去除前激肽释放酶的、血浆来源的白蛋白组分制造技术

制备前激肽释放酶活化因子（ＰＫＡ）含量降低的富含白蛋白的组分的方法，包括下述步骤：　　　　（ａ）重构糊状物Ｖ（科恩分部分离）；　　　　（ｂ）对步骤（ａ）中获得的组分进行浓缩步骤；　　　　（ｃ）在５０℃－７０℃对步骤（ｂ）中获得的组分加热足够的时间，以对组分进行巴氏杀菌；和　　　　（ｄ）任选地灌注所得的组分，备用。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及制备前激肽释放酶活化因子(PKA)减少的富含白蛋白的组分的方法，和可根据本专利技术方法获得的前激肽释放酶活化因子(PKA)减少的含白蛋白的组分。含白蛋白的制剂用作需要该制剂的患者的输注溶液。为了获得更接近生理的环境，灌注到患者体内的液体代用材料(substitution)不仅含有生理浓度的盐，还含有作为增容剂的白蛋白。白蛋白制剂可能会含有前激肽释放酶活化因子(PKA)，其导致非必要的副作用，这可能是由于前激肽释放酶活化因子干扰肾素-血管紧张素系统。本专利技术的目的是降低血浆来源的、含白蛋白组分中的PKA含量。另一个目的是提供PKA值降低的含白蛋白的组分。制备前激肽释放酶活化因子(PKA)减少的富含白蛋白的组分的方法实现了这一目的，该方法包括以下步骤(f)重构糊状物V(科恩分部分离)；(g)对步骤(a)中获得的组分进行浓缩步骤；(h)在50℃-70℃对步骤(b)中获得的组分加热足够的时间，以对组分进行巴氏杀菌；和(i)任选地灌注所得的组分，备用。在本专利技术的一个实施方案中，在灌注后进行第二次巴氏杀菌步骤。具体地，孵育步骤于50-70℃进行至少5小时，具体是10小时。从重构糊状物V和任选地加入助滤剂开始，优选用孔径约为0.2μm的滤器进行过滤。必要的话，必须进行pH调节。pH应在7.2-7.6的范围内。通常超滤至8％(w/v)蛋白质含量，然后进行透滤和再一次超滤，用来浓缩蛋白质。这导致蛋白质浓度至少为20％。然后优选用孔径约为0.2μm的滤膜进行再一次过滤。加入稳定剂，例如每g白蛋白加入各为0.08mmol的N-乙酰-DL-色氨酸和辛酸钠，然后将pH调节至6.7-7.3。调节蛋白质和钠含量，优选在58℃-65℃的范围内进行整体巴氏杀菌至少9小时。该步骤之后是除菌过滤。样品于2℃-25℃保存少于2周。将白蛋白无菌体进行进一步的最终除菌过滤和灌注。灌注后可以在如前所述的相似条件下进行第二次巴氏杀菌步骤。还可以增加另一孵育步骤。经肉眼检查后，制剂即可保存和施用。本专利技术的方法还提供了前激肽释放酶活化因子(PKA)减少的含白蛋白的组分。本专利技术白蛋白中PKA含量小于12IU/ml，优选小于10IU/ml，其中PKA根据欧洲药典第四版，2.6.15，第147-148页加以测定。还通过下面的非限制性实施例进一步描述了本专利技术。实施例实施例1于-2±2℃将糊状物V悬浮于1.6倍重量的注射用水中＞6小时。向产物中加入助滤剂，并将制剂搅拌30分钟。将深滤器(depth filter)用注射用水并随后用10％(v/v)的乙醇预洗涤。将溶液通过深滤器和随后的0.2μm膜滤器进行净化。滤器再用10％的乙醇注射用水溶液洗涤。用3M氢氧化钠溶液调节pH至7.4±0.2。通过排阻限为10kDalton的膜进行超滤，获得8％的蛋白质浓度。将浓缩物用≥3倍量的0.5M氯化钠溶液进行透滤，然后用≤3倍量的注射用水进行透滤。透滤后，于≤+15℃进行超滤，将白蛋白溶液浓缩至蛋白质浓度约为22％。将溶液通过深滤器和随后的0.2μm膜滤器进行净化。深滤器用注射用水预洗涤。然后，将0.0106g辛酸/g蛋白质和0.0182gN-乙酰-DL-色氨酸/g蛋白质溶解于10％(w/v)的氢氧化钠中，并缓慢搅拌加入到白蛋白溶液中。将pH调节至7.0±0.3。加入注射用水将白蛋白溶液调节至蛋白质浓度为200±10g/l。加入氯化钠将钠含量调节至150±7.5mmol/l。于58-65℃将溶液搅拌至少9小时。将白蛋白溶液通过标称孔径通常为0.2μm的除菌级滤膜进行除菌过滤。通过生产商说明书所推荐的合适测试方法验证使用前后除菌滤器的完整性。将经除菌过滤的白蛋白于+2℃-+25℃保存不超过2周。使用终端0.2μm除菌滤器在无菌条件下将无菌溶液灌注到去除致热源(depyrogenated)的输注瓶中，用灭菌的丁基塞封闭，并用铝盖密封。通过生产商说明书所推荐的合适测试方法验证使用前后除菌滤器的完整性。在整个灌注过程中监测灌注体积。根据欧洲药典进行巴氏杀菌。根据欧洲药典对最终的容器进行孵育。孵育后，肉眼检查所有瓶的颗粒状杂质、浊度、瓶和封闭物的缺陷。弃除有缺陷的制剂。将所有瓶保存于+2℃-+25℃。实施例2于-2±2℃将糊状物V悬浮于1.6倍重量的注射用水中＞6小时。向产物中加入助滤剂，并将制剂搅拌30分钟。将深滤器用注射用水并随后用10％的乙醇预洗涤。将溶液通过深滤器和随后的0.2μm膜滤器进行净化。滤器再用10％的乙醇注射用水溶液洗涤。用3M氢氧化钠溶液调节pH至7.4±0.2。通过排阻限为10kDalton的膜进行超滤，获得8％的蛋白质浓度。将浓缩物用≥3倍量的0.5M氯化钠溶液进行透滤，然后用≤3倍量的注射用水进行透滤。透滤后，于＜+15℃进行超滤，将白蛋白溶液浓缩至蛋白质浓度约为26％。将溶液通过深滤器和随后的0.2μm膜滤器进行净化。深滤器用注射用水预洗涤。然后，将0.0106g辛酸/g蛋白质和0.0182gN-乙酰-DL-色氨酸/g蛋白质溶解于10％的氢氧化钠中，并缓慢搅拌加入到白蛋白溶液中。将pH调节至7.0±0.3。加入注射用水将白蛋白溶液调节至蛋白质浓度为250±12g/l。加入氯化钠将钠含量调节至150±7.5mmol/l。于58-65℃将溶液搅拌至少9小时。将白蛋白溶液通过标称孔径通常为0.2μm的除菌级滤膜进行除菌过滤。通过生产商说明书所推荐的合适测试方法验证使用前后除菌滤器的完整性。将经除菌过滤的白蛋白于+2℃-+25℃保存不超过2周。使用终端0.2μm除菌滤器在无菌条件下将无菌溶液灌注到去除致热源的输注瓶中，用灭菌的丁基塞封闭，并用铝盖密封。通过生产商说明书所推荐的合适测试方法验证使用前后除菌滤器的完整性。在整个灌注过程中监测灌注体积。根据欧洲药典进行巴氏杀菌。根据欧洲药典对最终的容器进行孵育。孵育后，肉眼检查所有瓶的颗粒状杂质、浊度、瓶和封闭物的缺陷。弃除有缺陷的制剂。将所有瓶保存于+2℃-+25℃。实施例3于-2±2℃将糊状物V悬浮于1.6倍重量的注射用水中6小时。向产物中加入助滤剂，并将制剂搅拌30分钟。将深滤器用注射用水并随后用10％的乙醇预洗涤。将溶液通过深滤器和随后的0.2μm膜滤器进行净化。滤器再用10％的乙醇注射用水溶液洗涤。用3M氢氧化钠溶液调节pH至7.4±0.2。通过排阻限为10kDalton的膜进行超滤，获得8％的蛋白质浓度。将浓缩物用≥3倍量的0.5M氯化钠溶液进行透滤，然后用≤3倍量的注射用水进行透滤。透滤后，于低于+15℃进行超滤，将白蛋白溶液浓缩至蛋白质浓度约为22％。将溶液通过深滤器和随后的0.2μm膜滤器进行净化。深滤器用注射用水预洗涤。然后，将0.0106g辛酸/g蛋白质和0.0182g N-乙酰-DL-色氨酸/g蛋白质溶解于10％的氢氧化钠中，并缓慢搅拌加入到白蛋白溶液中。将pH调节至7.0±0.3。加入注射用水将白蛋白溶液调节至蛋白质浓度为200±10g/l。加入氯化钠将钠含量调节至150±7.5mmol/l。于58-65℃将溶液搅拌至少10小时。将白蛋白溶液通过标称孔径通常为0.2μm的除菌级滤膜进行除菌过滤。通过生产商说明书所推荐的合适测试方法验证使用前后除菌滤器的完整性。将经除菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：维尔纳·格林格，卡塔琳娜·波克，
申请(专利权)人：奥克塔法马股份有限公司，
类型：发明
国别省市：