蛋白酶抑制剂制造技术

一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，其包含乳铁传递蛋白，乳铁传递蛋白的肽片段以及转铁蛋白中的一种或多种作为活性成分。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，它包含选自乳铁传递蛋白，乳铁传递蛋白的肽片段或者转铁蛋白的一种或多种组成部分作为活性成分，可被用于对骨质疏松和恶性高钙血症等疾病的预防或治疗剂，并可用于食品，饮料和饲料等等中。
技术介绍
在其活性中心具有巯基的蛋白水解酶通常被称为半胱氨酸蛋白酶(硫醇蛋白酶)。组织蛋白酶L，组织蛋白酶B或组织蛋白酶K，与钙依赖性中性蛋白酶(CAMP)，木瓜蛋白酶，无花果蛋白酶和Promelain等一道，是典型的半胱氨酸蛋白酶中的一种。预期对这些半胱氨酸蛋白酶具有抑制作用的物质可被用于与半胱氨酸蛋白酶有关的疾病作为治疗剂，包括如下疾病肌肉营养障碍，发育不良，心肌梗塞，中风，Alzheimer氏病，由头部损伤引起的知觉或运动性失调，多发性硬化症，外周神经疾病，白内障，炎症，过敏症，暴发性性肝炎，骨质疏松，高钙血症，乳癌，前列腺癌或前列腺扩大；或者用于癌症作为生长抑制剂或转移预防剂，以及用作抗血栓形成药物等。而且，近年来基于Katsunuma等所作的研究，组织蛋白酶L，组织蛋白酶B与骨质疏松或恶性高钙血症之间的关系已被阐明。因此，应用组织蛋白酶L抑制剂作为对骨质疏松或恶性高钙血症的治疗剂正特别引人注目(Nobuhiko Katsunuma，“BIO media”Vol.7，No.6，pp73-77，1992)。在骨组织中，整个生命过程都在进行通过成骨细胞的骨生成和通过破骨细胞的骨再吸收。在生长发育时期，由于旺盛的骨生成超过骨再吸收作用使骨密度增加，然而在老年时期，由于过度的骨再吸收超过了骨生成而使骨密度降低，导致形成骨质疏松。有多种原因引起骨质疏松，而其中主要的原因之一特别是骨塌陷(骨再吸收)，它又进一步被区分为如下二种原因，也就是说，其一是归因于钙吸收和沉积作用的减退，更确切地说是与钙的供应，转运，吸收和沉积有关，据认为此过程还涉及维生素D衍生物和雌性激素(雌激素)等物质。另一个原因与骨支持组织，胶原蛋白的加速降解相关联，并且其主要原因是半胱氨酸蛋白酶，特别是组织蛋白酶L，组织蛋白酶B和组织蛋白酶K使骨胶原蛋白降解，这种蛋白酶是从位于破骨细胞内的溶酶体中分泌的。从破骨细胞内溶酶体中分泌的组织蛋白酶L和组织蛋白酶B，促进骨组织内胶原蛋白的降解，借此，引起衰老的骨溶解，钙被游离出，并同羟脯氨酸一起被释放进入血液中，因此，抑制由组织蛋白酶L，组织蛋白酶B和组织蛋白酶K介导的胶原蛋白降解，能够阻止过度的骨塌陷，从而使之有可能治疗骨质疏松。已知雌激素，合成代谢激素，钙制备品，维生素D，降血钙素或二膦酸盐等可作为这种骨质疏松症的治疗剂。此外，关于具有所谓半胱氨酸蛋白酶抑制作用，包括组织蛋白酶L抑制作用，组织蛋白酶B抑制作用和组织蛋白酶K抑制作用机制的用于骨质疏松症的治疗剂，应用某些半胱氨酸蛋白酶抑制剂，开发对骨质疏松症的治疗剂的研究正在进行中(JP 07-179496 A，JP2002-501502A)。但是，还要求进一步开发对骨质疏松症的治疗剂。同时，其血清中钙浓度升高超过正常值的高钙血症是一种代谢性障碍，并且常见于肿瘤病人。据说如果忽视了高钙血症，这种病人的生命将至多延续10天。在多数情况下是由于肿瘤的骨转移而引起。当肿瘤转移至骨骼，发生骨塌陷，钙被释放进入血液中。释放出的钙在肾脏中被处置，当骨塌陷的速度超过了肾脏的处置能力时形成高钙血症。作为治疗方法，已知的有通过用含有速尿灵的生理盐水灌输而促进从肾中排泄钙的方法，以及使用降血钙素作为对骨质疏松症治疗剂的方法。也就是说，用于骨质疏松症抑制骨再吸收的治疗剂还可以有效地作为对恶性高钙血症的治疗剂。本专利技术的专利技术人已经公开了如下药剂作为可用于这种目的的半胱氨酸蛋白酶抑制剂。(1)组织蛋白酶L特异性抑制多肽(JP 07-179496 A)。(2)硫醇蛋白酶抑制剂(JP 09-221425 A)。(3)缬氨酸衍生物及其用途(JP 2001-139534 A)。(4)硫醇蛋白酶抑制剂(JP 07-242600 A)。(5)FA-70C1物质(JP 2000-72797 A)。(6)FA-70D物质及其生产方法和用途(WO 97/31122)。但是，还要求进一步开发无抗原性，并且可以作为安全物质使用的半胱氨酸蛋白酶抑制剂。另一方面，迄今为止已知的是蛋白酶抑制物质存在于母乳中。已知的包含在母乳中的蛋白酶抑制物质包括α1-抗胰凝乳蛋白酶和α1-抗胰蛋白酶，并且在母乳中还含有微量包括间α2-胰蛋白酶抑制物质，α2-抗纤维蛋白溶酶，α2-巨球蛋白，抗凝血酶III和抗白细胞蛋白酶的抑制剂(Iso Kiyosawa，“人乳与婴儿营养”，Kanehara & Co Ltd.pp80-81)。乳中具有半胱氨酸蛋白酶抑制活性的下列蛋白质已经被公开。(1)具有分子量大约57kDa的新型半胱氨酸蛋白酶抑制剂，它带有一个糖链，来源于牛初乳(JP 07-2896 A)。(2)具有分子量16±2kDa或13±2kDa的新型半胱氨酸蛋白酶抑制剂，来源于初乳(JP 07-126294 A)。(3)具有分子量16±2kDa或13±2kDa的新型蛋白质，来源于人乳并且制备方法相同(JP 10-80281 A)。(4)骨再吸收抑制剂，包括作为活性成分的乳来源碱性半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白(Cystatin)从乳中和/或从乳来源碱性半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白的降解产物制备(JP 2000-281587 A)。(5)乳碱性蛋白(MBP)中含有的半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C，以及体外实验中半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C的骨再吸收抑制作用(“生物科学，生物技术和生物化学，日本”。Vol66.No 12.2002 pp 2531-2536)。哺乳动物乳中大量包含的蛋白质包括乳铁传递蛋白和β-酪蛋白。乳铁传递蛋白(此后有时缩写为Lf)是一种铁结合的糖蛋白，它主要包含在母乳中，具有分子量大约80kDa，并且已知对包括大肠埃希氏菌，念珠菌，梭菌和葡萄球菌的病原微生物显示有抗菌作用(儿科学杂志，Vol 94.P 1.1979和Journal of Dairy Science.Vol 67，P60，1984)。此外，因为乳蛋白质具有多种活性，已被广泛地用于治疗疾病。从乳中得到的蛋白质乳铁传递蛋白具有高度安全性，可以被长期连续使用。此外，乳铁传递蛋白本身无味，也没有气味，因此，作为添加剂它是多用途的，可加入各种食品，药物和饲料中。下面作为实例公开了一些应用乳铁传递蛋白的治疗剂。(1)抗肿瘤剂(JP 05-86932 B)。(2)抗类风湿剂(JP 05-186368 A)。(3)加速IgA产生的药剂(JP 06-32743 A)。(4)用于婴儿养育的经过加工的乳粉，对于改善粪便状况有效(JP06-205640 A)。(5)用于血管生成相关疾病的治疗剂(JP 09-194388 A)。(6)用于抑制癌转移的口服药剂(JP 10-59864)。(7)IgE产生抑制剂(JP 2001-158748 A)。还公开了下列Lf水解产物的作用。(8)抗菌作用和酪氨酸酶抑制作用(欧洲专利438750)。(9)对致病菌附着于细胞的抑制作用(JP 03-220130 A)。(10)抗病毒作用(JP 01-233226 A)。还更本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，其包含乳铁传递蛋白，乳铁传递蛋白的肽片段以及转铁蛋白中的一种或多种作为活性成分。2.根据权利要求1的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，其中乳铁传递蛋白和/或转铁蛋白是金属-饱和形式，部分金属-饱和形式和脱-金属形式中的一种或多种。3.根据权利要求1或2的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，其中乳铁传递蛋白和/或转铁蛋白是如下面(a)-(d)中所示的蛋白质或肽中的一种或多种(a)具有序列表SEQ ID No.1中显示的至少氨基酸序号679-695的氨基酸序列的蛋白质或肽，(b)具有序列表SEQ ID No.1中显示的至少氨基酸序号679-695的氨基酸序列的蛋白质或肽，包括一个或多个氨基酸的取代，缺失，添加或倒位，并且具有半胱氨酸蛋白酶抑制活性，(c)具有序列表SEQ ID No.2中显示的至少氨基酸序号676-692的氨基酸序列的蛋白质或肽，以及(d)具有序列表SEQ ID No.2中显示的至少氨基酸序号676-692的氨基酸序列的蛋白质或肽，包括一个或多个氨基酸的取代，缺失，添加或倒位，并且具有半胱氨酸蛋白酶抑制活性。4.根据权利要求1-3中任何之一的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，其是与半胱氨酸蛋白酶有关疾病的预防或治疗剂。5.根据权利要求1-4中任何一项的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，其中与半胱氨酸蛋白酶有关的疾病是骨质疏松或恶性高钙血症。6.食品和饮料组合物或饲料组合物，其是通过加入权利要求1-5中任何之一的...

【专利技术属性】
技术研发人员：胜沼信彦，
申请(专利权)人：森永乳业株式会社，
类型：发明
国别省市：