一种重组人表皮生长因子复合生物制剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组人表皮生长因子复合生物制剂及其应用，本发明专利技术所提供的一种重组人表皮生长因子复合生物制剂，包括２－１０ｎｇ／ｍｌ重组人表皮生长因子；０－２０％胎牛血清；２－１０％Ｄ－葡萄糖；０μｇ－１０μｇ／ｍｌ胰岛素；０μｇ－５μｇ／ｍｌ氢化可的松；０－１００μｇ／ｍｌ氨苄青霉素和０－１００ＩＵ／ｍｌ硫酸链霉素，溶剂为多重蒸馏水。本发明专利技术的重组人表皮生长因子复合生物制剂可用于制备治疗溃疡、溃烂、创伤、烧伤的药物；还可以用于生产抗衰老的化妆品和美容产品，使皮肤保持娇嫩、皱纹减少、色斑黯淡甚至消失，皮肤最终有光泽有弹性；也可以用于制备治疗损伤性眼科疾病的药物。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生物制剂组合物及其应用，特别涉及一种重组人表皮生长因子复合生物制剂及其应用。
技术介绍
Cohen和Levi Montalcin于1960年，在小鼠颌下腺纯化神经生长因子NGF时发现，不含神经生长因子的一种组分注射到新生小鼠后可以引起眼睑早开，门齿早萌，毛发生长抑制以及生长迟缓。1962年Cohen报道了这种具有热稳定和酸稳定的蛋白，可以促进眼睑和门齿的发育。组织学研究表明，眼睑早开是由于表皮厚度和角质化的特征性增加引起的。皮肤或表皮组织块体外培养的研究证实该蛋白对表皮生长具有直接的作用，因此将其命名为表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)。经过数十年的研究，目前已经发现EGF是一个蛋白质家族。Brown研究小组通过随机研究显示，重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growthfactor，rhEGF)具有明显的促进创面愈合作用。Thornton研究小组以及其他研究小组研究发现rhEGF可以明显促进大鼠II度烧伤以及浅I度创面愈合(P＜0.01)，对供皮区也有促进愈合的作用(P＜0.01)；而且rhEGF的促进作用主要表现在创面愈合的后期。在创面愈合早期，表层的坏死组织紧覆于创面，使局部应用的rhEGF无法穿透而作用到残存的真皮层和皮肤附件的上皮细胞，只能待坏死组织溶解或脱落，创面出现明显的皮岛后才能发挥其促进生长作用。研究表明，在rhEGF临床使用期间，使用者的肝、肾功能及血常规等均未发现异常，全身和局部无过敏反应，未见毒副作用发生。局部使用rhEGF后创面渗出明显而且迅速减少，这可能与rhEGF促进上皮迅速再生等因素有关。EGF对多种上皮细胞具有促进其有丝分裂作用，同时还刺激各种间质细胞增值，包括角膜内皮细胞、肠胃粘膜细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞和软骨细胞，这就为整个表皮的生长提供了所需的基础物质。除了促增殖作用外，EGF还能促进某些细胞如角膜内皮细胞和血管内皮细胞的迁移，这对于创伤的修复是必要的。EGF可促进角膜及皮肤创面上皮细胞及胃肠粘膜溃疡创面的修复，促进表皮细胞增殖，并可通过刺激成纤维细胞和其他细胞的增殖，促进胶原的沉积。EGF在一定时期内可以非持续性地提高成纤维细胞的增殖的能力。EGF对真皮成纤维细胞的生长有极大地促进作用，促进了细胞周期蛋白Cyclin D1和CDk4的表达增强，细胞周期变短，增殖能力增强。Savage在1972年研究发现EGF可以促进角膜上皮增殖，很多学者采用角膜切口、角膜刮伤、角膜上皮切除以及碱烧伤等动物角膜损伤模型也证实这一点。另外，在一些角膜上皮的非营养不良性疾病中还发现EGF对角膜损伤的修复有较好的促进作用。Brown等人1989年对12例整形外科手术和烧伤病人进行皮肤移植后，使用EGF可以明显的促进创面愈合。除此之外，EGF还对胃溃疡有明显治疗作用。胃壁细胞、十二指肠粘膜上皮细胞上均有EGF受体。EGF由唾液直接进入消化道或由十二脂肠腺直接分泌于小肠而发挥对消化道粘膜的生物效应。EGF是一种重要的胃粘膜保护因子，通过与胃肠粘膜细胞上的特异性受体EGFR结合而发挥作用。胃液中EGF水平是溃疡愈合质量中再生粘膜功能成熟度评价的重要指标之一。动物实验表明，小鼠胃内灌注EGF可预防由阿斯匹林所诱发的胃溃疡，而且，外源性EGF可明显抑制药物引起的胃和十二指肠溃疡。已有研究表明，消化性溃疡患者胃液EGF含量比正常人明显降低，提示EGF的降低可能与胃溃疡的发生有一定的关系；胃溃疡愈合后其胃液EGF含量亦明显增高，表明EGF在溃疡愈合中可能起作用。目前，根据实验推测EGF参与消化性溃疡修复的可能机制是①激活鸟氨酸脱羧酶(ODC)，增加粘膜DNA合成；②抑制胃酸分泌；③促进胃粘膜粘液糖蛋白的合成和分泌；④增加胃粘膜血流量。在临床工作中可以通过动态监测胃液EGF含量来预测溃疡发生的可能性，同时在治疗过程中亦可以此来观察药物疗效。EGF是一种强有力的促细胞分裂、分化、增殖的因子，已知它对多种组织有促进增殖和刺激DNA合成的作用，通过作用于靶细胞膜上的特异性受体而发挥其促细胞生长的活性。体外研究表明，EGF能主动刺激皮肤上皮细胞和成纤维细胞的增殖、促进新生血管形成及核酸、蛋白质和羟脯氨酸的合成。动物试验证实，极微量的重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor，rhEGF)即能发挥作用，剂量增加反而因细胞膜上的EGF受体数目受到rhEGF“负调节”而减少影响其作用。有资料显示，EGF是通过细胞外基质(ECM)的改建而调控细胞的行为，或ECM的改建结果即是通过EGF的释放而启动了细胞表型的变化，ECM能分离EGF结合蛋白，即相关生长因子活性调控的理论。随着细胞生物学和分子生物学技术的进展，细胞因子在创伤修复过程中的作用正逐渐被人们所重视。胰岛素由胰岛β细胞分泌，胰岛素原含有86个氨基酸，分子量约6,000，胰岛素由51个氨基酸组成。不同动物其结构略有差异，但不影响其生理活性。胰岛素能促进细胞对葡萄糖、氨基酸和离子的摄取，增强细胞内酪氨酸和色氨酸的磷酸化作用，调整调节酶的活性，刺激或抑制特异性基因的转录以及促进细胞的生长。局部使用可以促进伤口愈合，防止疤痕的形成和挛缩。氢化可的松是由肾上腺皮质分泌的一种糖皮质激素，调节全身的糖、水、盐代谢，临床上使用可以抗炎症、抗过敏、抗毒等。氢化可的松能增加多种抗炎分子蛋白合成，如SLPT，促进炎症减轻或消失。另外，氢化可的松还可以通过抑制自由基的生成来减轻自由基对细胞的攻击。一些学者发现血管源性水肿与周围细胞外间质氧自由基清除程度密切相关，而氢化可的松是氧自由基非酶类清除剂，可直接清除OH2与LOO-等自由基。氢化可的松分子疏水基团嵌入膜双分子疏水区多不饱和脂肪酸拱道中，使磷脂双分子结合紧密，粘性增加，并阻断花生四烯酸从细胞膜释放，从而减轻氧自由基的攻击。同时，氢化可的松不仅在富含磷脂环境中抑制铁催化的脂质过氧化反应，在无膜成份参与下也可抑制该反应。氢化可的松经其受体介导使脂皮素及巨皮素合成及释放增加，抑制磷酸二脂酶活性，从而阻断及抑制前列腺素级联反应，减少氧自由基及TXA2、白三烯以及PG的生成和释放，从而降低血管通透性。氢化可的松可抑制巨噬细胞一氧化氮合成酶活性，减少巨噬细胞-NO及氧自由基的生成。在生物制剂中与其他成分联合使用可以不仅促进溃烂处组织的快速修复，还保护新生组织不受自由基的攻击和破坏。人类长期罹患静脉曲张、静脉炎、静脉血栓症等静脉疾病，类风湿关节炎和糖尿病，导致机体或局部组织营养供给不足。疾病后期将不同程度地导致腿脚部皮肤溃疡/溃烂长期不愈的症状，这些患者大多数的预后为截肢。溃疡/溃烂是机体局部炎性坏死皮肤腐烂的结果。静脉曲张/静脉炎性溃疡/溃烂是由一种慢性的静脉机能不全造成的。下肢静脉曲张是外科常见病之一，患病率在各国差别很大。许多欧美国家的发病率高达20％-40％，热带非洲仅为01％。例如，在英国50岁以上的人群中，50％的人有轻微的静脉曲张症状，其中10％住院治疗。有5％的成年人不同程度地罹患慢性静脉机能不全；女性患病率高于男性。在中国，张培华等调查1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组人表皮生长因子复合生物制剂，包括２－３０ｎｇ／ｍｌ重组人表皮生长因子，２－１０％Ｄ－葡萄糖，０－２０％胎牛血清，０－１０μｇ／ｍｌ胰岛素，０－５μｇ／ｍｌ氢化可的松，０－１００μｇ／ｍｌ氨苄青霉素和０－１００ＩＵ／ｍｌ硫酸链霉素，溶剂为多重蒸馏水。

【技术特征摘要】
1.一种重组人表皮生长因子复合生物制剂，包括2-30ng/ml重组人表皮生长因子，2-10％ D-葡萄糖，0-20％胎牛血清，0-10μg/ml胰岛素，0-5μg/ml氢化可的松，0-100μg/ml氨苄青霉素和0-100IU/ml硫酸链霉素，溶剂为多重蒸馏水。2.根据权利要求1所述的复合生物制剂，其特征在于所述重组人表皮生长因子复合生物制剂，包括5-10ng/ml重组人表皮生长因子，5％ D-葡萄糖，0-20％胎牛血清，0-8μg/ml胰岛素，0-2μg/ml氢化可的松，0-100μg/ml氨苄青霉素和0-100IU/ml硫酸链霉素。3.根据权利要求1或2所述的复合生物制剂，其特征在于所述重组人表皮生长因子复合生物制剂，由5ng/ml重组人表皮生长因子，5％ D-葡萄糖，5μg/ml胰岛素，100IU/ml硫酸链霉素和无菌多重蒸馏水组成。4.根据权利要求1或2所述的复合生物制剂，其特征在于所述重组人表皮生长因子复合生物制剂，由10％胎牛血清，5ng/ml重组人表皮生长因子，5％ D-葡萄糖，1μg/ml氢化可的松，5μg/ml或8μg/ml胰岛素，100μg/ml氨卞青霉素，100IU...

【专利技术属性】
技术研发人员：方昌阁，
申请(专利权)人：方昌阁，李宁，北京济普霖生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]