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一种禽白血病检测样品前处理的改进方法技术

技术编号:11757966 阅读:222 留言:0更新日期:2015-07-22 11:34
本发明专利技术公开了禽白血病检测样品前处理的改进方法,一,将备检的肛拭子样品、蛋清样品或细胞病毒分离培养物样品放入容器中并进行标记,并将放入检测样品的容器在指形管架上排好;二,将装有容器的指形管架放入密封箱内,然后将充满的液氮罐快速向密封箱内注入液氮,注入液氮的量以溢满指形管架为准;三,注氮作业结束后,迅速将密封箱的箱盖盖上并用重物压在箱盖上进行密封,然后静置1-3分钟后,掀开箱盖既可以看到经过液氮彻底冻结的检测样品;四,将冻结后的检测样品迅速拿出后放入36-38℃水浴锅回温3-5分钟,最后将回温后的检测样品通过离心机在离心速度为每分钟1000转的条件下离心30秒即可,从而可以将检测样品用于检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
近年来,禽白血病(ALV)的广泛发生与流行,给我国养鸡业造成了巨大经济损失。禽白血病的危害,主要表现为感染鸡群出现肿瘤病及慢性消耗性死亡、生长发育不良、生产性能下降和免疫抑制等。目前,禽白血病尚无商品化疫苗,也未见有特效治疗药物,控制禽白血病的主要措施是对现有的种鸡群进行检测、净化,及时淘汰阳性鸡。现阶段,禽白血病病毒检测方法主要有抗原、抗体ELISA、免疫荧光、PCR、斑点杂交和病毒分离等。禽白血病的检测是一项系统工程,影响因素较多,其中检测样品的前处理是个重要环节。检测样品的前处理其中心宗旨是充分释放寄生在机体细胞中的病毒,以提尚检测的灵敏性和准确性。检测的样品主要包括包括肛拭子、蛋清、外周血和病变组织等,国内现有的禽白血病检测样品前处理方法很难适应当前高通量、快速检测技术要求。_20°C冻融3次,至少需要40分钟,这对于大批量样品的快速检测带来了时间上的滞后,特别是I日龄的雏鸡,肛拭子要求在24小时一36小时内完成检测,给实际操作进度造成了很大困难;另外,_80°C条件下的冻融,需要价格昂贵的超低温冰箱或冰柜,而且实际运行成本也很高,这对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种禽白血病检测样品前处理的改进方法,它包括以下步骤:步骤一,将备检的肛拭子样品、蛋清样品或细胞病毒分离培养物样品放入容器中并进行标记,并将放入检测样品的容器在指形管架上排好;步骤二,将装有容器的指形管架放入密封箱内,然后将充满的液氮罐快速向密封箱内注入液氮,注入液氮的量以溢满指形管架为准;步骤三,注氮作业结束后,迅速将密封箱的箱盖盖上并用重物压在箱盖上进行密封,然后静置1‑3分钟后,掀开箱盖既可以看到经过液氮彻底冻结的检测样品;步骤四,将冻结后的检测样品迅速拿出后放入36‑38℃水浴锅回温3‑5分钟,最后将回温后的检测样品通过离心机在离心速度为每分钟1000转的条件下离心30秒即可,这样就可...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:范建华俞燕韦玉勇何友义高明燕徐步
申请(专利权)人:范建华江苏省家禽科学研究所
类型:发明
国别省市:江苏;32

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