生殖系干细胞的分离、表征和繁殖制造技术

技术编号:6545108 阅读:273 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供了对来自于胎儿和成年哺乳动物的生殖系细胞干细胞的分离、表征和繁殖。本发明专利技术还公开了具有不同表型的经分离的生殖系细胞群体,其中亚群能够形成专能细胞或多能细胞的长期培养物,或者能够分化为成熟的生殖系细胞并且再增殖不育的繁殖器官。专能生殖系细胞或多能生殖系细胞也适用于分化成用于治疗的目的的组织特异性的体细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及下述领域在胎儿和出生后发育期间分离的雄性和雌性生殖系干细胞 及这些细胞用于治疗目的的用途。特定地,本专利技术涉及对不同生殖系干细胞群体和由其产 生的细胞系的鉴定、分离和分化,所述细胞在细胞替代疗法中具有不同的潜在用途。
技术介绍
能够安全地用于再生药物中的多能(pluripotent)细胞系的产生在细胞替代 疗法中具有巨大的潜在影响。在这方面,胚胎干(EQ细胞被认为是潜在的细胞来源,因 为它们能够无限繁殖,并且可以分化为所有三种胚层的表型。然而,在能够实现ES细胞 应用之前,至少必须解决伦理问题,并且也必须克服移植后的畸胎瘤形成。来源于组织 的成年(adult)干细胞也被认为是基于细胞的疗法的替代性来源,这尤其是因为它们在 移植后不形成畸胎瘤,并且它们保持分化为相同组织谱系的表型的能力。成年干细胞也 可以被诱导而横向分化(trans-differentiate)为不同谱系的细胞型,或者被再程序化 (reprogramme)而成为用于可能的临床应用的多能干细胞。在所有成年干细胞中,只有生殖 系干细胞(GSC)保留了将原有的遗传信息传递给后代的能力。若干项证据表明,GSC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.由经分离的性腺细胞组成的经分离的生殖系细胞群体,其特征是:表达至少一种选自下组的标记物,所述组由生殖系干细胞表面标记物GFR-α1、α6-整联蛋白、Thy-1、SSEA-4、CD9、Dolichos biflourus凝集素(DBA)、生殖细胞标记物VASA和DAZL,和精原干细胞标记物PLZF组成;表达至少一种选自下组的生殖系干细胞基因,所述组由端粒酶、VASA、c-RET、GFR-α1、DAZL和PLZF组成;和表达高水平的端粒酶。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2007.08.07 US 60/954,496;2008.02.06 US 61/026,502;1.由经分离的性腺细胞组成的经分离的生殖系细胞群体,其特征是表达至少一种选自下组的标记物,所述组由生殖系干细胞表面标记物GFR-α 1、 α 6-整联蛋白、Thy-U SSEA-4、CD9、Dolichos biflourus 凝集素(DBA)、生殖细胞标记物 VASA和DAZL,和精原干细胞标记物PLZF组成;表达至少一种选自下组的生殖系干细胞基因,所述组由端粒酶、VASA、c-RET、GFR- α 1、 DAZL禾口 PLZF组成;禾口表达高水平的端粒酶。2.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞是雄性的。3.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞是雌性的。4.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞是哺乳动物的。5.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞分离自胎儿。6.权利要求5的经分离的生殖系细胞群体,其中所述胎儿为妊娠11和22周之间的。7.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞分离自出生后的个体。8.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞任选地表达选自Oct-4、 Nanog和碱性磷酸酶的多能标记物。9.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞表达针对GFR-α1和α6_整 联蛋白二者的细胞表面标记物。10.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞表达针对Thy-I和α6-整 联蛋白二者的细胞表面标记物和编码端粒酶的基因。11.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞表达针对SSEA4、GFR-CI1的 细胞表面标记物和生殖细胞标记物VASA。12.权利要求11的经分离的生殖系细胞群体,其中大于约50%的细胞表达GFR-α1和 VASA 二者。13.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞不表达至少一种选自下组 的标记物,所述组由黏附/活化分子(EpCAM)和c-Kit组成。14.根据权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞表达Oct-4和c-Kit二 者,并且显示至少一种选自由下组的特性,所述组由以下组成约72小时的细胞周期倍增时间;以高于胚胎干细胞(ESC)中表达的水平表达生殖系特异性基因;以低于ESC的水平表达多能性基因;与白血病抑制因子(LIF)或成纤维细胞生长因子(FGM)相比,其自我更新更加依赖于 胶质细胞依赖性神经营养因子(GDNF);和低于ESC的SSEA-I表达水平。15.权利要求14的经分离的生殖系细胞群体,其中所述多能基因选自由0ct-4、NanOg、 Dppa-5、Sox2、碱性磷酸酶和Crypto组成的组。16.权利要求1的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞分离自雄性,不表达c-Kit 并且能够分化为生精细胞。17.权利要求16的经分离的生殖系细胞群体,其中所述细胞表达α-整联蛋白和 Thy...

【专利技术属性】
技术研发人员:法里波茨·伊扎德亚尔詹森·帕基奥罗缇查德·马科托马斯·V·罗马斯
申请(专利权)人:普里梅真比奥特斯公司
类型:发明
国别省市:US

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