一种白木香愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法技术

本发明专利技术涉及一种白木香愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法，该方法以白木香无菌苗的幼嫩茎段作为外植体诱导愈伤组织的产生，并将其进行悬浮培养，建立了稳定的白木香愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法，所得到的白木香悬浮细胞的生长曲线符合一般悬浮细胞的生长情况，呈“S”型曲线，细胞的生长速度较快，在生长适应期的平均生长速度为0.041g/d，在对数期的平均生长速度达到1.118g/d，且细胞活力较强，为实现利用白木香悬浮细胞培养体系生产沉香倍半萜奠定了基础，有利于维持白木香可持续开发和利用。

Method for culturing cell suspension system of callus of white wood

The invention relates to a method for cultivation of Aquilaria sinensis callus cell suspension system, the young stems of Aquilaria sinensis seedlings were used as explants to induce callus production, and its suspension culture, established the culture method of stability of Aquilaria sinensis callus suspension cells, the growth curve of aquilariasinensis cell suspension the general situation in line with the growth of suspension cells, showed \S\ curve, the growth rate of the rapid growth in the cell, adapt to the average growth rate period was 0.041g/d, the average growth rate reached 1.118g/d in the logarithmic phase, and the cells have strong vitality, laid the foundation for the realization of the production system of agarwood sesquiterpene by white woody cell suspension culture, is conducive to maintaining the sustainable development and utilization of aquilariasinensis.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及一种白木香愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法。
技术介绍
白木香为瑞香科沉香属多年生常绿木本药用及香料植物，是我国沉香药材唯一的资源植物。其含黑棕色树脂的心材可加工成国产沉香，具有重要的药用价值以及商业价值。因白木香的自然繁殖率低，生存环境遭到破坏，虫害及人为掠夺式砍伐等原因，其野生资源锐减，现已列入国家珍稀濒危三级保护植物及国家二级重点保护野生植物。植物细胞培养是将植物活体组织或离体组织培养物如愈伤组织、多芽体等转移到合适的液体培养基中，并在特定转速的摇床震荡悬浮培养，经过一定周期的继代培养形成稳定均一的悬浮细胞系。理想的悬浮细胞体系为悬浮培养物易分散，多数为4～6个细胞团，细胞大小均一，形态一致，细胞颜色呈淡黄白色，培养基清澈透亮；细胞生长快速，生长周期呈“S”型。植物悬浮细胞具备以上的特征可易于诱导其生产次生代谢产物质。可见植物悬浮细胞体系的建立是非常具有应用前景和实用价值的生物工程手段之一。近年来，药用植物悬浮细胞培养在国内外报道的越来越多，主要从植物悬浮细胞诱导其次生代谢产物的产生展开研究，故植物悬浮细胞的培养方法极其重要，白木香悬浮细胞体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白木香愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)愈伤组织的诱导培养：取0.6～0.8cm白木香无菌苗的幼嫩茎段接种于MS+1.0～1.2mg/L 6‑BA+2.2～2.5mg/L 2,4‑D+5g/L琼脂+30g/L蔗糖的固体培养基中进行愈伤组织的诱导，至第34～36天诱导产生愈伤组织，转移到相同培养基培养43～45天，此为第一代愈伤组织，继续在相同的培养基继代培养38～40天，此为第二代愈伤组织，依次培养至第三代，继代培养时间为119～125天，可获得疏松的浅黄白色的愈伤组织；(2)细胞悬浮培养：取步骤(1)获得的疏松浅黄白色愈伤组织4.0～4.2g，用已灭菌的镊子...

【技术特征摘要】
1.一种白木香愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)愈伤组织的诱导培养：取0.6～0.8cm白木香无菌苗的幼嫩茎段接种于MS+1.0～1.2mg/L6-BA+2.2～2.5mg/L2,4-D+5g/L琼脂+30g/L蔗糖的固体培养基中进行愈伤组织的诱导，至第34～36天诱导产生愈伤组织，转移到相同培养基培养43～45天，此为第一代愈伤组织，继续在相同的培养基继代培养38～40天，此为第二代愈伤组织，依次培养至第三代，继代培养时间为119～125天，可获得疏松的浅黄白色的愈伤组织；(2)细胞悬浮培养：取步骤(1)获得的疏松浅黄白色愈伤组织4.0～4.2g，用已灭菌的镊子将其分割成绿豆大小，接种至含40ml液体培养基的100ml锥形瓶中，于25±1℃的恒温摇床上，135rpm，10～12h光照，10～12h黑暗条件下进行悬浮培养；(3)细胞继代培养：步骤(2)中的愈伤组织在液体培养基上进行悬浮培养12～14天后，用50...

【专利技术属性】
技术研发人员：李明，吴燕燕，董伞，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44