用于药物蛋白的新型稳定剂制造技术

通过将松三糖加入包含分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白的溶液中来稳定分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于稳定分子量>10 Kda的人血液蛋白或者人血浆蛋白的方法，一种分子量>10 Kda的人血液蛋白或者人血浆蛋白的固态或液态组合物以及松三糖在稳定人血液蛋白或者人血浆蛋白中的应用。
技术介绍
治疗蛋白的稳定是现今制药工业的制剂科学家的主要挑战。存在多种引起蛋白可逆和不可逆变化(例如聚集、沉淀或变性)的应力。这些困难提出了对稳定这些灵敏蛋白的试剂的需求。制剂(Formulation)开发是关键步骤,需要对赋形剂进行仔细的选择以提供在纯化过程和制药过程中的蛋白活性的高产率并作为终产品。尤其是对于人血液蛋白或者人血浆蛋白。最广泛使用的用于蛋白制剂的稳定剂之一是碳水化合物，也称为糖类。碳水化合物由连接的称为单糖的基础碳水化合物组分，并能够具有不同的长度和能够具有不同的特性。蔗糖和海藻糖——两种最普通使用的稳定剂——都是二塘，因此由两个单糖组成。与最普通使用的碳水化合物稳定剂蔗糖和海藻糖(均为二塘)相比，松三糖是三糖。通常指出[Wang ff, Lyophilisation and development of solid protein pharmaceuticals，Int J Pharm 203 ，1-60，2000;Carpenter J. F. , Chang B.S.，Garzon-Rodriguez W.，Randolph T. W.，Rational design of stable lyophilized protein formulations:Theroy and practice,chapter 5，ed Carpenter and Manning, Kluiwer Academic/Plenum Publishers, New York, 2002]，二糖是稳定溶液状态或者冻干状态的蛋白的第一选择。一些二糖，例如乳糖或者麦芽糖，是还原糖，能够通过在固态储存期间的Malliard反应来降解蛋白。文献表明，如果更大的糖类用作冻干制剂的稳定剂，由于蛋白-稳定剂相互作用的空间位阻，这些糖类是不太有效的 [Carpenter J. F.，Chang B. S.，Garzon-Rodriguez W.，Randolph T. Wj Rational design of stable lyophilized protein formulations:Theroy and practice, chapter 5，ed Carpenter and Manning, Kluiwer Academic/Plenum Publishers, New York，2002]。综述文献Wang，W.，International Journal of Pharmaceutics，203 (2000) 1-60， iiLyophilization and development of solid protein pharmaceuticals”尤其公开了麦芽糖、葡萄糖和麦芽三糖能够在Img ml—1提高催化活性的恢复，但是麦芽五糖、麦芽六糖和麦芽七糖不是那么有效。更大糖类的无效表明糖的蛋白稳定可能依赖糖的糖苷侧链长度，其可能干扰在稳定化糖和蛋白之间的分子间氢键。该综述文献推荐二糖为稳定剂(P. 9/10)。W0-A-2003/086443公开了使用包括水苏糖、松三糖和各种单糖和二糖在内的碳水化合物来制备鼻内给药多肽制剂。糖用于减少在喷射期间的剪切应力的作用。W0-A-86/04486尤其公开了因子VIII的色谱纯化，其中松三糖用作色谱过程期间的水合作用添加剂。W0-A-91/18091公开了(a)在干燥状态和/或(b)在升高的温度下和/或在辐射下保存灵敏生物物质或者有机化合物的方法，包括在包括所述物质或化合物的系统中加入糖或糖衍生物，所述糖或糖衍生物选自(i)选自糖醇和其他直链多元醇的多羟化合物的非还原性配糖，或者(ii)选自棉籽糖、水苏糖和松三糖的非还原性寡糖。Mollmann, S. H.等人在Drug Dev.1nd. Pharm. 2006 Jul; (6) :765-78 中报道关于膜岛素在包含松三糖和淀粉的固态制剂中的稳定性。
技术实现思路
本专利技术提供了通过将松三糖加入包含分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白的溶液中来稳定分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白的方法。优选地,人血液蛋白或者人血楽:蛋白具有分子量>10kDa。更优选地,分子量是在 IOkDa至300kDa之间。更优选地，分子量是在20kDa至200kDa之间。人血液蛋白或者人血浆蛋白的分子量在50kDa至IOOkDa之间或者分子量在IOOkDa至150kDa之间或者分子量在150kDa至200kDa之间可能是有利的。尤其，具有分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白是药物上或者生物上相关的蛋白。能够根据本专利技术稳定的药物上或者生物上相关的具有分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白可以是重组生产的人血液蛋白或者人血浆蛋白。术语“蛋白”包括化学合成的蛋白以及培养细胞的基因编码的天然合成的蛋白以及由细胞分泌的重组蛋白。重组蛋白是由分子生物技术引入细胞的转基因编码的那些。蛋白可以通过化学方法或者通过翻译后过程中的酶进行修饰(modify)。根据本专利技术，“蛋白”包括人蛋白尤其是通过细胞培养产生的那些，也包括其他来源例如植物、昆虫等的蛋白，以及突变的、人工的、合成的、融合的或者嵌合的蛋白。术语“分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白”具体包括人血液凝结因子， 包括纤维蛋白原、纤维蛋白单体、凝血素、凝血酶、FV、FVa, FX、FXa, FIX、FIXa, FVI I, FVIIa, FVII1、FX1、FXIa, FXII, FXIIa, FXII1、FXIIIa、血管性假血友病因子(von Willebrand 因子)，ADAMTS13等；转运蛋白例如白蛋白、铁传递蛋白、血楽■铜监蛋白、结合珠蛋白、血色素、 血液结合素等；蛋白酶抑制剂例如β -抗凝血酶、α -抗凝血酶、α 2-巨球蛋白、Cl-抑制剂、组织因子途径抑制剂(TFPI, tissue factor pathway inhibitor),月干素辅助因子、蛋白C抑制因子(PA1-3)、蛋白C、蛋白S、蛋白Z等；免疫球蛋白例如聚克隆抗体(IgG)、单克隆抗体、IgGU IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgAU IgA2、IgM、IgE、IgD、本周蛋白(Bence Jones protein)等；细胞相关血衆蛋白例如纤连蛋白、血小板球蛋白、血小板因子4等；阿朴脂蛋白例如apo A_1、apo A_I1、apo E ;补体因子例如因子B、因子D、因子H、因子1、C3b_灭活剂、 备解素(properdin)、C4-结合蛋白等；生长因子如血小板衍生生长因子(TOGF)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α 0'6 -(1)、转化生长因子-0 (TGF-β )、纤维原细胞生长因子 (FGF)和肝细胞生长因子；antiangionetic蛋白例如潜在-抗凝血酶和预潜在抗凝血酶等； 高度糖基化的蛋白包本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.04.20 EP 10160470.0;2010.04.20 US 61/325,9751.通过将松三糖加入包含分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白的溶液中来稳定所述分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白的方法。2.权利要求1所述的方法，其中可选地通过冻干法将所述溶液转换成固态。3.权利要求1或2任一项所述的方法，其中松三糖是以最多lOOOmM、尤其约IOmM至约200mM、特别是约IOmM至约IOOmM的量存在。4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白是药物上和生物上相关的人血液蛋白或者人血浆蛋白。5.权利要求4的方法，其中所述药物上和生物上相关的蛋白是重组产生的分子量>IOkDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白。6.权利要求4或5的方法，其中所述药物上和生物上相关的蛋白是人的，或者诸如植物、昆虫等其他来源的，或者突变的、人工的、合成的、融合的或者嵌合的蛋白或者连接到一个或者更多化合物的衍生物及其组合。7.权利要求6的方法，其中所述分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白是血液凝结因子，包括纤维蛋白原、纤维蛋白单体、凝血素、凝血酶、FV、FVa、FX、FXa、FIX、FIXa、FVI1、FVIIa、FVII1、FX1、FXIa、FXI1、FXIIa、FXII1、FXIIIa、血管性假血友病因子、ADAMTS13 及其衍生物和突变体。8.权利要求6任一项的方法，其中所述分子量>10kDa的人血液蛋白或者人血浆蛋白是转运蛋白诸如白蛋白、铁传递蛋白、血浆铜蓝蛋白、结合珠蛋白、血色素、血液结合素等，蛋白酶抑制剂诸如β -抗凝血酶、α -抗凝血酶、α 2-巨球蛋白、Cl-抑制剂、组织因子途径抑制剂(TFPI)、肝素辅助因子、蛋白C抑制剂(ΡΑΙ-3)、蛋白C、蛋白S、蛋白Z等，免疫球蛋白诸如多克隆抗体(IgG)、单克隆抗体、IgGU IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgAU IgA2、IgM、IgE、IgD、本周蛋白等，细胞相关血浆蛋白诸如纤连蛋白、血小板球蛋白、血小板因子4等，阿朴脂蛋白诸如apo A-1.apo A-11.apo E，补体因...

【专利技术属性】
技术研发人员：埃尔莎·伊瓦尔松，约瑟芬·奥斯特伯格，布里塔·里普纳，乌尔里卡·尼尔松，艾琳·阿格奎斯特，
申请(专利权)人：奥克塔法马股份有限公司，
类型：
国别省市：