重组人白细胞介素-1受体拮抗剂的药物用途制造技术

本发明专利技术公开了重组人白细胞介素－１受体拮抗剂在治疗眼部疾病中的药物用途，并提供了一种用于治疗眼病的药物制剂，可以代替激素治疗例如眼表面非感染性炎症、抑制角膜新生血管生成、防止角膜移植后排异反应。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)在制药领域中的新用途，尤其涉及在治疗眼科疾病中的用途。
技术介绍
重组白细胞介素-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)是存在于人体的蛋白质类细胞因子受体拮抗剂，分子量17KD，通过结合白细胞介素-1受体(I型和II型)，特异性地封闭IL-1的活性。1990年，美国Synergen公司的Eisenberg等人在英国Nature杂志首次报道了全长cDNA序列，(Nature1990；343341-346)。IL-1在机体的炎症反应中起着极为关键的启动作用。人类许多疾病的发生、发展过程中都有IL-1参与，IL-1本身不仅可以趋化体内的炎性反应细胞聚集至炎症发生部位，还可刺激体内的多种炎症介导介质的产生，而使炎症反应进一步加剧。因此，如何消除IL-1的影响将对治愈某些炎症疾病起着重要作用。IL-1ra是体内自然存在的IL-1拮抗剂。它可以特异地与细胞表面的IL-1受体结合而不激活靶细胞，从而阻断IL-1的生物学活性。IL-1ra是迄今为止发现的唯一细胞因子拮抗剂。自从IL-1ra被发现以来，人们就试图将其开发为可供临床应用的药品，大量基础研究和初步临床研究结果显示IL-1ra对人类的许多炎性疾病确有疗效。此类报道更激起了人们对IL-1ra成为新药的企盼。90年代初期，Arend等成功地克隆出人IL-1ra cDNA，为使用基因重组手段大规模制备rhIL-1ra成为可能。近十年来，人类在对rhIL-1ra更为全面深入了解基础上，对rhIL-1ra的临床应用进行了全面开发。研究结果表明，rhIL-1ra将有可能用于治疗类风湿性关节炎、移植排异反应、移植物抗宿主反应、哮喘、牛皮癣等疾病。早在1996年，美国就开始了rhIL-1ra治疗类风湿性关节炎的临床研究。经过5年多的大规模、多中心、随机双盲、安慰剂对照的临床研究，结果表明，以rhIL-1ra 75-150mg的剂量治疗6个月，类风湿性关节炎病人的临床症状和影象学征象均有明显改善。2001年报11月，美国FDA正式批准rhIL-1ra作为新药投入市场。而在我国虽然早在90年代初期就已完成rhIL-1ra表达载体的构建，但至今尚未产业化。据国家有关部门统计，我国每年约有1460万人患眼表非感染性炎症，占眼科门诊病人的1/3，致盲率为0.34％，约400-500万人；沙眼、角膜病和眼外伤这三类疾病致盲人口达200万人，导致视力下降的人口约300万人以上。有资料表明，近年来角膜疾病致盲率呈逐年上升趋势，主要原因是皮质类激素和抗生素的广泛应用和滥用所致。绝大多数病人都伴有因角膜局部修复过程中，新生血管长入角膜而导致视力下降，如果早期可以应用恰当的药物加以治疗，就可以防止视力下降或致盲。糖皮质激素曾是治疗非感染性眼炎药物的惟一选择。该药药效虽强，但其所产生的不良反应也很严重，尤其是它们能增高眼内压，对青光眼和眼压过高的患者仍为禁忌；对于双氯芬酸等非甾体抗炎药本身也有很多不良反应，尤其是对眼睛的刺激作用，且其抗炎效力也比糖皮质激素要低得多。因此，研究开发理想的眼炎药物成为很重要的课题。
技术实现思路
目前已发现IL-1ra可以特异性地与IL-1受体结合，阻断IL-1的生物学活性，因此在有IL-1参与的炎性疾病的发生，发展过程中，IL-1ra都可能发挥其治疗作用。所以，本专利技术人通过大量的实验，证明了重组人白细胞介素-1受体拮抗剂在治疗眼部疾病中能够发挥效果，进而为重组人白细胞介素-1受体拮抗剂找到了新适应症。在上述发现的基础上，本专利技术还提供了一种以rhIL-1ra为主要活性成分的药物组合物，它用于眼部疾病的治疗，实验证明它可以代替激素治疗例如眼表面非感染性炎症、抑制角膜新生血管生成、防止角膜移植后排异反应。根据本专利技术提出的重组人白细胞介素-1受体拮抗剂在制备治疗眼部疾病的药物中的用途，所述眼部疾病包括眼表非感染性炎症和感染性炎症，例如沙眼、角膜病和眼外伤，尤其是用于治疗眼表面非感染性炎症、角膜移植后排异反应和抑制角膜新生血管等。根据本专利技术的另一方面，提供了一种治疗眼部疾病有效的药物，即一种含有治疗有效量的重组人白细胞介素-1受体拮抗剂和药剂学上可接受的辅剂的药物组合物。用于述治疗眼部疾病，本专利技术提供的药物优选为滴眼剂，其每1000毫升中包括缓冲物90-120克、甘露醇50-70克、人血白蛋白0.5-2克、重组人白细胞介素-1受体拮抗剂40-70毫克、和余量注射用水。其中，所述缓冲物包括氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾和氯化钾。如前面所述，本专利技术提供的治疗眼部疾病的药物物中，活性成分为rhIL-1ra为以基因重组技术所制备出的蛋白质，其编码基因源自人外周血淋巴细胞cDNA文库。成熟分子由153个氨基酸组成，分子量为17-20KD，等电点pI＝5.2-5.4，rhIL-1ra水溶性较好，在pH7.0缓冲液中稳定。由于rhIL-1ra能特异地与IL-1受体结合，从而阻断IL-1所介导的炎症过程，故可用于治疗多种非感染性炎性疾病。可以证明，rhIL-1ra可用于治疗非感染性外眼部炎症，抑制角膜新生血管形成和角膜移植后抗排异反应。根据本专利技术提供的药物，除rhIL-1ra作为主成分外，所选辅料均为体液中所含电解质和人体自有成份。根据本专利技术的滴眼剂，所含各种离、甘露醇及白蛋白，均可起到维持渗透压的作用。经测定，依据本专利技术提供的制剂的渗透压与人体体液渗透压相近(280-320mOsmol)。为减少对眼睛的刺激，本专利技术所选缓冲可维持本品的pH为7.0与人体体液pH值相同。作为蛋白类药物，需较长时间保持其生物学活性的稳定性，本专利技术加入少量人血白蛋白和甘露醇，以起到稳定rhIL-1ra空间构象，保护其生物学活性的作用，还可以用于调节药液的黏度和张力。本专利技术的组成中不含抑菌剂和抗氧剂，故，可用于外眼非感染性炎症和角膜移植。用于实现本专利技术目的的rhIL-1ra可以来自任何已知技术的不同制备过程，本专利技术没有特别限定，例如，一种重组人白介素-1受体拮抗剂上游构建过程可以简述如下1、从含有人白介素-1受体拮抗剂基因的基因文库中克隆出人白介素-1受体拮抗剂基因；2、将人白介素-1受体拮抗剂基因连接到适当的表达载体上；3、以表达载体转化(转染)宿主细胞；4、使带有人白介素-1受体拮抗剂基因表达载体的宿主细胞繁殖；(如以大肠杆菌为宿主细胞，此过程可通过发酵手段实现)。所以，本专利技术的实施为眼部疾病的治疗提供了新的有效药物来源，同时也拓宽了rhIL-1ra的应用领域。本专利技术的技术方案和应用效果通过以下实验和实施例进一步说明。药效学试验本专利技术人以日本大耳白兔及Wistar大鼠角膜损伤模型观察了rhIL-1ra的治疗效果，并与地塞米松(目前临床治疗眼表面损伤的常用药物)做了对照。结果表明，rhIL-1ra对日本大耳白兔及Wistar大鼠角膜受碱烧伤和激光烧伤有明显的治疗作用(1)角膜裂隙灯观察结果表明，rhIL-1ra能减轻角膜烧伤后充血、水肿等炎症反应；抑制角膜新生血管的形成。(2)病理组织学观察结果表明，rhIL-1ra可明显减轻角膜基质水肿，抑制炎性细胞浸润，并有利于角膜上皮细胞再生。(3)OD值测定结果表明，rhIL-1ra有利于角膜透光率的恢复本文档来自技高网...

【技术保护点】
重组人白细胞介素－１受体拮抗剂在制备治疗眼部疾病的药物中的用途。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马大龙，狄春辉，朱仁英，杨璐，韩普，
申请(专利权)人：北京北医联合生物工程公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]