用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组及其试剂盒、使用方法、用途技术

技术编号:10424018 阅读:358 留言:0更新日期:2014-09-12 14:32
本发明专利技术涉及用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌快速检测的肽核酸探针,该探针的DNA序列如SEQ NO:1、SEQ NO:2所示。本发明专利技术还公开了应用该探针鉴定样品中粪肠球菌和/或其他肠球菌及其药物敏感性的试剂盒及其使用方法。本发明专利技术的探针和试剂盒可用于检测样品中粪肠球菌和/或其他肠球菌菌株及其药物敏感性。本发明专利技术省去DNA提取步骤,一般整个鉴定过程耗时不超过2个小时;且假阳性低,步骤少,效率高、敏感度高、特异性强。本发明专利技术能够迅速准确地检测粪肠球菌和其他肠球菌,对于保障食品安全、保证环境卫生、预防疾病传播具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组及其试剂盒、使用方法、用途
本专利技术涉及临床关联微生物的检测领域,具体涉及检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组。
技术介绍
肠球菌(Enterococcus)为革兰阳性,成双或短链状排列的球菌、卵圆形,无芽胞,无荚膜,部分肠球菌有稀疏鞭毛。营养要求高,需氧及兼性厌氧菌,最适生长温度35°C。临床上常见的是幾肠球菌(Enterococcus faecalis)和屎肠球菌(Enterococcusfaecium),是目前医院内感染的最重要的病原菌之一,少数可分离到鸟肠球菌(Enterococcus avium)、坚忍肠球菌(Enterococcus durans)、铅黄肠球菌(EnterococcuscasselifIavus)等。肠球菌属为人类肠道正常菌群,在外界环境中亦存在。该类菌可致院内感染,也可致院外感染,尤其是头孢菌素类等的应用、留置导尿、血液及腹膜透析等均为导致肠球菌院内感染的危险因素。尿路感染为肠球菌引起的感染中最为常见,多表现为上、下尿路感染,少数为前列腺炎和肾外周脓肿;心内膜炎感染中肠球菌引起的约本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组,其特征在于:所述肽核酸探针组的DNA序列如SEQ NO:1、SEQ NO:2所示;其中,所述SEQ NO:1序列是:5’‑TTA TCC CCC TCT GAT GGG‑3’,用于检测粪肠球菌;其中,所述SEQ NO:2序列是:5’‑TAC TGA TCG GCA GCT‑3’,用于检测其他肠球菌;其中,所述SEQ NO:1序列或SEQ NO:2序列可分别使用,用来分别检测粪肠球菌或其他肠球菌;也可同时使用,用来同时检测粪肠球菌和其他肠球菌。

【技术特征摘要】
1.用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组,其特征在于:所述肽核酸探针组的DNA序列如SEQ NO:1、SEQ NO:2所示; 其中,所述SEQ NO:1序列是:5,-TTA TCC CCC TCT GAT GGG-3’,用于检测粪肠球菌; 其中,所述SEQ NO:2序列是:5,-TAC TGA TCG GCA GCT-3’,用于检测其他肠球菌; 其中,所述SEQ NO:1序列或SEQ NO:2序列可分别使用,用来分别检测粪肠球菌或其他肠球菌;也可同时使用,用来同时检测粪肠球菌和其他肠球菌。2.如权利要求1所述的用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组,其特征在于,所述肽核酸探针组能在粪肠球菌和/或其他肠球菌的rRNA、rDNA或互补的rRNA序列中检测靶序列。3.如权利要求1所述的用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组,其特征在于,所述肽核酸探针组中检测粪肠球菌的探针应至少包含86%结构上类似于SEQ NO:1的DNA序列;所述肽核酸探针组中检测其他肠球菌的探针应至少包含86%结构上类似于SEQ NO:2的DNA序列。4.如权利要求1~3任一所述的用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组,其特征在于,所述肽核酸探针组至少连接到一种可检测的级分。5.如权利要求4所述的用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组,其特征在于,所述可检测的级分的类型选自:缀合物、生色团、荧光团、放射性同位素、酶、半抗原或发光化合物。6.如权利要求5所述的用于荧光原位杂交检测粪肠球菌和/或其他肠球菌的肽核酸探针组,其特征在于,所述突光团基团是下列中的至少一种:突光团Alexa系列、Alexa Fluor系列、花青苷、5-(及-6)羧基_2’、7' - 二氯荧光素、5-R0X。7.用于检测粪肠球菌和/或其他肠球菌菌株及药物敏感性的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1~6中任一项的探针。8.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:秦勇何素莉祝茂生张丽
申请(专利权)人:玉峰惠仁生物医药科技北京有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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