一种高纯度鞣花酸的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种高纯度鞣花酸的制备方法。该方法采用五倍子为提取原料，经粉碎，用含碱乙醇水溶液提取，提取液抽滤，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先后采用大孔树脂柱和制备型高液相色谱进行分离制备高纯度的鞣花酸。本发明专利技术工艺稳定，产品鞣花酸含量高，可达98%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，具体涉及一种应用柱分离以及快速的高效液相制备的方法。
技术介绍
革柔花酸(英文名:ellagic acid,化学名2, 3, 7,8-tetrahydroxy benzopyrano-5, 4，3-cde benzopyran-5,10-dione),也是一种植物多酚类化合物，广泛存在于各种自然界的软果、坚果等植物果实中。它对化学物质诱导癌变及其他多种癌变有明显的抑制作用。从机理上讲，本品是一种抗氧化剂，它能与人体内有害自由基结合，具有强力去癌变功效，可以抗衰老、增加机体免疫，还具有降压、镇静作用，对多种细菌、病毒有很好的抑制作用。因此本品有“克癌之星”、“致癌物清除剂”之美称。它可作为保健食品添加剂，研究、开发本品具有较高的经济价值和广泛的应用范围。目前欧美等国需求量很大，因此本品的开发有重要意义。鞣花酸是没食子酸的二聚衍生物，是一种多酚二内酯，呈反式没食子酸单宁结构。 纯鞣花酸是一种黄色针状晶体，熔点(吡啶)大于360°C，微溶于水、醇，溶于碱、吡啶，不溶于醚。分子式为C14H608。目前，高效液相制备色谱用于大规模制备高含量的鞣花酸的工作还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，该方法能实现高纯度鞣花酸的制备。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案，其特征在于包括如下步骤将五倍子药材粉碎，用含碱乙醇水溶液提取2-4次，每次l-3h，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过大孔树脂柱，用水洗至中性，洗液弃去，再用洗脱剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、干燥得粉末，再采用制备型高效液相色谱进行分离制备高纯度的鞣花酸，经HPLC测定产品鞣花酸的含量为98%以上。所述含碱乙醇水溶液体积百分比为60-80%，采用氢氧化钠或碳酸氢钠溶液调节 pH为8 9。所述提取方法为微波辅助提取、加热回流提取或超声提取中的一种。所述大孔树脂型号可选AB-8、LSA-21、HPD-400等。所述洗脱剂为50-80%乙醇，采用盐酸调节PH3-5。所述制备型高效液相色谱条件为以反相键合硅胶为固定相，以乙腈-1%三氟乙酸(52 65 :35 48)为流动相，。本专利技术的有益效果在于(1)本专利技术整体工艺操作简单，可行性强；3(2)本专利技术以制备型高效液相为分离手段，可以获得纯度在98%以上的鞣花酸，且单针分离时间短，非常适合大批量的制备，同时制备溶剂可回收利用，可实现批量制备；(3)本专利技术在制备高效液相色谱前先用大孔树脂除杂，可延长色谱柱的使用寿命。现结合实施例对本专利技术做进一步说明，实施例仅限于说明本专利技术，而非对本专利技术的限定。具体实施例方式实施例1 将五倍子药材粉碎，取lkg，用80%乙醇水溶液(氢氧化钠调碱至pH8)加热回流提取 4次，每次lh，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过LSA-21大孔树脂柱，用水洗至中性，洗液弃去，再用4L60%乙醇(盐酸调节pH3)洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、 干燥得粉末，用75%乙醇溶解，配成浓度为50mg/ml的溶液，经0. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高效液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为25ml，以乙腈-1%三氟乙酸(52 48) 为流动相，控制流速为50ml/min，紫外检测器监测设定为2Mnm，在线检测，收集含有鞣花酸的高纯度流分，浓缩至干即得含量为98. 4%的鞣花酸。实施例2:将五倍子药材粉碎，取1kg，用70%乙醇水溶液(氢氧化钠调碱至pH8)超声提取1次， 每次池，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过HPD-400大孔树脂柱， 用水洗至中性，洗液弃去，再用5L70%乙醇(盐酸调节pH5)洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、干燥得粉末，用75%乙醇溶解，配成浓度为100mg/ml的溶液，经0. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高效液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为25ml，以乙腈-1%三氟乙酸(65 35) 为流动相，控制流速为lOOml/min，紫外检测器监测设定为2Mnm，在线检测，收集含有鞣花酸的高纯度流分，浓缩至干即得含量为99. 3%的鞣花酸。实施例3:将五倍子药材粉碎，取lkg，用60%乙醇水溶液(碳酸氢钠调碱至pH9)微波辅助提取 3次，每次1.证，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过AB-8大孔树脂柱，用水洗至中性，洗液弃去，再用5L50%乙醇(盐酸调节pH3)洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、 干燥得粉末，用75%乙醇溶解，配成浓度为80mg/ml的溶液，经0. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高效液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为30ml，以乙腈-1%三氟乙酸(55 45) 为流动相，控制流速为250ml/min，紫外检测器监测设定为2Mnm，在线检测，收集含有鞣花酸的高纯度流分，浓缩至干即得含量为98. 7%的鞣花酸。实施例4:将五倍子药材粉碎，取^cg，用75%乙醇水溶液(碳酸氢钠调碱至pH8)加热回流提取2 次，每次池，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过AB-8大孔树脂柱， 用水洗至中性，洗液弃去，再用10L65%乙醇(盐酸调节pH4)洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、干燥得粉末，用75%乙醇溶解，配成浓度为120mg/ml的溶液，经0. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高效液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为50ml，以乙腈-1%三氟乙酸(58 42) 为流动相，控制流速为300ml/min，紫外检测器监测设定为2Mnm，在线检测，收集含有鞣花酸的高纯度流分，浓缩至干即得含量为98. 9%的鞣花酸。 实施例5:将五倍子药材粉碎，取^g，用70%乙醇(氢氧化钠调碱至pH9)水溶液超声提取2次，每次池，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过LSA-21大孔树脂柱，用水洗至中性，洗液弃去，再用10L80%乙醇(盐酸调节pH5)洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、干燥得粉末，用75%乙醇溶解，配成浓度为100mg/ml的溶液，经0. 45 μ m微滤膜过滤，制备型高效液相色谱制备柱以C18键合相为填料，进样体积为40ml，以乙腈-1%三氟乙酸(60 :40)为流动相，控制流速为350ml/min，紫外检测器监测设定为2Mnm，在线检测，收集含有鞣花酸的高纯度流分，浓缩至干即得含量为99. 3%的鞣花酸。本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种高纯度鞣花酸的制备方法，其特征在于包括如下步骤：将五倍子药材粉碎，用含碱乙醇水溶液提取２－４次，每次１－３ｈ，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过大孔树脂柱，用水洗至中性，洗液弃去，再用洗脱剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、干燥得粉末，再采用制备型高效液相色谱进行分离制备高纯度的鞣花酸，经ＨＰＬＣ测定产品鞣花酸的含量为９８％以上。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度鞣花酸的制备方法，其特征在于包括如下步骤将五倍子药材粉碎，用含碱乙醇水溶液提取2-4次，每次l_3h，抽滤，合并滤液，减压浓缩无醇，分散于水中，分散液先通过大孔树脂柱，用水洗至中性，洗液弃去，再用洗脱剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、 干燥得粉末，再采用制备型高效液相色谱进行分离制备高纯度的鞣花酸，经HPLC测定产品鞣花酸的含量为98%以上。2.根据权利要求1所述一种高纯度鞣花酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，吴艳波，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：84