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同步检测10种转基因玉米品系的试剂盒、及其使用方法技术

技术编号:7834809 阅读:235 留言:0更新日期:2012-10-11 20:19
本发明专利技术公开一种实时荧光RCA技术同步检测10种转基因玉米品系的试剂盒、及其使用方法,属于转基因食品检测技术领域,其通过锁式探针RCA技术与实时荧光PCR技术相结合,建立了实时荧光PCR-锁式通用探针滚环扩增(RCA),针对10种转基因玉米品系分别设计锁式探针SEQ?ID?NO:1~10,通过滚环扩增技术与待检测样品中的靶标序列互补结合,在连接酶作用下使探针环化;进一步通过滚环扩增的通用引物区,实现环状锁式探针的级联扩增;本发明专利技术试剂盒具有高通量、特异性、准确性、高灵敏等特点,锁式探针独特的设计,满足了专化性检测的需要,而且可以结合多种扩增方式及检测标记物,适应多种检测平台,填补了国内外空白。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于转 基因食品检测
,具体涉及实时荧光RCA技术同步检测10种转基因玉米品系的试剂盒、及其在检测转基因玉米品系中的应用。
技术介绍
随着现代生物技术的发展,转基因食品已逐步进入普通百姓的生活。由于转基因食品所具有的潜在非安全性,为保护广大消费者的权益,满足其选择权和知情权以及出于国际贸易的需要,转基因食品的检测越来越引起各国政府和有关食品监督机构的重视。目前转基因产品检测方法分为两大类I、免疫学检测法免疫学检测法是从蛋白质水平对转基因食品进行检测,即对外源蛋白质的测定。可将其分为Western杂交、酶联免疫法(ELISA)、试纸条法和快速检测试剂盒法。免疫学检测法,其基本原理是通过抗原(antigen)抗体(antibody)之间的特异性反应来实现的。这种方法的不足在于第一,由于抗原抗体反应的专一性,因此一种试剂盒只针对一特定转基因产物,无法高通量、快速的检测具有多种混合成分的食品样品;第二,加工过的转基因食品中的蛋白质抗原性很容易破坏,从而影响检测结果的准确性;第三,有些转基因食品不表达蛋白质或表达量很低或很大时,则无法进行检测。2、PCR 检测法PCR检测法是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种转基因玉米品系检测试剂盒,其特征在于包括锁式探针序列SEQ ID NOΓ10中至少一种。2.根据权利要求I所述的一种转基因玉米品系检测试剂盒,其特征在于包括锁式探针序列SEQ ID NO Γ10中至少一种以及SEQ ID NO : 11 12中至少一种。3.根据权利要求2所述的一种转基因玉米品系检测试剂盒,其特征在于包括锁式探针序列SEQ ID NO Γ10以及SEQ ID NO : 11 12中至少一种。4.根据权利要求3所述的一种转基因玉米品系检测试剂盒,其特征在于包括下述锁式探针序列SEQ ID NO Γ1205.如权利要求广4中任一项所述的一种转基因玉米品系检测试剂盒,其特征在于还包括通用引物SEQ ID Ν0:13和SEQ ID NO :14。6.一种同步检测转基因玉米品系的方法,其操作步骤包括 ①将待测转基因玉米品系的干燥种子研磨成粉末,分别提取基因组DNA; ②基因组DNA的消化 取步骤①获得的基因组DNA 1500ng,于37°C过夜消化;再95°C加热IOmin使酶失活;其中,消化反应...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐君怡曹际娟赵昕曹冬梅
申请(专利权)人:徐君怡曹际娟赵昕曹冬梅
类型:发明
国别省市:

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