一种发菜多糖提取方法技术

本发明专利技术提供了一种发菜多糖提取方法，本方法在对发菜干粉进行脱脂处理后，先后利用胰蛋白酶、碱性蛋白酶水解，避免化学方法制备多糖过程中的残留和污染，且本法制备多糖水解度高，多糖片段分子量较小，对于先胰蛋白酶提取再进行碱性蛋白酶提取的不仅水解度高，而且其分子量更多的分布在30kDa以下且较均匀，利于人体消化吸收。酶作为具有高效的催化性，pH、温度对其催化活性均有较大影响，本发明专利技术采用的提取时间、pH、温度为最适提取条件。

A method for extracting seaweed polysaccharide

The present invention provides a method for extracting seaweed polysaccharide, the degreasing treatment of seaweed powder, has the use of trypsin, alkaline protease hydrolysis, avoid chemical preparation method of polysaccharide in the process of residue and pollution, and the preparation of polysaccharide hydrolysis degree is high, low molecular weight polysaccharide fragment, for the first trypsin and then extracts alkaline protease extracted not only high degree of hydrolysis, and the molecular weight distribution of 30kDa in the following more and more uniform, conducive to human digestion and absorption. As the enzyme has high catalytic activity, pH and temperature have great influence on its catalytic activity. The extraction time, pH and temperature are the most suitable extraction conditions.

【技术实现步骤摘要】
一种发菜多糖提取方法
本专利技术涉及生物分离
，具体涉及一种发菜多糖提取方法。
技术介绍
发菜(学名：Nostoccommunevar.flagelliforme，异名Nostocflagelliforme)，又称发状念珠藻，是蓝菌门念珠藻目的细菌，广泛分布于世界各地(如中国、俄罗斯、索马里、美国等)的沙漠和贫瘠土壤中，因其色黑而细长，如人的头发而得名，可以食用。广东人取“发”(fa4)的谐音“发”(fa1)而写成“发菜”，意为发财，广东通用简体字后，一律简化成“发”，使之变为互通，在农历新年的广东菜式中更为常见。但事实上，发菜并不是菜，而是菌。现有技术中，发菜多糖的提取仍存在着纯度低、工艺复杂的技术缺陷。
技术实现思路
本专利技术旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种发菜多糖提取方法，以解决现有技术中存在的提取效率较低的技术问题。本专利技术解决的另一技术问题是提升发菜多糖提取产物的风味。为实现以上技术目的，本专利技术采用以下技术方案：一种发菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)将发菜原料粉碎后得到发菜干粉，而后超声振荡处理10min，得到发菜脱脂干粉；2)将发菜脱脂干粉加水配制成20～30g/L的悬浊液，而后向悬浊液中加入所述发菜脱脂干粉总重量2～4％的谷氨酸，调整悬浊液pH至8.5～9，于40～50℃提取4～6h，而后对提取液执行沸水浴10～15min；3)而后将悬浊液在50～60℃中保持一定时间，加入发菜脱脂干粉重量2～4％碱性蛋白酶后调节pH至8.5～9.5，每隔20～30min调节一次pH至8.5～9.5，提取6～7h后，置于沸水浴中灭酶活10min，将上述提取液在5000r/min条件下进行离心20min，取上清液得到发菜多糖。优选的，步骤1)中所述的CO2超临界萃取技术进行脱脂的条件为：萃取温度为58℃、萃取压强为35MPa、静态萃取10min后调节CO2流量为15L/h、动态萃取时间为125min的萃取条件下对发菜干粉进行脱脂。优选的，步骤2)中所述的悬浊液中发菜脱脂干粉的浓度为27g/L。优选的，步骤2)中所述的谷氨酸的提取条件为：温度为45℃、添加量为发菜脱脂干粉重量3％、pH为8.8、时间为4h，间隔25min调节一次pH至8.8。优选的，步骤3)中所述的碱性蛋白酶提取条件为：温度为54.7℃、添加量为发菜脱脂干粉重量的3％、pH为9、时间为6h，间隔25min调节一次pH至9。本专利技术提供的技术方案，其工艺简单，操作方便，仪器设备要求低，能耗小，避免化学方法制备多糖过程中的残留和污染，且本法制备多糖水解度高，多糖片段分子量较小，对于先谷氨酸提取再进行碱性蛋白酶提取的不仅水解度高，而且其分子量更多的分布在30kDa以下且较均匀，利于人体消化吸收。酶作为具有高效的催化性，pH、温度对其催化活性均有较大影响，本专利技术采用的提取时间、pH、温度为最适提取条件。具体实施方式以下将对本专利技术的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本专利技术所属领域技术人员普遍理解的相同含义。实施例1一种发菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)将发菜原料粉碎后得到发菜干粉，而后超声振荡处理10min，得到发菜脱脂干粉；2)将发菜脱脂干粉加水配制成20g/L的悬浊液，而后向悬浊液中加入所述发菜脱脂干粉总重量2％的谷氨酸，调整悬浊液pH至8.5，于40℃提取4h，而后对提取液执行沸水浴10min；3)而后将悬浊液在50℃中保持一定时间，加入发菜脱脂干粉重量2％碱性蛋白酶后调节pH至8.5，每隔20min调节一次pH至8.5，提取6h后，置于沸水浴中灭酶活10min，将上述提取液在5000r/min条件下进行离心20min，取上清液得到发菜多糖。实施例2一种发菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)将发菜原料粉碎后得到发菜干粉，而后超声振荡处理10min，得到发菜脱脂干粉；2)将发菜脱脂干粉加水配制成30g/L的悬浊液，而后向悬浊液中加入所述发菜脱脂干粉总重量4％的谷氨酸，调整悬浊液pH至9，于50℃提取6h，而后对提取液执行沸水浴15min；3)而后将悬浊液在60℃中保持一定时间，加入发菜脱脂干粉重量4％碱性蛋白酶后调节pH至9.5，每隔30min调节一次pH至9.5，提取7h后，置于沸水浴中灭酶活10min，将上述提取液在5000r/min条件下进行离心20min，取上清液得到发菜多糖。在以上技术方案的基础上：步骤1)中所述的CO2超临界萃取技术进行脱脂的条件为：萃取温度为58℃、萃取压强为35MPa、静态萃取10min后调节CO2流量为15L/h、动态萃取时间为125min的萃取条件下对发菜干粉进行脱脂。实施例3一种发菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)将发菜原料粉碎后得到发菜干粉，而后超声振荡处理10min，得到发菜脱脂干粉；2)将发菜脱脂干粉加水配制成25g/L的悬浊液，而后向悬浊液中加入所述发菜脱脂干粉总重量3％的谷氨酸，调整悬浊液pH至8.8，于45℃提取5h，而后对提取液执行沸水浴12min；3)而后将悬浊液在55℃中保持一定时间，加入发菜脱脂干粉重量3％碱性蛋白酶后调节pH至9，每隔25min调节一次pH至9，提取6.5h后，置于沸水浴中灭酶活10min，将上述提取液在5000r/min条件下进行离心20min，取上清液得到发菜多糖。在以上技术方案的基础上：以上对本专利技术的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本专利技术的较佳实施例，并不用以限制本专利技术。凡在本专利技术的申请范围内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种发菜多糖提取方法，其特征在于包括以下步骤：1)将发菜原料粉碎后得到发菜干粉，而后超声振荡处理10min，得到发菜脱脂干粉；2)将发菜脱脂干粉加水配制成20～30g/L的悬浊液，而后向悬浊液中加入所述发菜脱脂干粉总重量2～4％的谷氨酸，调整悬浊液pH至8.5～9，于40～50℃提取4～6h，而后对提取液执行沸水浴10～15min；3)而后将悬浊液在50～60℃中保持一定时间，加入发菜脱脂干粉重量2～4％碱性蛋白酶后调节pH至8.5～9.5，每隔20～30min调节一次pH至8.5～9.5，提取6～7h后，置于沸水浴中灭酶活10min，将上述提取液在5000r/min条件下进行离心20min，取上清液得到发菜多糖。

【技术特征摘要】
1.一种发菜多糖提取方法，其特征在于包括以下步骤：1)将发菜原料粉碎后得到发菜干粉，而后超声振荡处理10min，得到发菜脱脂干粉；2)将发菜脱脂干粉加水配制成20～30g/L的悬浊液，而后向悬浊液中加入所述发菜脱脂干粉总重量2～4％的谷氨酸，调整悬浊液pH至8.5～9，于40～50℃提取4～6h，而后对提取液执行沸水浴10～15min；3)而后将悬浊液在50～60℃中保持一定时间，加入发菜脱脂干粉重量2～4％碱性蛋白酶后调节pH至8.5～9.5，每隔20～30min调节一次pH至8.5～9.5，提取6～7h后，置于沸水浴中灭酶活10min，将上述提取液在5000r/min条...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘鼎阔，王立红，张凤洪，张俊霞，
申请(专利权)人：鼎正生物药业天津有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12