本发明专利技术涉及一种J亚群禽白血病病毒的肽核酸及其应用。该肽核酸选自如下任一种或任几种肽核酸：a）其核酸序列为序列表中的序列1；b）其核酸序列为序列表中的序列2；c）其核酸序列为序列表中的序列3；d）其核酸序列为序列表中的序列4。本发明专利技术的肽核酸无毒副作用，无耐药性，能特异性直接抑制ALV-J复制，抗病毒效果好，无药残等食品安全问题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种J亚群禽白血病病毒的肽核酸及其应用。
技术介绍
禽白血病是由禽白血病病毒(avian lekosis virus, ALV)引起的以造血细胞恶性增生为主的一类传染病,包括淋巴细胞性白血病,成红细胞性白血病,成髓细胞白血病和髓细胞样白血病，对养禽业危害最大的是禽淋巴细胞性白血病(lymphoid leukosis, LL)。根据病毒囊膜特性、病毒中和实验、宿 主范围和基因组的分子生物学特性，现已将该病毒分类成10个亚群A J亚群，其包括了除网状内皮组织增殖病病毒以外引起禽类肿瘤性疾病的所有逆转录病毒。其中A、B、C、D为外源性病毒，E、F、G、H、I为内源性病毒。A、B亚群是商业蛋鸡(来航鸡)最为常见的外源性病毒亚群，而C、D亚群感染率极低，几乎很难检测到；E亚群包括普遍存在的低致病性和无致病性的内源性病毒。J亚群于1988年，由Payne等同事首次从商品代肉用鸡中分离得到，J亚群是一外源性白血病病毒，其与内源性E亚群的重组体，可以通过水平和垂直传播在鸡群中广泛散播，所有肉用型品系的鸡对ALV-J都易感，但感染鸡的肿瘤发病率却有显著差异，蛋鸡虽可感染ALV-J，但自然感染时很少引起肿瘤；随着养鸡生产规模的不断增大，疑似淋巴性白血病J亚群(ALV — J)的发生更为广泛，使发病鸡群死淘率高，给养鸡生产场带来严重的经济损失。该病1998年在世界范围内暴发，给世界养禽业造成了沉重打击。1999年，杜岩等在国内首次从商品代肉鸡中分离并检测到ALV-J病毒。2000年以后，J亚群白血病在我国鸡群中全面暴发，并呈现出宿主范围扩展，其垂直和水平传播引起临床和亚临床感染而造成较大的经济损失。禽白血病导致的经济损失主要有两个方面。一是引起肿瘤，导致鸡的死亡。二是产生非肿瘤性疾病，造成免疫抑制造成的亚临床感染，表现为鸡的消瘦和贫血，耐受性病毒血症，免疫抑制等，由此严重影响养鸡生产。ALV-J感染可造成鸡多重感染，在个体病鸡中可同时检出几种不同的病毒，如网状内皮增生症病毒(REV)、传染性法氏囊病毒、鸡传染性贫血病毒等。在实际生产过程中，人们通常只关注肿瘤形成对生产的影响，往往忽略其亚临床感染。免疫抑制可包括淋巴器官萎缩或发育不全、高血症丙球蛋白增多、促有丝分裂剂诱导的胚细胞形成减少以及抗体应答降低。因此，ALV对养禽业造成的损失主要是由于其前期非肿瘤性疾病(免疫抑制)引发的，而后期由于肿瘤造成的死亡只是免疫抑制从量变到质变的一个表面现象。病鸡临床症状主要表现为食欲不振，进行性消瘦；羽毛异常，患病鸡精神状态差；部分鸡的腹部胀大，可触摸到肿大的肝脏；鸡冠及肉髯苍白，有些鸡冠萎缩；有的头部、背部、胸部、腿部及翅膀可见I 3 Cm大小的血疱，呈褐紫色，质地柔软，有一定的弹性，与周围皮肤界限清楚，血疱破裂后流血不止，血疱周边的羽毛被大片血迹污染。免疫抑制是指由于受到各种因素(如营养、疾病、应激等)的影响，使得机体对抗原应答能力低下甚至缺失的现象。其中由病毒引起的免疫抑制尤为严重从而形成免疫抑制。ALV-J引起成年肉鸡骨髓细胞瘤，导致很高的死亡率，还能使繁殖力下降(由于影响种公鸡的发育)。由于种母鸡的死亡和繁殖力下降，使得孵化用蛋减少，造成肉鸡饲养业的严重损失。ALV除了可引起原发感染引起鸡的死亡，更重要的是损害免疫器官，如对鸡胸腺、法氏囊等主要免疫器官可造成严重损伤，使免疫器官功能降低，使得机体的抗病力下降，最终导致并发症和继发感染。另外，ALV-J造成免疫抑制的解除很困难，使鸡群对疫苗免疫不产生应答或应答能力下降，造成免疫失败，引起烈性传染病暴发。病毒粒子直径80 100 nm，由外部的囊膜和内部的电子致密的核衣壳构成，核心结构由二倍体RNA和核衣壳、反转录酶、整合酶、蛋白酶组成，呈正二十面体。病毒囊膜上有放射状突起，直径约为8 nm。ALV基因组全长约7. 2 kb，可直接作为mRNA。ALV结构基因从5’端至3’端顺序为gag-pol-env,分别编码病毒结构蛋白、RNA依赖的DNA聚合酶(反转录酶)和囊膜糖蛋白。gag基因编码病毒内部非糖基化结构蛋白，包括基质蛋白、蛋白酶、衣壳和核衣壳。在ALV亚群间，这些病毒蛋白十分保守，具有高度的同源性，即所谓的群特异性抗原或GSA。pol基因编码病毒的反转录酶和整合酶，以完成作为细胞基因信息表达前的病毒至前病毒以及前病毒DNA整合进细胞染色体的过程。env基因编码病 毒囊膜糖基化蛋白。包括膜表面糖蛋白亚单位(SU) gp85和跨膜糖蛋白亚单位(TM) gp37。SU是由gp85基因编码的，它含有病毒一受体决定簇，决定禽白血病的亚群特异性；TM负责将病毒转入细胞。结构基因两侧的长末端序列(long terminal repeats, LTR ),与病毒RNA的复制和翻译有关。急性转化型ALV还带有病毒性肿瘤基因(^oncogene)。该病毒含有5种结构蛋白即病毒群特异性抗原衣壳蛋白P27，病毒基膜蛋白P19，参与RNA加工与包装的核衣壳蛋白P12，参与蛋白前体剪切的天冬氨酸酶P15，功能不详的P10。内源性病毒RAV-O株中存在P27的变异体即P27°。反义核酸(antisense nucleic acid)是一段与祀基因(mRNA或DNA)的某段序列互补的天然存在或人工合成的核苷酸序列，反义核酸通过碱基配对方式特异性的与病毒靶基因结合形成杂交分子，从而在复制、转录和翻译水平调节靶基因的表达，或诱导RNase H识别并切割mRNA，进而使其功能丧失。反义核酸包括反义RNA (antisense RNA)和反义DNA (antisense DNA),具有合成方便、序列设计简单、容易修饰、选择性高、亲和力强等特点。反义核酸作为一种新的抗病毒、抗肿瘤药物，掀起了一场药理学领域的革命，即新的药物受体mRNA通过新受体结合方式(Watson-Crick杂交)、引发新的药物受体结合后反应(I) RNase H介导的祀RNA的降解；(2)抑制DNA的复制和转录及转录后的加工和翻译等。可以说反义寡核苷酸(ODNs)疗法比传统的药物治疗手段有更高的特异性。从二十世纪70年代末到现在，在这三十年的时间中，反义核酸药物已走出实验室，进入了实际临床应用。特别是第一个反义核酸药物Fomivirsen通过FDA批准上市后,人们对反义疗法尤为关注。反义核酸作用原理基于碱基配对原则，可通过与靶RNA进行碱基配对结合的方式参与对相关基因表达的调控。其作用方式可能有①反义RNA与病毒mRNA结合形成互补双链阻断核糖体与病毒mRNA的结合，从而抑制了病毒mRNA翻译成蛋白质的过程。②反义DNA能与祀基因形成一种三链核酸(triple helix nucleic acid),它通过作用于控制基因转录的转录子、增强子和启动子区，对基因的转录进行调控。③反义核酸与病毒mRNA的结合可阻挡mRNA向细胞质的运输。④反义核酸与病毒mRNA结合后使得mRNA更加易被核酸酶识别降解，从而大大缩短mRNA的半衰期。上述四种作用途径都可表现为对病毒基因表达的抑制或调控，且这种调控是高度特异性的。反义核酸是通过碱基互补配对的原理来识别所打靶的基因，从理论来分析，研究人员以动物细胞为例，其染色体大约有几十亿对碱基本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种肽核酸，选自如下任一种或任几种肽核酸：a）其核酸序列为序列表中的序列15’？？AGACUAAGGCAAAAAUCUGUU？3’；b）其核酸序列为序列表中的序列2？5’？？ACGACUUAUUGAAAAACUCUC？3’；c）其核酸序列为序列表中的序列35’？？UAUAACCGUCUGUAGUUGGAC？3’；d）其核酸序列为序列表中的序列45’？？ACAUAUUUGAUUAUCUCUCCU？3’。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：韩健宝，徐步，范建华，
申请(专利权)人：韩健宝，
类型：发明
国别省市：
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