【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种肌球蛋白ATP酶活性微量测定方法，以经典钼蓝法的反应原理为基础，通过底物浓度、反应体系的PH值、钙离子浓度、反应时间等影响因素考察，确定优化反应条件，该方法简便、快速、响应值高，线性范围宽，并可应用于抑制剂的筛选，发现鲁斯可皂苷元抑制肌球蛋白ATP酶活性的用途。
技术介绍
肌球蛋白最早发现于动物细胞的肌肉组织和细胞质中，依据来源不同可以分为传统型肌球蛋白和非传统型肌球蛋白。肌球蛋白参与了包括肌肉收缩、胞质分裂、神经突触生长、靶向小泡运输及信号传导等内在的多种细胞活动，是生物体内非常重要的一大类ATP驱动蛋白，肌球蛋白能利用自身的ATP结合位点催化ATP释放能量，并将这些能量转化为机械能而参与诸多细胞活动，在细胞的迁移、黏附、机体的免疫应答以及肿瘤的发生发展等生理病理过程中均发挥着重要的作用，是国际日益关注的热点之一。因此，研究肌球蛋白ATP酶活性既可以探讨肌球蛋白生理特性，也是阐释心血管疾病和肿瘤等疾病的发生发展机制，并筛选发现新型抑制剂的重要途径(宋佳希等.非肌肉肌球蛋白重链 II A(NMHC II Α)生理病理功能研究进展.现代生物医学进...
【技术保护点】
１．一种肌球蛋白ＡＴＰ酶活性的微量测定方法，包括：取肌球蛋白试液、氯化钙溶液、Ｔｒｉｓ－马来酸缓冲液混匀后水浴共孵；加入ＡＴＰ液和Ｔｒｉｓ－马来酸缓冲液，混匀后水浴孵育；加入三氯乙酸液，混匀后置冰水浴中止反应；离心后取上清液依次加入钼酸铵溶液、氯化亚锡溶液、Ｔｒｉｓ－马来酸缓冲液，２５℃水浴显色，用酶标仪７００ｎｍ测定吸光度值，其特征是：ＡＴＰ与肌球蛋白的摩尔比为２０００∶１，钼酸铵与氯化亚锡摩尔比为５．５∶１。
【技术特征摘要】
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