【技术实现步骤摘要】
哺乳动物组织中多潜能干细胞的分离培养所属
本专利技术涉及一种从哺乳动物组织器官中分离培养多潜能干细胞方法。
技术介绍
目前，公知的从哺乳动物受孕中期羊水中分离多潜能干细胞的方法有免疫磁珠法、两期培养法。而这两种方法均不能从人和哺乳动物组织器官中分离培养多潜能干细胞。本专利技术提供一种多潜能干细胞分离培养方法，该方法采用低浓度胰酶培养液培养哺乳动物组织原代细胞，从而分离培养组织中多潜能干细胞。
技术实现思路
为了从哺乳动物组织中分离培养多潜能干细胞，本专利技术提供一种方法，该方法能够从哺乳动物组织中分离培养具有发育全能性潜能的干细胞。本专利技术从哺乳动物组织中分离培养多潜能干细胞的技术方案是：在无血清的干细胞培养液中加入低浓度胰蛋白酶。用此培养液培养哺乳动物组织原代细胞可获得多潜能干细胞。其中，无血清的干细胞培养液可以保证在对组织原代细胞培养过程中多潜能干细胞不发生分化，低浓度胰蛋白酶对组织中多潜能干细胞起到一种筛选作用。本专利技术的有益效果是，能够从哺乳动物组织中分离培养多潜能干细胞。哺乳动物组织中存在的多潜能干细胞是研究哺乳动物的许多疾病如遗传缺陷、肿瘤以及外源性病毒感染机理的理想细胞。附图说明下面结合附图和实例对本专利技术进一步说明图1是绵羊胎儿肾组织多潜能干细胞；图2是绵羊胎儿肾组织多潜能干细胞表达Oct4、SSEA-1的实时定量扩增曲线，其中，2.1为内参基因3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)，2.2为SSEA-1，2.3为Oct4；图3是绵羊胎儿肾组织多潜能干细胞体外悬浮培养7天后形成的类胚体。具体实施方式图1中绵羊胎儿肾组织多潜能干细胞获得的具...
【技术保护点】
一种从人和哺乳动物组织中分离培养多潜能干细胞的方法，其特征是：用低浓度胰酶培养液分离培养的人和哺乳动物组织多潜能干细胞具有发育全能性潜能。
【技术特征摘要】
1.一种从哺乳动物组织中分离培养多潜能干细胞的方法，其特征是：1)配液培养液I：DMEM+1％L-谷氨酰胺+1％非必需氨基酸+1％丙酮酸钠+微量β-巯基乙醇+500u/mlLIF+5ng/mlbFGF，用0.22μm的滤器过滤，4℃保存；培养液II：培养液I+15％FBS；培养液III：培养液I+0.01％胰蛋白酶，用0.22μm的滤器过滤，4℃保存；2)绵羊胎儿肾组织多潜能干细胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：王凤武，荣威恒，李晓奇，詹树柏，达赖，赵世华，孙杰，
申请(专利权)人：内蒙古自治区农牧业科学院，
类型：发明
国别省市：
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