一种旋轮虫的培养基及培养方法技术

本发明专利技术涉及一种旋轮虫培养基及培养方法，该培养基由无机盐培养液、饵料及营养强化剂组成，每100ml无机盐培养液中添加3~5mL的饵料和0.5~1.5mL的营养强化剂；所述的饵料为螺旋藻饵料；所述的营养强化剂为牛奶。本发明专利技术所述的螺旋藻经超声波粉碎后的粒径大小适于旋轮虫摄食，可提高饵料的利用率；所述旋轮虫营养强化剂为牛奶，可为旋轮虫提供生长所必需的营养物质和促进旋轮虫的生长的生物活性物质，使旋轮虫的密度达到2000~3500ind/ml。本发明专利技术具有操作简便、费用省、效果好的特点。

Culture medium and culture method of rotary rotifer

The invention relates to a rotary rotifer culture medium and culture method, the culture medium by inorganic salt medium, food and nutritional supplements, nutritional supplements and food 0.5~1.5mL add 3~5mL solution per 100ml inorganic salt culture; the bait for spirulina food; the nutritional supplements for milk. The invention of Spirulina by ultrasonic crushing particle size for philodina feeding, can improve the utilization of food; the philodina nutritional supplements for milk, can provide nutrients necessary for growth and promotion of active substances for the growth of philodina philodina, the philodina density reached 2000~3500ind/ml. The invention has the advantages of simple operation, low cost and good effect.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于污水生物处理的旋轮虫的培养基及培养方法。
技术介绍
旋轮虫是一种营附着生活、以游离的细菌、藻类等颗粒为食的轮虫。在污水生物处理系统中旋轮虫是一种常见的有益生物，对减少污水中的悬浮固体、提高处理水的澄清度有很大贡献。因此，在污水生物处理系统中可以通过投加人工培养的旋轮虫来提高污水生物处理性能。为了有效地促进轮虫的生长，可以在培养过程中添加活性物质或营养物质。例如：在宿轮虫培养液中添加一定量的蜂蜜残渣，可增加宿轮虫的寿命和生育力（国家专利技术专利200810203971.0），此方法效果好，但需要有充分的蜂蜜残渣来源并对蜂蜜残渣进行适当的处理；在培养褶皱臂尾轮虫中，添加富含PUFA的鱼油，可增强褶皱臂尾轮虫的存活率（上海海洋大学学报，2009年18卷第五期），但鱼油费用较高，培养成本增大；在微绿球藻中添加甲基睾丸酮10~30μg/L，可提高淡水轮虫的快速便捷生产（国家专利技术专利201110315587.1），不过甲基睾丸酮作为一种激素，使用不当会产生二次污染且成本较高。螺旋藻中富含维生素、氨基酸、矿物元素等营养物质常用作为培养浮游型轮虫的饵料。但旋轮虫是一种营附着生长的附着型轮虫，与浮游型轮虫相比，所摄食的颗粒物粒径通常较小，在0.2~3μm间；而螺旋藻细胞体长200~500μm，宽5~10μm，远远大于旋轮虫可摄食的粒径范围。因此，螺旋藻若未经粉碎处理将因其粒径过大而难以被旋轮虫所摄食。专利
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种配制方法简便、费用低且营养丰富的旋轮虫培养基，以及可操作性强、能够高效地实现旋轮虫大量培养的方法。本专利技术的目的之二在于提供使用该培养基进行旋轮虫大量培养的方法。为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种旋轮虫培养基，其特征在于该培养基由无机盐培养液、饵料及营养强化剂组成，每100ml无机盐培养液中添加3~5mL的饵料和0.5~1.5mL的营养强化剂；所述的饵料为螺旋藻饵料；所述的营养强化剂为牛奶。上述的无机盐培养液为每1000ml水中含NaHCO30.096g、CaCO30.06g、MgSO4·7H2O0.06g以及KCl0.004g。上述的螺旋藻饵料是将螺旋藻进行超声波粉碎处理，处理条件为功率600~900W、粉碎时间20~30min，再将经粉碎后的螺旋藻悬浊液沉降5~10min后弃去沉淀物、取上部液体然后采用离心法浓缩处理，所得沉积物即为螺旋藻饵料。上述的牛奶为市售食品牛奶。一种旋轮虫的培养方法，采用上述的旋轮虫培养基进行培养，其特征在于该培养方法为：将旋轮虫接种于旋轮虫培养基，使旋轮虫的初始密度为10~200ind/mL；在25~30℃中静置培养3~5天，然后再置于温度为28~32℃、转速为10~20r/min的条件下振荡培养5~10天，使旋轮虫的密度达到2000~3500ind/ml。本专利技术提供的旋轮虫培养基的成分简单、配制方法简易，旋轮虫培养基中作为旋轮虫饵料的粒径大小符合旋轮虫的摄食范围，可提高饵料的利用率，作为营养强化剂的使用牛奶来源广泛、富含可促进旋轮虫生长的EPA、DHA和ARA等高不饱和脂肪酸(HUFAs)等物质。本专利技术提供的旋轮虫培养方法为旋轮虫提供了适宜的生长的环境，缩短了培养周期，并能实现旋轮虫的大量培养。采用本专利技术大量培养的旋轮虫可被投入污水生物处理反应器中以提高污水生物处理性能。附图说明图1为不同的培养基下旋轮虫的种群密度比较图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步的描述。1.材料准备（1）旋轮虫：实验所用旋轮虫分离自上海市某污水厂的活性污泥（2）无机盐培养液：NaHCO30.096g、CaCO30.06g、MgSO4·7H2O0.06g、KCl0.004g及去自来水1000mL，煮沸并灭菌。（3）饵料：选取处于对数增长期的螺旋藻，采用超声波细胞粉碎机对螺旋藻进行粉碎处理，超声波处理条件为功率800W、粉碎时间30min，将超声波处理过的螺旋藻悬浊液沉降10min后弃去沉淀物、取上部液体并进行离心处理，弃去离心管中的上清液后的残留物即为螺旋藻饵料。（4）营养强化剂：市售牛奶。2.仪器和设备CHA-S气浴恒温振荡器（江苏金坛市江南仪器厂）；QHX-300BS-Ⅲ型人工气候箱（上海新苗医疗器械制造有限公司）；SYQ-DSX-280B手提式不锈钢压力蒸汽灭菌锅（上海申安医疗器械厂）；JY92-IIN型超声波细胞破碎机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；37XB型倒置生物显微镜（上海光学仪器五厂）；5804R型高速冷冻离心机（上海飞鸽仪器有限公司）AL204型分析天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；移液器（范围100~1000mL，20~200mL，0.5~10mL）（加拿大BBI公司）；78HW-1恒温磁力搅拌器（江苏省金坛市江南仪器厂）3.培养效果评价设置A、B、C、D四个实验组，每组设三个平行。A组（对照组）培养基只含有100ml的无机盐培养液；B组培养基在无机盐培养液的基础上添加5mL未粉碎的螺旋藻饵料；C组培养基在无机盐培养液的基础上添加5mL粉碎后的螺旋藻饵料；D组培养基在无机盐培养液的基础上添加5mL粉碎后的螺旋藻饵料和1mL营养强化剂牛奶。A、B、C、D四个实验组的培养方法均采用如下的培养步骤：用200μL移液枪随机从续代培养且经过去离子水清洗过的旋轮虫中，吸取1000个旋轮虫移入含有培养基的锥形瓶中，使旋轮虫的初始密度达10ind/mL；将四个实验组接种有旋轮虫的锥形瓶均置于同一的恒温光照培养箱中30℃下培养5天，再置于转速为20r/min的恒温震荡箱中30℃下培养10天。培养过程中，每24小时在显微镜下观察各组旋轮虫的生长状况并对活的旋轮虫进行计数。图1显示了A、B、C、D四个实验组中经过5天静置培养和10天振荡培养后的旋轮虫的种群密度。由图可知，本实施例中实验组D的旋轮虫的种群密度均高于其他A、B、C实验组，显示了采用粉碎后的螺旋藻做饵料和牛奶作为营养强化剂均能有效地促进旋轮虫生长。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种旋轮虫培养基，其特征在于该培养基由无机盐培养液、饵料及营养强化剂组成，每100ml无机盐培养液中添加3~5mL的饵料和0.5~1.5mL的营养强化剂；所述的饵料为螺旋藻饵料；所述的营养强化剂为牛奶。

【技术特征摘要】
1.一种旋轮虫培养基，其特征在于该培养基由无机盐培养液、饵料及营养强化剂组成，
每100ml无机盐培养液中添加3~5mL的饵料和0.5~1.5mL的营养强化剂；所述的饵料为螺旋
藻饵料；所述的营养强化剂为牛奶。
2.根据权利要求1所述的旋轮虫培养基，其特征在于所述的无机盐培养液为每1000ml
水中含NaHCO30.096g、CaCO30.06g、MgSO4·7H2O0.06g以及KCl0.004g。
3.根据权利要求1所述的旋轮虫培养基，其特征在于所述的螺旋藻饵料是将螺旋藻进
行超声波粉碎处理，处理条件为功率600~900W、粉碎时间20~30min，再...

【专利技术属性】
技术研发人员：林玮，丁国际，胡梦楠，崔海涛，黄攀攀，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：上海;31