一种茶树花原生质体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种茶树花原生质体及其制备方法和应用。是将茶树花置于消化酶液中经酶解消化后得到茶树花原生质体。本发明专利技术通过调整消化酶液配方体系，可以将茶树花100％彻底降解，并获得大量未破损的茶树花原生质体。同时，外源基因转化茶树花原生质体后得到的表达率可达30％以上，与模式植物拟南芥中的平均表达水平一致。本发明专利技术对今后茶树基因功能验证乃至亚细胞定位以及代谢产物检测提供了更直接的证据，比在拟南芥和烟草等模式植物中验证更有针对性；而且，与长达一周以上的农杆菌注射烟草或组培茶苗的瞬时表达实验相比，该方法所需的设备材料简单，且快速有效，两天即可看到实验结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞生物
，具体涉及一种茶树花原生质体及其制备方法和应用。
技术介绍
茶叶是中国乃至世界的主要饮料，其之所以能成为中国人千百年以来筛选出来的主要饮品，成为生活七件事之一，是因为茶叶中含有多种功能成分，可以促进人体代谢活力、提高免疫力、生津活血、凝神静思，现代科学又发现其具有抗癌、抗炎、降血糖、降血脂等诸多功效。茶叶具有如此之多的功效物质，但目前对其研究尚浅，这些物质的代谢及其调控机制仍不明确，这一方面是有由于这些物质是茶叶中特有的物质，没有模式植物可以借鉴，另一方面，也正是由于该物种的特异性，想要确定某个蛋白基因的功能，没有很好的表达体系去验证，很多机制由于拟南芥或烟草中没有相关的代谢通路，无法得到验证；而且茶叶是木本植物，其转基因技术和组培技术的发展也颇具难度，因此，开发茶树原生质体分离和表达的技术，是一个重要的突破方向。目前有一些木本植物叶子的原生质体分离技术可以借鉴，如苹果、橙子等，然而茶树的叶子由于纤维素和多酚等含量高，难以得到大量状态好的原生质体用于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种茶树花原生质体的制备方法，其特征在于，是将茶树花置于消化酶液中经酶解消化后得到茶树花原生质体。

【技术特征摘要】
1.一种茶树花原生质体的制备方法，其特征在于，是将茶树花置于消化酶液中经酶解消化
后得到茶树花原生质体。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的消化酶液配方为：每10ml含有
MES0.039g、甘露醇1.6g、KCl0.0149g、纤维素酶0.15g、离析酶0.04g、果胶酶0.01g
和CaCl20.0148g...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨子银，梅鑫，周瀛，傅秀敏，
申请(专利权)人：中国科学院华南植物园，
类型：发明
国别省市：广东;44