一种培养基底的修饰方法及间充质干细胞分离扩增方法技术

本发明专利技术提供了一种培养基底的修饰方法及使用该方法的间充质干细胞分离扩增方法。所述修饰方法，包括以下步骤：A、将PEG和CYCLIC‑RGD溶于氯仿中，得到修饰液；B、将修饰液均匀涂抹在培养容器的内表面；C、回收培养容器内表面上修饰液中的氯仿，得到内表面覆盖有修饰层的培养容器。利用特定的高分子化学物质而不是使用成分难以确定的细胞外基质对培养容器进行修饰，配合适当的培养基，能够实现间充质干细胞的高效分离扩增。

【技术实现步骤摘要】
一种培养基底的修饰方法及间充质干细胞分离扩增方法
本专利技术属于领域，具体涉及一种培养基底的修饰方法及使用该方法的间充质干细胞分离扩增方法。
技术介绍
干细胞是指生物体内能够进行自我更新，并维持机体各组织细胞新陈代谢的一群细胞。同时，在生物体内各种组织受到内源或外源性的损害时，干细胞可以被激活执行分化功能，从而达到修复该组织的目的。间充质干细胞在适当的条件下，具有强大的增值能力和分化能力，能够修复多种组织损伤，包括骨骼，肌肉，神经等组织，因此，间充质干细胞在再生医学治疗领域引起了越来越多的重视。骨髓当中含有丰富的间充质干细胞，因此得到了最为广泛和深入的研究。研究证实，骨髓间充质干细胞表达特定的表面抗原表型，比如，CD45-，CD34-，CD29+，CD90+，CD73+和CD105+。在体外和体内环境中可向骨骼，软骨，神经以及胰岛等细胞分化。另外，骨髓间充质干细胞具有免疫调节的功能，分泌多种免疫相关信号分子，从而在免疫性疾病治疗过程中发挥作用。但是，尽管骨髓间充质干细胞细胞较易分离和培养，但是，骨髓来源有限，难以满足临床大量的需求。即便是进行患者的自体移植，患者也必须承担额外的痛苦。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种培养基底的修饰方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将PEG和CYCLIC‑RGD溶于氯仿中，得到修饰液；B、将修饰液均匀涂抹在培养容器的内表面；C、回收培养容器内表面上修饰液中的氯仿，得到内表面覆盖有修饰层的培养容器。

【技术特征摘要】
1.一种培养基底的修饰方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将PEG和CYCLIC-RGD溶于氯仿中，得到修饰液；B、将修饰液均匀涂抹在培养容器的内表面；C、回收培养容器内表面上修饰液中的氯仿，得到内表面覆盖有修饰层的培养容器。2.根据权利要求1所述的修饰方法，其特征在于，步骤C中，将培养容器置于2-10℃的负压下36-60小时，以完成氯仿的回收。3.根据权利要求1所述的修饰方法，其特征在于，步骤C后还包括步骤D、向培养容器内加入磷酸盐缓冲液，在震荡下反应10-14小时，再使用磷酸盐缓冲液冲洗。4.根据权利要求3所述的修饰方法，其特征在于，步骤D中，向培养容器内加入磷酸盐缓冲液，在震荡下反应12小时，再使用磷酸盐缓冲液冲洗3次，并继续在震荡下反应24小时后，使用磷酸盐缓冲液冲洗3次。5.根据权利要求4所述的修饰方法，其特征在于，步骤D中使用的磷酸盐缓冲液为浓度为10mg/mL，pH值为8的磷酸盐缓冲液。6.根据权利要求3所述的修饰方法，其特征在于，步骤D之后还包括步骤E、将培养容器使用环氧乙烷进行消毒处理。7.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙博，
申请(专利权)人：北京雨泽瑞清生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11