一种提取分离高纯度倒提壶酸的制备工艺制造技术

本发明专利技术涉及一种提取分离高纯度倒提壶酸的制备工艺，其特征在于：将倒提壶药材粉碎，加入适量溶剂提取，滤过，提取液加活性炭除杂，浓缩，浓缩液先后采用大孔吸附树脂柱层析及高速逆流色谱技术进行分离制备高纯度的倒提壶酸。本发明专利技术分离效果好、样品损失少、无污染、高效快速，工艺稳定，可大量分离倒提壶酸，制得的倒提壶酸纯度可达98%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种采用大孔树脂和高速逆流色谱法分离制备高纯度倒提壶酸的工艺。
技术介绍
倒提壶ijOynoglossum amabile Stapf et Drumm)为紫草科琉璃草属植物，多年生草本，分布于我国云南、贵州、广东、广西、新疆等地。倒提壶全草入药，其味苦，性凉，有清热利湿、散瘀止血、止咳、镇痛之功效，是我国布依族常用治疗疟疾、肝炎、痢疾、咳嗽、风湿性关节炎、支气管炎、膀胱炎、尿道炎等症的药物。现有技术对倒提壶中具体有效成分单体的研究不多，文献报道倒提壶中倒提壶酸为五环三萜类化合物，具有较强的生物学活性，文献 “民族药倒提壶的抗炎活性成分研究”中根据三萜类化合物具有羧基是其具有抗癌活性的重要依据，而倒提壶酸具有三个羧基，推测应该其具有抗癌活性。因而其在制药领域中具有广阔的应用。倒提壶酸白色粉末(甲醇)，10%硫酸一乙醇110°C下显蓝色。分子量为532，分子式为 C30H44O8。现有文献采用水提、有机溶剂萃取、大孔树脂吸附、硅胶柱柱层析分离等对倒提壶酸进行提取分离，由于生产周期长、制备量小、有机溶剂用量大，难以满足现代生产需要，本专利技术克服了现有技术的不足，提供了一种提取分离高纯度倒提壶酸的制备工艺。高速逆流色谱(HighSpeed Countercurrent Chromatography，简称 HSCCC)是国际上于上世纪80年代以来在液-液分配色谱基础上发展起来的新型分离技术，其分离原理是利用样品中各组分再两相中分配系数不同，导致在螺旋柱中的移动速度不同，因而能使样品各组分按分配系数的次序，依次得到分离。高速逆流色谱作为一种新型的分配技术，有许多优点是传统液-固色谱无法比拟的，因而有很广阔的应用前景。首先，它的流动相、固定相均为液体，不需要固体载体，避免了液-固色谱常会造成的固体载体对样品的不可逆吸附，可以保证样品再不损失任何一种组分的情况下得到分离，理论上样品回收率相当高；其次，它的分离效率高，可以达到几千个理论塔板数，尤其在天然产物组分分离提取中有较高的分离度，有的样品经过一次分离就可以得到一个甚至多个单体，并且分离时间也短，一般是几个小时即可完成一次分离；此外，它使用常规试剂，有广泛的液-液分配体系可供选择，体系更换方便、快捷；它的进样量大，可以从毫克到克量级，进样体积可达20ml以上，这对于样品的纯化制备显示出惊人的优势。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种提取分离高纯度倒提壶酸的制备工艺，所得产品倒提壶酸含量达98%以上。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案一种提取分离高纯度倒提壶酸的制备工艺，其特征在于将倒提壶药材粉碎过20目筛，加入5-10倍量提取溶剂，加热至60-80°C，提取2-3次，每次1_3小时，合并提取液加入针剂类药用活性炭除杂，滤出活性炭，减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入大孔树脂柱吸附， 先用水洗，再用50-75%乙醇溶液洗脱，收集醇洗液，回收乙醇，得到浸膏；将浸膏采用高速逆流色谱分离制备高纯度倒提壶酸，所得产品倒提壶酸含量为98%以上。所述提取溶剂为0-50%的乙醇水溶液。所述活性炭用量为提取液总质量的1_5%0。所述大孔树脂柱分离采用湿法装柱。所述高速逆流色谱分配系统为庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水，四种组分的体积比为 (5-8):(3 10) (9-12):(1-5)。所述高速逆流色谱流动相的流速为2-5ml/min，主机转速为750_850rpm。所述高速逆流色谱达到动态平衡后，将样品溶液泵入色谱系统中，同时在出液端接紫外检测器，在线检测，与倒提壶酸标准图谱对应，收集目标液体，蒸除溶剂，干燥即得产PΡΠ O本专利技术采用活性炭出去脂溶性杂质；大孔树脂吸附，处理量大；通过采用合理的溶剂体系、控制主机转速和流动相流速，可得到高纯度的倒提壶酸，整个工艺条件温和、损失少。具体实施例方式实施例1 将倒提壶药材粉碎过20目筛，取1kg，加入5L的50%乙醇，加热至60°C，提取2次，每次 3小时，合并提取液加入5g针剂类药用活性炭除杂，滤出活性炭，减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入大孔树脂柱吸附，先用水洗，再用50%乙醇溶液洗脱，收集醇洗液，回收乙醇，得到浸膏；然后采用高速逆流色谱分离倒提壶浸膏，将庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5 7 11 4) 系统置于分液漏斗中振摇，放置，分别取上相作为固定相，下相作为流动相，将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满固定相，让仪器以750r/min转动，同时将流动相以aiil/min的流速泵入，待流动相从出液端流出且两相在色谱中达到平衡后，将样品溶液注入色谱系统中，出液端采用紫外监测进行连续检测，与倒提壶酸的标准图谱对应，收集倒提壶酸流出液，用旋转蒸发仪除去溶剂，干燥，得到0. 31g倒提壶酸，测定其含量为98. 6%。实施例2:将倒提壶药材粉碎过20目筛，取1kg，加入IOL的水，加热至80 °C，提取3次，每次1 小时，合并提取液加入Ig针剂类药用活性炭除杂，滤出活性炭，减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入大孔树脂柱吸附，先用水洗，再用75%乙醇溶液洗脱，收集醇洗液，回收乙醇，得到浸膏；然后采用高速逆流色谱分离倒提壶浸膏，将庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水(7:10:9:5) 系统置于分液漏斗中振摇，放置，分别取上相作为固定相，下相作为流动相，将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满固定相，让仪器以800r/min转动，同时将流动相以3. Oml/min的流速泵入，待流动相从出液端流出且两相在色谱中达到平衡后，将样品溶液注入色谱系统中，出液端采用紫外监测进行连续检测，与倒提壶酸的标准图谱对应，收集倒提壶酸流出液，用旋转蒸发仪除去溶剂，干燥，得到0. 48g倒提壶酸，经测定其含量为98. 5%。实施例3:将倒提壶药材粉碎过20目筛，取^ig,加入12L的30%乙醇，加热至70°C，提取2次， 每次2小时，合并提取液加入8g针剂类药用活性炭除杂，滤出活性炭，减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入大孔树脂柱吸附，先用水洗，再用60%乙醇溶液洗脱，收集醇洗液，回收乙醇，得到浸膏；然后采用高速逆流色谱分离倒提壶浸膏，将庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水 (7:5:11:4)系统置于分液漏斗中振摇，放置，分别取上相作为固定相，下相作为流动相， 将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满固定相，让仪器以850r/min转动，同时将流动相以 5. Oml/min的流速泵入，待流动相从出液端流出且两相在色谱中达到平衡后，将样品溶液注入色谱系统中，出液端采用紫外监测进行连续检测，与倒提壶酸的标准图谱对应，收集倒提壶酸流出液，用旋转蒸发仪除去溶剂，干燥，得到0. 77g倒提壶酸，经测定其含量为98. 7%。实施例4:将倒提壶药材粉碎过20目筛，取10kg，加入80L的40%乙醇，加热至70°C，提取3次， 每次2小时，合并提取液加入30g针剂类药用活性炭除杂，滤出活性炭，减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入大孔树脂柱吸附，先用水洗，再用阳％乙醇溶液洗脱，收集醇洗液，回收乙醇，得到浸膏；然后采用高速逆流色谱分离倒提壶浸膏，将庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水 (6:10:11:3)系统置于分液漏斗中振摇，放置，分别取上相作为固定相，下相作为流动相， 将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满固定相，让仪器以750r/m本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种提取分离高纯度倒提壶酸的制备工艺，其特征在于：将倒提壶药材粉碎过２０目筛，加入５－１０倍量提取溶剂，加热至６０－８０℃，提取２－３次，每次１－３小时，合并提取液加入针剂类药用活性炭除杂，滤除活性炭，减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入大孔树脂柱吸附，先用水洗，再用５０－７５％乙醇溶液洗脱，收集醇洗液，回收乙醇，得到浸膏；将浸膏采用高速逆流色谱分离制备高纯度倒提壶酸，所得产品倒提壶酸含量为９８％以上。

【技术特征摘要】
1.一种提取分离高纯度倒提壶酸的制备工艺，其特征在于将倒提壶药材粉碎过20目筛，加入5-10倍量提取溶剂，加热至60-80°C，提取2-3次，每次1_3小时，合并提取液加入针剂类药用活性炭除杂，滤除活性炭，减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入大孔树脂柱吸附， 先用水洗，再用50-75%乙醇溶液洗脱，收集醇洗液，回收乙醇，得到浸膏；将浸膏采用高速逆流色谱分离制备高纯度倒提壶酸，所得产品倒提壶酸含量为98%以上。2....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，吴艳波，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：84