一种抗肿瘤生物多糖的制备方法技术

技术编号:12730428 阅读:85 留言:0更新日期:2016-01-20 14:23
本发明专利技术公开了一种抗肿瘤生物多糖的制备方法,包括如下步骤:将干燥树酶、锁阳、金樱子果实超声破碎处理后,置于高压釜中浸提,将所得提取液过滤,浓缩,沉淀处理,干燥,脱色处理后置于酶解罐内进行酶解,酶解结束后,灭酶,冷却至室温,过滤,浓缩后,真空干燥或低温冷冻干燥,得抗肿瘤生物多糖。本发明专利技术工艺简单,可提高多糖的提取率及其多糖含量,具有条件温和、杂质易除和得率高等优点,所得多糖具有提高免疫力,抗疲劳、抗肿瘤等多种功效,适用于肿瘤患者。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及多糖制备领域,具体涉及。
技术介绍
糖类是生物体内除蛋白质和核酸以外的一类重要生物分子,尤其是一类重要的信息分子,具有多种多样的生物功能。其中,多糖是自然界中储量丰富的生物聚合物,它是由醛糖或酮糖通过糖苷键连接在一起的多聚物,广泛存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中。目前已发现的活性多糖有几百种,有真菌多糖、高等植物多糖、藻类地衣多糖、动物多糖、细菌多糖。多糖具有能量储存、结构支持、防御作用和抗原决定性等多方面的生物功能。植物多糖,尤其是从中药中提取的水溶性多糖尤为重要,已发现有多种中药中的多糖类化合物具有丰富多彩的生物活性,如抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗病毒、降血脂、抗凝血以及促进伤口愈合等活性,这类多糖没有细胞毒性,而且药物质量通过化学手段容易控制,已经成为当今新药的发展方向之一。
技术实现思路
为解决上述问题,本专利技术提供了,工艺简单,可提高多糖的提取率及其多糖含量,具有条件温和、杂质易除和得率高等优点,所得多糖具有提高免疫力,抗疲劳、抗肿瘤等多种功效,适用于肿瘤患者。为实现上述目的,本专利技术采取的技术方案为:—种抗肿瘤生物多糖的制备方法,包括如下步骤:S1、取干燥树酶10?20份、锁阳15?20份、金樱子果实10?20份,送入超声破碎器经超声破碎处理,得粉体;S2、将所得的粉体脱脂处理后,置于高压釜中,加入粉体2?3倍的水,通入氮气至高压爸内压力为0.7?1.5MPa,处理8?25min ;然后迅速通入蒸汽至高压爸内压力为1.5?2.5Mpa,浸提1?1.5h,得提取液;S3、将所得提取液过滤,浓缩,加入无水乙醇进行沉淀处理后,干燥,得粗多糖;S4、将所得的粗多糖溶于0.2?0.3mol/L的NaCl溶液中,加入DEAE-纤维素52静态吸附30?40min,冲洗DEAE-纤维素52,过滤洗脱液,收集滤液,得脱色后的粗多糖溶液;S5、将所得的脱色后的粗多糖溶液置于酶解罐内,按320?370克/吨的比例加入复合酶解液,30?35°C,酶解1?2小时,每半小时搅拌、充氧一次,控制PH值在3.5?6.2之间;S6、酶解结束后,将酶解液升温至85?100 °C,灭酶30?40分钟;S7、灭活完成后冷却至室温,过滤,浓缩后,真空干燥或低温冷冻干燥,水分控制在7 %以下,得抗肿瘤生物多糖。优选地,所述步骤S1所得的粉体粒度小于3 μ m0优选地,所述复合酶解液包含以下重量份的组分:纤维素酶3?5份、果胶酶3?6份、葡萄糖淀粉酶4?7份、木聚糖酶3?5份、漆酶3?5份、溶菌酶3?5份、中性蛋白酶3?5份、风味蛋白酶2?5份、木瓜蛋白酶2?5、原生质液10?15份、含微量元素的无机盐3?5份、羧甲基茯苓多糖3?4份。优选地,原生质液由山竹果汁、鱼油和酪蛋白水解肽按质量比1: 2: 3混合所得。优选地,所述的含微量元素的无机盐包含1 %的Κ2ΗΡ04,1 %的ΚΗ2Ρ04,0.5%的(NH4)2S04O本专利技术具有以下有益效果:工艺简单,可提高多糖的提取率及其多糖含量,具有条件温和、杂质易除和得率高等优点,所得多糖具有提高免疫力,抗疲劳、抗肿瘤等多种功效,适用于肿瘤患者。【具体实施方式】为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白,以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术,并不用于限定本专利技术。以下实施例中,所使用的复合酶解液包含以下重量份的组分:纤维素酶3?5份、果胶酶3?6份、葡萄糖淀粉酶4?7份、木聚糖酶3?5份、漆酶3?5份、溶菌酶3?5份、中性蛋白酶3?5份、风味蛋白酶2?5份、木瓜蛋白酶2?5、原生质液10?15份、含微量元素的无机盐3?5份、羧甲基茯苓多糖3?4份,原生质液由山竹果汁、鱼油和酪蛋白水解肽按质量比1: 2: 3混合所得,所述的含微量元素的无机盐包含 1 % 的 Κ2ΗΡ04,1 % 的 ΚΗ2Ρ04,0.5 % 的(NH4) 2S04。实施例1S1、取干燥树酶10份、锁阳15份、金樱子果实10份,送入超声破碎器经超声破碎处理,得粉体,所得的粉体粒度小于3 μ m ;S2、将所得的粉体脱脂处理后,置于高压釜中,加入粉体2倍的水,通入氮气至高压釜内压力为0.7MPa,处理25min ;然后迅速通入蒸汽至高压釜内压力为1.5Mpa,浸提1.5h,得提取液;S3、将所得提取液过滤,浓缩,加入无水乙醇进行沉淀处理后,干燥,得粗多糖;S4、将所得的粗多糖溶于0.2mol/L的NaCl溶液中,加入DEAE-纤维素52静态吸附30min,冲洗DEAE-纤维素52,过滤洗脱液,收集滤液,得脱色后的粗多糖溶液;S5、将所得的脱色后的粗多糖溶液置于酶解罐内,按320克/吨的比例加入复合酶解液,30°C,酶解2小时,每半小时搅拌、充氧一次,控制PH值在3.5 ;S6、酶解结束后,将酶解液升温至85 °C,灭酶40分钟;S7、灭活完成后冷却至室温,过滤,浓缩后,真空干燥或低温冷冻干燥,水分控制在7 %以下,得抗肿瘤生物多糖。实施例2S1、取干燥树酶20份、锁阳20份、金樱子果实20份,送入超声破碎器经超声破碎处理,得粉体,所得的粉体粒度小于3 μ m ;S2、将所得的粉体脱脂处理后,置于高压釜中,加入粉体3倍的水,通入氮气至高压爸内压力为1.5MPa,处理8min ;然后迅速通入蒸汽至高压爸内压力为2.5Mpa,浸提lh,得提取液;S3、将所得提取液过滤,浓缩,加入无水乙醇进行沉淀处理后,干燥,得粗多糖;S4、将所得的粗多糖溶于0.3mol/L的NaCl溶液中,加入DEAE-纤维素52静态吸附40min,冲洗DEAE-纤维素52,过滤洗脱液,收集滤液,得脱色后的粗多糖溶液;S5、将所得的脱色后的粗多糖溶液置于酶解罐内,按370克/吨的比例加入复合酶解液,35°C,酶解1小时,每半小时搅拌、充氧一次,控制PH值在6.2 ;S6、酶解结束后,将酶解液升温至100°C,灭酶30分钟;S7、灭活完成后冷却至室温,过滤,浓缩后,真空干燥或低温冷冻干燥,水分控制在7 %以下,得抗肿瘤生物多糖。实施例3S1、取干燥树酶15份、锁阳17.5份、金樱子果实15份,送入超声破碎器经超声破碎处理,得粉体,所得的粉体粒度小于3 μ m ;S2、将所得的粉体脱脂处理后,置于高压釜中,加入粉体2?3倍的水,通入氮气至高压釜内压力为1.1MPa,处理16.5min ;然后迅速通入蒸汽至高压釜内压力为2Mpa,浸提1.25h,得提取液;S3、将所得提取液过滤,浓缩,加入无水乙醇进行沉淀处理后,干燥,得粗多糖;S4、将所得的粗多糖溶于0.25mol/L的NaCl溶液中,加入DEAE-纤维素52静态吸附35min,冲洗DEAE-纤维素52,过滤洗脱液,收集滤液,得脱色后的粗多糖溶液;S5、将所得的脱色后的粗多糖溶液置于酶解罐内,按345克/吨的比例加入复合酶解液,32.5°C,酶解1.5小时,每半小时搅拌、充氧一次,控制PH值在4.85之间;S6、酶解结束后,将酶解液升温至92.5 °C,灭酶35分钟;S7、灭活完成后冷却至室温,过滤,浓缩后,真空干燥或低温冷冻干燥,水分控制在7%以下,得抗肿瘤生物多糖.以上所述仅是本专利技术的优选实施方式,应当指出,对于本
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【技术保护点】
一种抗肿瘤生物多糖的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、取干燥树酶10~20份、锁阳15~20份、金樱子果实10~20份,送入超声破碎器经超声破碎处理,得粉体;S2、将所得的粉体脱脂处理后,置于高压釜中,加入粉体2~3倍的水,通入氮气至高压釜内压力为0.7~1.5MPa,处理8~25min;然后迅速通入蒸汽至高压釜内压力为1.5~2.5Mpa,浸提1~1.5h,得提取液;S3、将所得提取液过滤,浓缩,加入无水乙醇进行沉淀处理后,干燥,得粗多糖;S4、将所得的粗多糖溶于0.2~0.3mol/L的NaCl溶液中,加入DEAE‑纤维素52静态吸附30~40min,冲洗DEAE‑纤维素52,过滤洗脱液,收集滤液,得脱色后的粗多糖溶液;S5、将所得的脱色后的粗多糖溶液置于酶解罐内,按320~370克/吨的比例加入复合酶解液,30~35℃,酶解1~2小时,每半小时搅拌、充氧一次,控制PH值在3.5~6.2之间;S6、酶解结束后,将酶解液升温至85~100℃,灭酶30~40分钟;S7、灭活完成后冷却至室温,过滤,浓缩后,真空干燥或低温冷冻干燥,水分控制在7%以下,得抗肿瘤生物多糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:岳丽玲
申请(专利权)人:齐齐哈尔医学院
类型:发明
国别省市:黑龙江;23

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