原多甲藻的培养基与培养方法技术

本发明专利技术公开了一种原多甲藻培养基和培养方法，培养基包括下列重量的组分：NH4NO3，20‑100mg；CO(NH2)2(尿素)，20‑60mg；KH2PO4，1‑10mg；NaHCO3，100‑800mg；MnCl2·4H2O 15‑50g；FeC6H5O7·5H2O(柠檬酸铁)，10‑30mg；VB12，1×10‑5‑1×10‑3mg；VB1，50‑200mg；KCl，0.5‑5mg；Na2EDTA 10‑15g；壳寡糖0.2‑5g（分子量1500‑2000Da）海水1000mL。原多甲藻培养基的培养方法，包括如下步骤：第一阶段：三角烧瓶培养；第二阶段：矿泉水桶培养。本发明专利技术给出了原多甲藻培养的最适营养盐配方，可提高原多甲藻毒素产量并降低养殖成本。且采用矿泉水桶培养原多甲藻与传统的露天开放水泥池式扩大培养相比，成本低，不易污染，易于操作，大大降低了工作量，使原多甲藻生长速度大幅度提高，培养周期缩短。

Culture medium and culture method of primary dinoflagellate

The invention discloses a primary dinoflagellate culture medium and culture method, culture medium comprises the following components: NH4NO3, weight 20 100mg; CO (NH2) 2 (urea), 20 KH2PO4, 1 60mg; 10mg; NaHCO3100 800mg; MnCl2 4H2O 15 50g; FeC6H5O7 5H2O (ferric citrate), 10 30mg; VB12, 1 x 10 5 1 x 10 3mg; VB1, 50 KCl, 0.5 200mg; 5mg; Na2EDTA 10 15g; 0.2 5g chitosan (molecular weight 1500 2000Da) seawater 1000mL. The invention relates to a method for culturing the original dinoflagellate culture medium, which comprises the following steps: the first stage: the triangular flask culture; the second stage: the cultivation of the mineral water bucket. The present invention provides the optimum nutrient formula for the cultivation of the original dinoflagellate, which can increase the output of the original polysaccharide and reduce the breeding cost. And the use of mineral water bucket culture open open pool type cement raw Peridiniaceae and traditional culture expansion compared to low cost, easy pollution, easy operation, greatly reducing the workload, the dinoflagellate growth rate increased greatly, shorten the period of training.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种原多甲藻培养基配方及采用矿泉水桶充当容器的养殖方法。属于海洋微藻养殖领域。
技术介绍
贝类毒素因其强毒性和不可预见性等特点，对消费者健康安全和近海生态安全存在严重威胁，是近年来国际社会较为关注的生态灾害和重大海洋环境问题。氮杂螺环酸毒素（Azaspiracid，AZA）是现有的八大类贝类毒素中发现最晚但毒性最强的一类新型脂溶性贝类毒素，因其毒性强、残留高且代谢慢，成为欧盟、美国、加拿大等国家重点关注的对象，不仅将其限量标准设定为160µgAZA-1eq/kg（AZA1-3），数值普遍低于其他贝类毒素，且在国际贸易中重点加以监控。因此，原多甲藻酸贝类毒素的检测工作，已成为出口贸易和保障消费者安全必要保证。目前国际上标准物质制备方法多是将阳性贝类样品经过萃取纯化后制备而成的，存在的主要问题是样品来源不稳定，批次间存在较大差异；且所需阳性贝类样品量大，运输及提取加工前处理复杂。而以产毒藻为来源的毒素标准品制备，不仅能保障这一毒素的稳定来源，而且由于基质干扰少，是目前最好的标准品制备原料。本申请人于2016年4月8日申请保藏一种氮杂螺环酸毒素的产毒原多甲藻，保藏于中国典型本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种原多甲藻培养基，其特征在于，包括下列重量的组分：NH4NO3，20‑100mg；CO(NH2)2(尿素)，20‑60mg；KH2PO4，1‑10mg；碳酸氢盐，100‑800mg；MnCl2·4H2O，15‑50g； FeC6H5O7·5H2O(柠檬酸铁)，10‑30mg；VB12，1×10‑5‑1×10‑3mg；VB1，50‑200mg；KCl，0.5‑5mg；Na2EDTA 10‑15g；壳寡糖0.2‑5g（分子量1500‑2000Da）海水1000mL。

【技术特征摘要】
1.一种原多甲藻培养基，其特征在于，包括下列重量的组分：NH4NO3，20-100mg；CO(NH2)2(尿素)，20-60mg；KH2PO4，1-10mg；碳酸氢盐，100-800mg；MnCl2·4H2O，15-50g；FeC6H5O7·5H2O(柠檬酸铁)，10-30mg；VB12，1×10-5-1×10-3mg；VB1，50-200mg；KCl，0.5-5mg；Na2EDTA10-15g；壳寡糖0.2-5g（分子量1500-2000Da）海水1000mL。2.根据权利要求1所述的原多甲藻培养基，其特征在于，包括下列重量的组分：NH4NO3，30mg；CO(NH2)2(尿素)，40mg；KH2PO4，5mg；碳酸氢盐，500mg；MnCl2·4H2O26g、FeC6H5O7·5H2O(柠檬酸铁)20g；VB12，1×10-4mg；VB1，100mg；KCl，3mg；Na2EDTA12.4g，壳寡糖1g（分子量1500-2000Da），海水1000mL。3.根据权利要求1或2所述的原多甲藻培养基，其特征在于，所述的碳酸氢盐选自碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸氢钙、碳酸氢铵中的一种或多种的组合。4.根据权利要求1或2所述的原多甲藻培养基，其特征在于，所述的碳酸氢盐选自碳酸氢钠。5.原多甲藻培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将海水灭菌待用；2)按照权利要求1中的培养基配方中的顺序和剂量依次加入到灭菌的海水中，加入后再充分搅5分钟，即可接种使用。6...

【专利技术属性】
技术研发人员：王磊，吴海燕，李清云，谭志军，彭吉星，郭萌萌，翟毓秀，
申请(专利权)人：青岛科技大学，中国水产科学研究院黄海水产研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37