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太空诱变高效粪肠球菌的筛选制备方法及其应用技术

技术编号:1751684 阅读:250 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及空间诱变优良微生物菌种,具体说是一种太空诱变高效粪肠球菌的筛选制备方法及其应用。粪肠球菌为肠球菌属中最常见的即为代表种,粪肠球菌生活在人体肠道里,通常对人体不仅无害而且有益。但它有时也会引发严重感染,并对抗生素有抵抗力。本发明专利技术优选普通粪肠球菌进行太空搭载,经过空间诱变精心筛选培育出太空诱变高效粪肠球菌作为生产菌种,其生命力旺盛、生长速度快、发酵单位高、发酵周期短、发酵产物含量高、生产适应性强的菌株作为生产菌种,经一级发酵和二级发酵,将发酵液精制提纯,其发酵液具有调节免疫力功能、抗肿瘤等功能。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
太空诱变高效粪肠球菌的筛选制备方法,其特征在于:筛选一种经过空间搭载,运用空间技术进行微生物诱变育种,通过外层空间特殊的物理化学环境,即微重力、强辐射、高能粒子、交变磁场及高真空的环境中,导致于2007年10月19日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,编号为CGMCCNo.2220的粪肠球菌的遗传性质发生变异,引起菌种DNA分子的变异和重组,从而获得生命力旺盛、生长速度快、品质优良的菌种,优选出其中的正变异、遗传性质稳定的太空诱变高效粪肠球菌作为生产菌种;该菌种已于2007年10月19日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,编号为CGMCCNo.2221;    (一)太空诱变高效粪肠球菌的筛选如下:    经太空搭载的菌株返回地面后,立即对搭载菌株和对照菌株同时进行分离,避免太空诱变菌株优良性状的丢失;菌株培养过程中严格控制培养温度、湿度、通气量与培养时间等条件,保证搭载菌株与对照菌株在同一条件下生长,仔细观察菌落长出的时间,对于最先长出的菌落进行标记。为了增加菌种初筛量,每次分离需使用300~400套平板,控制每个平板上的有效菌落数在60~70个;通过观察,发现搭载菌株的生长速度明显快于对照菌株,而且菌落成熟较早,菌落生长饱满,形态更规则,菌落平均直径也大于对照菌株;验挑选2000~3000个生长良好的菌落,通过对其菌落特征、细胞形态的比较与鉴定,再挑选20%~30%接入斜面培养;斜面培养成熟后,接入液体发酵培养基内进行深层静置培养;每隔四小时取样检测发酵液PH、生物量、总糖含量、还原糖含量、活性物质含量以及菌株生长情况等,发现搭载菌株在发酵液中的生长速度也明显快于对照菌株,而且具有对原材料利用速度快、目的产物出现早等特点;根据测定结果筛选出高产菌株进行小试与中试,并且经过对其遗传稳定性考察,确定了用于生产的太空诱变高效粪肠球菌;    (二)太空诱变高效粪肠球菌的发酵制备工艺    1.发酵过程:    所述发酵过程的发酵培养基是:牛肉膏0.2-0.8%,酵母膏0.2-0.8%,蛋白胨0.3-0.8%,葡萄糖0.1-0.9%,氯化钠0.2-0.6%;经灭菌温度105-125℃,时间30分钟,蒸汽压力0.11-0.13Mpa灭菌后备用;    (1)一级发酵罐:    将优良的摇瓶菌种在无菌条件下按1-10%接种量接入灭菌后的一级发酵罐。罐压不超过0.02Mpa,通气量以能翻动培养...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孙卫
申请(专利权)人:孙卫
类型:发明
国别省市:87[中国|西安]

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