技术属性】
技术研发人员：古锐，钟世红，
申请(专利权)人：成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：四川,51