一种丝棉木组织培养的培养基及方法技术

本发明专利技术涉及组织培养技术领域，尤其涉及一种丝棉木组织培养的培养基及方法。本发明专利技术提供了适用于丝棉木新品种金枝玉叶的组织培养培养基，以1/2MS培养基为基础，添加KT、NAA、TDZ和赤霉素进行愈伤组织的诱导，以MS培养基为基础，添加KT和TDZ进行丛生芽的诱导，以WPM培养基作为炼苗培养基。在本发明专利技术提供培养基的诱导下，经诱导可使增值系数提高至9.72，幼苗成活率可达93％。

Culture medium and method for tissue culture of Euonymus bungeanus

The present invention relates to tissue culture technology field, particularly relates to a culture medium and a method of culturing tissue of Euonymus bungeanus. The present invention provides a medium suitable to build new varieties of descendants of royal families of tissue culture on the basis of 1/2MS medium, adding KT, NAA, TDZ induced by gibberellin and callus, on the basis of MS medium supplemented with KT and TDZ for bud induction, as seedling medium in WPM. Under the induction of the culture medium, the increment coefficient can be increased to 9.72, and the seedling survival rate can reach to 93%.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组织培养
，尤其涉及一种丝棉木组织培养的培养基及方法。
技术介绍
金枝玉叶(EuonymusmaackiiRupr.‘JinzhiYuye’)，是2003年张家勋、张丹同志在经过辐照后的丝棉木(Euonymusmaackii)籽播苗中，发现的变异品种，经过3年的提纯、试种、改良和观察，现在变异品种的性状均已稳定。主要性状为：春、夏、秋三季枝条、叶片均为金黄色，经霜后枝条和叶片变为红色，落叶后枝条颜色越发鲜红，天气越冷颜色越红。其他习性与普通丝棉木一致。喜光，稍耐荫；耐寒，对土壤要求不严，耐干旱，也耐水湿，而以肥沃、湿润而排水良好之土壤生长最好。根系深而发达，能抗风；根蘖萌发力强。是一种优良的观叶观枝树种，可用于园林绿化，及庭院观赏树种，观赏价值高且容易养护。繁殖可用播种、嫁接等方法。播种时间在3月中下旬至4月中上旬。采用条播，用犁开沟，沟深3至5厘米，行宽20至25厘米。将种子均匀撒入沟内，覆土厚度约1厘米，覆土后适当镇压。墒情适宜条件下20天左右出苗。嫁接一般在夏季进行，在温度高于30℃时，天气晴朗的时候，阴雨天会降低嫁接成活率。多采用芽接，选择生长健壮的芽，砧木选取丝绵木，在丝绵木树皮上划开‘T’型接口，将芽体接入，用塑胶条缠好。播种繁殖的成活率高，但是成苗较慢，嫁接成苗较快，但是需要较多的人工，对人工技术要求较高、受季节影响较大。为了保持母本的优良性状，且达到快速繁殖的目的，利用组培技术来实现金枝玉叶的快速繁殖。但是目前并没有适用于金枝玉叶组织培养的培养基。因此，研发一种可提高金枝玉叶外植体增殖系数、丛生芽个数及生根率的组织培养的培养基具有重要的现实意义。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种丝棉木组织培养的培养基及方法，该培养基可提高金枝玉叶的外植体增殖系数、丛生芽个数及生根率。本专利技术提供了一种诱导丝棉木丛生芽的培养基，其为含有0.5mg/L～1.0mg/LKT、0.05mg/LNAA、0.1mg/L～0.5mg/LTDZ、0.01mg/L赤霉素、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.85。本专利技术提供了一种诱导丝棉木丛生芽生根的培养基，其为含有0.1mg/L～0.5mg/LKT、0.03mg/LTDZ、10g/L～30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.80。本专利技术提供了一种丝棉木组培苗炼苗的培养基，其为含有20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基，pH值为5.80。MS培养基是适用于植物组织培养的培养基，其配方为NH4NO31.65g/L、KNO31.9g/L、CaCl2·2H2O0.44g/L、MgSO4·7H2O0.37g/L、KH2PO40.17g/L、KI0.83mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L、CoCl2·6H2O0.025mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2-EDTA·2H2O37.3mg/L、肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇(维生素B6)0.5mg/L、盐酸硫胺素(维生素B1)0.1mg/L、甘氨酸2mg/L，pH值为5.80。1/2MS培养基是将MS培养基中大量元素、微量元素、有机物质、铁盐减半而蔗糖、琼脂量不变的培养基，其配方为：NH4NO30.825g/L、KNO30.95g/L、CaCl2·2H2O0.22g/L、MgSO4·7H2O0.185g/L、KH2PO40.085g/L、KI0.415mg/L、H3BO33.1mg/L、MnSO4·4H2O11.15mg/L、ZnSO4·7H2O4.3mg/L、Na2MoO4·2H2O0.125mg/L、CuSO4·5H2O0.0125mg/L、CoCl2·6H2O0.0125mg/L、FeSO4·7H2O13.9mg/L、Na2-EDTA·2H2O18.65mg/L、肌醇50mg/L、烟酸0.25mg/L、盐酸吡哆醇(维生素B6)0.25mg/L、盐酸硫胺素(维生素B1)0.05mg/L、甘氨酸1mg/L，pH值为5.85。WPM培养基是适用于木本植物的培养基，其配方为K2SO40.99g/L、MgSO4·7H2O0.37g/L、KH2PO40.17g/L、NH4NO30.4g/L、MnSO4·4H2O22.5mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、H3BO36.2mg/L、CuSO4·5H2O0.25mg/L、Na2MoO4·2H2O0.25mg/L、Ca(NO3)2·4H2O0.556g/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、维生素B60.5mg/L、维生素B10.1mg/L、维生素B50.5mg/L，pH值为5.80。激动素(Kinetin，KT)是一种非天然的细胞分裂素，化学名称为6-糖基氨基嘌呤(或N6-呋喃甲基腺嘌呤)，除具有促进细胞分裂的作用外，还具有延缓离体叶片和切花衰老，诱导芽分化和发育及增加气孔开度的作用。萘乙酸(1-Naphthylaceticacid，NAA)，是广谱型植物生长调节剂，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加座果，防止落果，改变雌、雄花比率等。可经叶片、树枝的嫩表皮，种子进入到植株内，随营养流输导到全株。塞苯隆(thidiazuron，TDZ)，是一种新型高效的细胞分裂素用于组培能更好的促进植物的芽分化。赤霉素(gibberellin，GA)，是广泛存在的植物激素。化学结构属于二萜类酸，由四环骨架衍生而得。赤霉素种类至少38种，应用于农业生产，可刺激叶和芽的生长，提高产量。本专利技术采用的是GA3。本专利技术将上述4种激素以特定比例添加到基础培养基中，制得诱导丝棉木丛生芽的培养基、诱导丝棉木丛生芽生根的培养基和丝棉木组培苗炼苗的培养基，对金枝玉叶外植体进行组织培养时，可显著提高金枝玉叶的增殖系数、丛生芽发生率及生根率，效果好于现有报道的培养基种类。一些实施例中，本专利技术提供了一种诱导丝棉木丛生芽的培养基，其为含有0.5mg/LKT、0.05mg/LNAA、0.1mg/LTDZ、0.01mg/L赤霉素、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.85。另一些实施例中，本专利技术提供了一种诱导丝棉木丛生芽的培养基，其为含有0.75mg/LKT、0.05mg/LNAA、0.3mg/LTDZ、0.01mg/L赤霉素、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.85。另一些实施例中，本专利技术提供了一种诱导丝棉木丛生芽的培养基，其为含有1mg/LKT、0.05mg/LNAA、0.5mg/LTDZ、0.01mg/L赤霉素、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.85。另一些实施例中，本专利技术提供了一种诱导丝棉木丛生芽的培养基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导丝棉木丛生芽的培养基，其特征在于，其为含有0.5mg/L～1.0mg/L KT、0.05mg/L NAA、0.1mg/L～0.5mg/L TDZ、0.01mg/L赤霉素、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.85。

【技术特征摘要】
1.一种诱导丝棉木丛生芽的培养基，其特征在于，其为含有0.5mg/L～1.0mg/LKT、0.05mg/LNAA、0.1mg/L～0.5mg/LTDZ、0.01mg/L赤霉素、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基，pH值为5.85。2.一种诱导丝棉木丛生芽生根的培养基，其特征在于，其为含有0.1mg/L～0.5mg/LKT、0.03mg/LTDZ、10g/L～30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.80。3.一种丝棉木组培苗炼苗的培养基，其特征在于，其为含有20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基，pH值为5.80。4.根据权利要求1～3任一项所述的培养基，其特征在于，所述丝棉木的品种为金枝玉叶。5.一种丝棉木的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：将丝棉木外植体接种到权利要求1所述诱导丝棉木丛生芽的培养基，培养至产生愈伤组织；步骤2：所述愈伤组织接种至权利要求2所述的诱导丝棉木丛生芽生根的培养基，培养至分化出小苗；步骤3：所述小苗转接到权利要求3所述的丝棉木组培苗炼苗培养基，培养后，经室外炼苗，得到丝棉木幼苗；所述丝棉木的品种为金枝玉叶。6.根据权利要求5所述的组织培...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丹，张茂，孟伟芳，何甜甜，王东超，
申请(专利权)人：河南红枫种苗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41