本发明专利技术公开了亚精胺在作为缺氧预适应生物标记物中的应用。本发明专利技术所述应用具体为用于检测如下1)-4)中任一所述的仪器或/和物质在制备鉴定或辅助鉴定动物或动物是否处于缺氧预适应状态的产品中的应用：1)亚精胺、肌酸和缬氨酸的含量；2)亚精胺和肌酸的含量；3)亚精胺和缬氨酸的含量；4)亚精胺的含量。实验证明，缺氧预适应后，脑组织中亚精胺、肌酸和缬氨酸的含量明显升高；可见，亚精胺、肌酸和缬氨酸这三种物质可作为缺氧预适应的标记物，缺氧预适应生物标志物的揭示将对更加深入的了解缺氧预适应的机制以及在临床上对缺氧相关疾病做出早期诊断和干预治疗有很大帮助。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及亚精胺在作为缺氧预适应生物标记物中的应用，特别涉及检测亚精胺含量的仪器或/和物质在制备鉴定动物或细胞是否处于缺氧预适应状态的产品中的应用。
技术介绍
缺氧作为生命的ー种基本病理生理过程，不同程度地存在于多种疾病中，如短暂性脑缺血、冠心病与心绞痛等心脑血管疾病，哮喘、肺气肿和慢性肺阻塞等肺疾患，癫痫、帕金森病和Alzheimer病等脑退 行性疾患或精神障碍、癌症等，在航天航空、高原或深海作业等过程中也都伴有不同程度的缺氧发作和相应的组织细胞损伤，严重时可导致器官损伤或功能障碍。缺氧预适应则是不同种类需氧生物的ー种生物进化上的内源性细胞保护机制，动物或细胞经过非致死量缺氧后，可对随后出现的严重缺氧产生耐受，从而减轻对动物或细胞的损伤，即产生缺氧预适应的保护作用。其机制可能与内源性保护机制的激活、抗缺氧活性物质的产生等因素有夫。生物标志物是指可供客观测定和评价的ー个普通生理或病理生理或治疗过程中的某种特征性的细胞学、生物化学或分子指标，通过对它的測定可以获知机体当前所处的生物学过程中的进程。检查ー种疾病特异性的生物标志物，对于疾病的鉴定、早期诊断及预防、治疗过程中的监控可能起到帮助作用。寻找和发现有价值的生物标志物已经成为目前研究的ー个重要热点。生物标志物是生物体受到严重损害时，在不同化学和生物学水平(分子、细胞和个体等)上因受内外环境影响而产生的特异性信号指标。它可以对严重毒性伤害和疾病提供早期警报。这种信号指标可以是细胞分子结构和功能的变化，可以是某一生化代谢过程的变化或生成异常的代谢产物或其含量，可以是某一生理活动或某一生理活性物质的异常表现，也可以是个体表现出的异常现象。如果能够掲示出缺氧预适应的生物标志物，将对更加深入的了解缺氧预适应的机制以及在临床上对相关疾病做出提前诊断和治疗具有很大的帮助。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种检测亚精胺含量的仪器或/和物质的新用途。本专利技术所提供的检测亚精胺含量的仪器或/和物质的新用途具体为用于检测如下I)-4)中任一所述的仪器或/和物质在制备鉴定或辅助鉴定动物或细胞是否处于缺氧预适应状态的产品中的应用I)亚精胺、肌酸和缬氨酸的含量；2)亚精胺和肌酸的含量；3)亚精胺和缬氨酸的含量；4)亚精胺的含量。在本专利技术中，所述缺氧预适应是指动物或细胞经过非致死性缺氧后，对再次遭遇的缺氧产生耐受，从而减轻缺氧对动物或细胞的损伤；所述耐受具体可体现为对相同的缺氧状态的耐受时间延长。本专利技术中，所述仪器为色谱质谱联用仪(液相色谱质谱联用仪)；所述物质可为任何可用于检测亚精胺、肌酸和缬氨酸这三种物质中任一种的物质或同时检测这三种物质。所述色谱质谱联用仪中的色谱仪可为高效液相色谱仪；在本专利技术的一个实施例中，具体为Agilent HPllOO型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；所述质谱仪具体为LCQDeca XP离子讲质谱仪(美国Thermo Finnigan公司)。 本专利技术的再ー个目的是提供鉴定或辅助鉴定动物或细胞是否处于缺氧预适应状态的广品。本专利技术所提供的鉴定或辅助鉴定动物或细胞是否处于缺氧预适应状态的产品具体为用于检测如下1)-4)中任一所述的仪器或/和物质I)亚精胺、肌酸和缬氨酸的含量；2)亚精胺和肌酸的含量；3)亚精胺和缬氨酸的含量；4)亚精胺的含量。本专利技术中，所述仪器为色谱质谱联用仪(液相色谱质谱联用仪)；所述物质可为任何可用于检测亚精胺、肌酸和缬氨酸这三种物质中任一种的物质或同时检测这三种物质。所述色谱质谱联用仪中的色谱仪可为高效液相色谱仪；在本专利技术的一个实施例中，具体为Agilent HPllOO型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；所述质谱仪具体为LCQDeca XP离子讲质谱仪(美国Thermo Finnigan公司)。在实际应用中，为了提高检测结果的准确率，也可以将本专利技术的方法配合其他检测手段一同使用。本专利技术的实施例具体选择小鼠(如ICR小鼠)作为所述动物，用于检测亚精胺、肌酸和缬氨酸的含量，检测部位具体为所述动物(如小鼠)的脑组织。本专利技术利用高效液相色谱的高分离能力和质谱的高灵敏度检测能力对提取液进行全面分析，最終发现亚精胺、肌酸和缬氨酸这三种物质可作为缺氧预适应的标记物。具体表现为，缺氧预适应后(I)亚精胺在脑组织中含量明显增加。(2)肌酸在脑组织中含量明显增加。(3)缬氨酸在脑和心脏中含量升高，缬氨酸作为重要的分解供能氨基酸，这将有利于动物能量的供给和免疫力的增强。缺氧预适应生物标志物的掲示将对更加深入的了解缺氧预适应的机制在临床上对缺氧相关疾病做出早期诊断和干预治疗有很大帮助。附图说明图I为小鼠的缺氧耐受时间与缺氧处理次数之间的关系。图2为在正离子检测模式的ESI电离条件下，脑组织样品的总离子流色谱图。其中，A为空白对照样品(对照组小鼠水提液样品)出为小鼠缺氧耐受的脑组织样品(缺氧6次组小鼠的水提液样品)。图3为对照组小鼠和缺氧6次组小鼠脑组织样品(水提液样品)的得分图。图4为缺氧预适应生物标志物与标准品的色谱图和多级质谱碎片图谱。其中，Al为缴氨酸色谱图；A2为缴氨酸质谱图；B1为肌酸色谱图；B2为肌酸质谱图；C1为亚精胺色谱图；C2为亚精胺质谱图。图5为对照组、缺氧3次和缺氧6次组中缺氧预适应生物标志物在脑中的含量变化。其中，A为缴氨酸；B为肌酸；C为亚精胺。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明 ，均可从商业途径得到。I、仪器和材料LCQ Deca XP离子讲质谱仪(美国Thermo Finnigan公司)，配置有ESI源,离子阱质量分离器，Tune Plus工作软件。Agilent HPllOO型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)，包括G1379A在线脱气机；G1312A双元泵；G1313A自动进样器及Agilent色谱数据化学工作站。色谱柱Waters Symmetry C18 3· 5 μ m(2. ImmX 100mm, i. d. 3· 5 μ m,美国 Waters公司)。千分之ー电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)；SIGMA 3K15型低温高速离心机(德国SIGMA公司)；KQ-100E医用超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；T18高速匀浆机(广州仪科实验室技术有限公司);Vortex. Genie2旋涡混合器(美国scientificindustries公司)；lml注射器(上海米沙瓦医科エ业有限公司)；125ml广ロ瓶。2、药品和试剂甲醇为色谱纯(美国Fisher科技公司)，甲酸为色谱纯(北京迪马试剂公司)；流动相用水为娃哈哈饮用纯净水(杭州娃哈哈集団有限公司)，三氯こ酸(北京化学试剂公司)。标准品缬氨酸(批号=140681-200401);肌酸(货号C0780，美国sigma公司)；亚精胺(货号85561,美国sigma公司)。3、实验动物健康雄性ICR小鼠，体重18_22g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供(动物号SCXX (京)2006-0009)。实施例I、小鼠缺氧预适应动物模型的获得将ICR小鼠饲养于清洁室内，实验前禁食12小时不禁水。将30只小鼠随机分成3组，分别为对照组、缺氧3次组和缺氧本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：薛明，程海婷，汪明明，苏甦，崔灿，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：
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