转基因玉米品系BT176 PCR-DHPLC检测引物及检测方法技术

技术编号:8384220 阅读:159 留言:0更新日期:2013-03-07 01:57
本发明专利技术公开了一种转基因玉米品系BT176的PCR-DHPLC检测引物及检测方法,所述引物具有较强的特异性,能够用于PCR扩增以及DHPLC分析。所述检测方法提供了一种操作简便、扩展性能好、灵敏度高的转基因玉米品系BT176检测方法。利用DHPLC对PCR扩增产物进行分析,其片段大小区分率可达数个碱基,分辨率高。本发明专利技术的引物和检测方法为转基因玉米品系BT176检测提供了一种简单、方便、有效、可靠的检测方法,特别适合用于口岸检验检疫等部门使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种转基因产品的检测,特别是涉及一种转基因玉米品系的PCR-DHPLC检测弓I物及检测方法。
技术介绍
目前对转基因玉米的检测方法主要采用常规PCR、实时荧光PCR、PCR-基因芯片等检测方法。传统的常规PCR检测方法在平台扩展方面具有一定的局限性,随着待检目标的增加,需要对体系中的每套引物的用量及比例重新进行优化,并且兼顾扩增效率等因素,工作量较大;另一方面,通常采用的凝胶电泳分析扩增产物的方法,区分效率不高,检测结果不理想。实时荧光PCR虽然在检测灵敏度等方面较多重常规PCR检测方法有优势,但是由于目前仪器自身及荧光染料研制的限制,仅能同时提供互不干扰的4个荧光通道,也限制了该技术在检测通量扩展。PCR-基因芯片检测方法,操作步骤繁琐,并不适合大规模的高通量检测。变性高效液相色谱技术(Denaturing High-performance Liquid Chromatography,DHPLC)是一种简单、快速、非凝胶的核酸分析方法,具有灵敏度高、扩展性强、分辨率好等优点。该方法在50°C条件下分析样品,样品峰的洗脱只由碱基对的数量决定洗脱顺序,当过柱的乙腈浓度提本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于转基因玉米品系BT176?PCR?DHPLC检测的引物,其特征在于:所述引物的上游引物含有Seq?ID?No.1所示序列,下游引物含有Seq?ID?No.2所示序列;Seq?ID?No.1:5’?TCAAGCACGGGAACTGGC?3’Seq?ID?No.2:5’?TGGGCGTGGTATCGACTTTATA?3’。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:章桂明向才玉凌杏园潘广程颖慧康林李鹤遥
申请(专利权)人:深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
类型:发明
国别省市:

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