一种东海原甲藻的检测方法技术

本发明专利技术提供一种东海原甲藻的检测方法，设计了三对LAMP引物FIP、BIP、LF、LB、F3和B3，其中FIP为5’端生物素标记引物，LF为5’端异硫氰酸荧光素FITC标记探针，配制含三对引物和样品模板的LAMP反应体系步骤，对LAMP反应体系进行扩增，然后用LFD试纸条检测，并随后进行了灵敏度和特异性评价。本发明专利技术具有比现有传统技术PCR检测东海原甲藻的方法更高的特异性、灵敏度、实用性及便捷性，可以在实际野外现场应用，有利于检测和控制东海原甲藻的爆发，提前做好预防。运用本发明专利技术的方法对有害藻类东海原甲藻的检测，能有效的预防有害藻类东海原甲藻发生大规模赤潮，这对保护我国海洋及水产养殖具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于有害藻类检测
，具体涉及一种有害藻类东海原甲藻Prorocentrumdonghaiense的检测方法。
技术介绍
近年来我国的长江口和舟山群岛海域爆发了大规模的原甲藻赤潮。覆盖海域面积达到3000—7000km2，最大细胞密度达3.6x108个.L-1，持续时间最长的一次原甲藻赤潮达1个月。如此大面积、长时间的赤潮实属世界罕见，引起了我国政府、公众和科技界的广泛关注。上述近几年发生在我国东海区的原甲藻赤潮的第一优势种均为东海原甲藻，由于东海原甲藻赤潮在我国东海区的规模和影响较大，它的研究已成为赤潮生物学的热点之一。现阶段，用于检测东海原甲藻的方法主要通过显微镜观察其形态学特征。但由于东海原甲藻个体微小，很难进行样品处理及观察，这需要实验人员具备丰富的经验。因此，需要找到一种更快，更方便，更适合东海原甲藻的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种快速检测有害藻类东海原甲藻的检测方法，以实现对东海原甲藻进行安全、特异、快速、灵敏、简单的现场快速检测，从而弥补现有传统检测技术的不足。本专利技术首先提供一种检测东海原甲藻的环介导等温扩增引物组，包含有以下的引物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种LAMP引物组，其特征在于，所述的引物组包含有：F3，序列为GAGTCCTCCACAGGCACT、B3，序列为ATTCAACGTCGCCCATGC、FIP，序列为CTCGGCTTCCGGGTCAATGTAGTGTGAACGTTTGCACCACT、BIP，序列为AAGATTGCTTATCCGACCGCGCAGAGTCAGAACGGAGCACAT、LF，序列为CCACGGTCTTTGTGAAGTCATC、LB，序列为TCTTTGACCGCAACATCACGG。

【技术特征摘要】
1.一种LAMP引物组，其特征在于，所述的引物组包含有：F3，序列为GAGTCCTCCACAGGCACT、B3，序列为ATTCAACGTCGCCCATGC、FIP，序列为CTCGGCTTCCGGGTCAATGTAGTGTGAACGTTTGCACCACT、BIP，序列为AAGATTGCTTATCCGACCGCGCAGAGTCAGAACGGAGCACAT、LF，序列为CCACGGTCTTTGTGAAGTCATC、LB，序列为TCTTTGACCGCAACATCACGG。2.如权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述的FIP的序列为CTCGGCTTCCGGGTCAATGTAGTGTGAACGTTTGCACCACT。3.如权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述的BIP的序列为AAGATTGCTTATCCGACCGCGCAGAGTCAGAACGGAGCACAT。4.如权利要求1或2所述的引物组，其特征在于，所述的FIP的5′端用生物素标记。5.如权利要求1或3所述的引物组，其特征在于，所述的LF的5′端用FITC标记。6.权利要求1所述的引物组在检测东海原甲藻中的应用。7.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱鹏，黄海龙，严小军，高威芳，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33