一种生物基因工程技术领域的耐高温转醛酶及其制备方法，其酶蛋白的核苷酸序列如ＳＥＱＩＤ Ｎｏ．１所示，其氨基酸序列如ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ．２所示，该转醛酶通过根据上下游引物以海栖热袍菌的全基因组序列为模板进行扩增得到ＤＮＡ片段，将该片段回收后，用ＮｄｅＩ和ＳａｌＩ内切酶进行双酶切，酶切后连接到经同样内切酶酶切的表达质粒载体ｐＥＴ２８ａ上，转化大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α，筛选重组质粒并转化Ｅ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１培养至ＯＤ为０．５－０．８之间时，加入异丙基－β－Ｄ－硫代吡喃半乳糖苷并继续培养获得菌体，再加入Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液并充分搅拌均匀后超声破碎处理，将得到的破碎液离心后取含有可溶性的含诱导表达的转醛酶蛋白的上清，经过镍柱亲和层析后可得到纯化的转醛酶蛋白。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种嗜热耐高温的转醛酶，其特征在于，其酶蛋白的核苷酸序列如ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ．１所示，其氨基酸序列如ＳＥＱ ＩＤ Ｎｏ．２所示。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：钟建江，黄松燕，张以恒，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：31
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。