治疗系统性红斑狼疮的肽的胃肠道外制剂技术方案

本发明专利技术提供一种药物组合物，其包括：一种水性载体，０．１ｍｇ／ｍｌ－２０ｍｇ／ｍｌ的肽的药用盐的组合物，ａ）所述肽包括至少１２个并且至多３０个连续氨基酸，其具有的序列相应于：（ｉ）在人类单克隆抗－ＤＮＡ１６／６Ｉｄ抗体的重或轻链的互补决定区（ＣＤＲ）中发现的氨基酸的序列，或（ｉｉ）在病原抗－ＤＮＡ单克隆抗体的重或轻链的互补决定区（ＣＤＲ）中发现的氨基酸的序列，所述单克隆抗体在小鼠中诱导类系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）的疾病反应，或ｂ）所述肽包含连续氨基酸，其具有由ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯＳ．８－１７任何一个显示的序列，或ｃ）所述肽包含连续氨基酸，其具有ａ）和ｂ）的任何一个序列，或在（ａ）（ｉ）、（ａ）（ｉｉ）和（ｂ）（ｉ）－（ｂ）（ｘ）中的至少两个序列；或ｄ）所述肽包含连续氨基酸，其具有的序列包含在（ａ）（ｉ）、（ａ）（ｉｉ）和（ｂ）（ｉ）－（ｂ）（ｘ）中包括的至少两个相同序列；和溶解度增强剂，其中所述肽和溶解度增强剂溶解在水性载体中；并且其中所述组合物具有介于４和９之间的ｐＨ，以及本发明专利技术提供一种通过施用有效量的组合物来缓和人类ＳＬＥ症状的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗系统性红斑狼疮的肽的胃肠道外制剂本申请要求提交于2003年1月14日的美国临时申请号60/439,918的优先权，特此将其全部内容并入作为参考。在整个申请中，将各种出版物全文引用作为参考。特此，将这些出版物全部内容并入本申请作为参考从而更充分地描述在本文描述和要求的本专利技术的日期之前的所属本领域那些技术人员已知的技术状态。专利技术背景系统性红斑狼疮(SLE)，或狼疮是一种使人衰弱的(debilitating)自身免疫病，其特征在于一批自身抗体的存在，所述抗体包括针对dsDNA的抗体，针对核抗原的抗体和针对核糖核蛋白的抗体。大约2000人中要有1人受到SLE的侵袭(美国，700个妇女中有1人)。该疾病主要侵袭年轻妇女，并且女性与男性的比率约为9∶1。系统性狼疮可以侵袭几乎身体的任何器官或系统。系统性狼疮可以包括即便有，也是极少症状是明显的(“减轻”)的时期和当疾病变得更加活跃(“突发”)的其它时期。大多数时候，当人们提到“狼疮”，他们是指该疾病的系统性形式。皮质类固醇是治疗系统性自身免疫疾病的主要依靠。用高剂量的糖皮质激素(1-2mg/kg/天)治疗威胁生命、具有严重致残表现形式的SLE。慢性糖皮质激素的不理想效应包括一批显著有害效应诸如类库欣综合征体型，中枢肥胖症，高血压，感染，毛细血管脆性，多毛症，加速的骨质疏松症，白内障，糖尿病，肌病和精神病。除了皮质类固醇的毒性外，患者对剂量方案的依赖也引起了一个严重的问题。还将细胞毒性试剂用于控制活动的疾病，减缓疾病突发的速度和减少对类固醇的需求。后者不理想的副作用包括骨髓阻抑，增加的条件性的生物的感染，不可逆的卵巢衰竭，脱发和增加恶性肿瘤的风险。-->SLE是一种炎性疾病，迄今尚没有对其确定有效的治疗或疗法。该疾病导致急性和慢性的并发症。仅有的可利用的治疗方法是姑息剂，其目标在于减轻急性症状和预防慢性并发症，经常伴随深刻的副作用。因此，在这个领域有未满足的需要，并且医师和患者都将欢迎新的治疗方法，其可以潜在消除或减少该疾病有害的表现。尽管对SLE的诱导机制进行了广泛研究，关于该疾病的病原学信息是非常有限的。直到最近，在不同临床阶段和各种处理方案下，使用患者的外周血淋巴细胞(PBL)进行SLE研究。或者，将呈现自发的类-SLE疾病的小鼠品系作为SLE的模型进行研究。这种分析导致了不彻底的和使人迷惑的关于各种免疫学和非免疫学因子在诱导或维持疾病上的作用的解释，这主要是一方面由于患者的异种性和另一方面在小鼠SLE品系中难于控制疾病的诱导阶段。几年前，建立了SLE的动物模型。基于遗传型网络的概念的这种模型，开发了狼疮相关的自身抗体和临床表现形式的广泛谱系(Mendlovic，S.等Proc.Natl.Acad Sci.USA 85：2260(1988))。通过用具有称为16/6Id的常见遗传型的人类抗-DNA单克隆抗体(mAb)对没有呈现任何自发的自身免疫疾病的小鼠品系的免疫来进行诱导(Shoenfeld，Y等，J.Exp.Med.158：718(1983))。人类mAB 16/6是抗-DNA抗体，其起初是IgM同种型的，并且在培养物中被转变为IgG1。该mAB来自患者并且表达常见遗传型，16/6Id(Shoenfeld等，1983；Mendlovic等，1988)。分泌这种mAB的杂交瘤细胞一般生长在培养物中，并且使用与SepharoseTM偶联的蛋白质G的亲和柱来从培养物上清液中分离这种抗体。将人类16/6抗-DNA mAB(IgGl/к)描述于Shoenfeld，Y.等，J.Clin.Invest.70：205-208(1982)和Waisman，A等，Int.Immunol.7：689-696(1995)中。免疫后，这些小鼠产生了特异于16/6Id的抗体，具有16/6Id的抗体和直接针对不同核抗原(dsDNA，ssDNA，Sm，核糖核蛋白(RNP)，Ro，La和其它)的抗体。血清学观察所见与白细胞减少，增加的红细胞沉降速度，蛋白尿，肾中免疫络合物的丰度和小球的硬化相关(Mendlovic等，1988)，这些是典型的SLE表现形式。还显示鼠的抗-16/6Id mAb(Mendlovic，S等，-->Eur.J.Immunol.19：729，(1989))和小鼠抗-抗16/6Id(16/6Id+)mAb(Waisman，A等，Internatl.Immunol.5：1293(1993)；Waisman，A和Mozes，E.Eur.J.Immunol.23：1566，(1993))可以诱导实验的疾病。这种疾病的诱导是通过基因控制的，并且因此是品系依赖型的(Mendlovic，S.等，Immunology69：228(1990))。这种实验的SLE诱导的独特模型提供了适当的工具来清楚地仔细分析不同的步骤和涉及SLE诱导和发展的连锁的免疫参数。SLE是一种系统性自身免疫病，其特征在于形成针对自身抗原，诸如DNA、Sm、Ro、La、RNP、心磷脂和组蛋白的自身抗体。尚不清楚SLE的病原学，对这些自身抗体出现的机制的理解提供了洞察力。发现能够激发具有16/6Id或与其反应的抗体的单克隆自身抗体是病原性的并且因此能够诱导实验性SLE(Fricke，H等，Internatl.Immunol.2：225(1990)；Sthoeger，Z.M.等，J.Clin.Immunol.13：127(1993))。对9个结合DNA或者HeLa核提取物(NE)的自身抗体的可变(V)区进行测序，所述自身抗体分离自具有实验性SLE的C3H.SW小鼠(Waisman和Mozes，1993)。分析具有不同特异性的单克隆抗体以尝试确定不同自身抗体之间的关系。发现三个结合DNA的mAb并且其显示了病原性抗-DNA抗体的序列特性。这些mAb的其中一个，称为2C4C2，显示使用重(H)链(V)区基因(VH)，其与分离自其它倾向狼疮的小鼠，名称为(NZB xNZW)F1的抗-DNA mAb的VH相同。mAb 2C4C2的轻(L)链V区基因(VL)与也分离自(NZB xNZW)F1小鼠的另一个抗-DNAmAb的VL具有98％的同源性。称作5G12-4和5G12-6的其它两个抗-DNAmAb的VH序列与mAb 2C4C2的具有93％的同源性。六个mAb结合HeLa NE的蛋白。所述9个mAb使用总共5个VH和4个VL种系基因，说明了具有实验性SLE的小鼠中诱导的自身抗体不是起源自一个B细胞克隆。9个VH和VL中的3个在序列上与种系基因相同，而至少三个其它的具有体细胞突变。后者提示这些抗体通过使用存在的(免疫前)的B细胞，和通过一种抗原引发的过程出现在小鼠中。而且，看来在具有实验性SLE的小鼠中发现的自身抗体使用与mAb所用的那些相似的遗传元件，所述遗传元件分离自自发呈现狼疮的小鼠品系。T细胞在诱导和发展实验性SLE中起着重要的作用。因此，特异于16/6Id的T细胞系和克隆显示与16/6抗体相似的在同系受体中诱导实验-->性SLE。因此，在接种该谱系的活化细胞后，小鼠发展了对SLE是典型的血清学和肾的损伤(Fricke，H.等，Immunology 73：421(19本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，其包括：　　　　水性载体；　　　　０．１ｍｇ／ｍｌ－２０ｍｇ／ｍｌ的肽的药用盐的组合物，　　　　ａ）所述肽包括至少１２个和至多３０个连续氨基酸，其具有的序列相应于：　　　　　（ｉ）在人类单克隆抗－ＤＮＡ１６／６Ｉｄ抗体的重或轻链的互补决定区（ＣＤＲ）中发现的氨基酸的序列，或　　　　（ｉｉ）在病原性抗－ＤＮＡ单克隆抗体的重或轻链的互补决定区（ＣＤＲ）中发现的氨基酸的序列，所述单克隆抗体在小鼠中诱导类系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）的疾病反应，或　　　　ｂ）所述肽包括连续氨基酸，其具有如下序列：　　　　（ｉ）ＴＧＹＹＸ↓［１］Ｘ↓［２］Ｘ↓［３］Ｘ↓［４］Ｘ↓［５］ＱＳＰＥＫＳＬＥＷＩＧ（ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１１）　　　　其中Ｘ↓［１］是甲硫氨酸，丙氨酸或缬氨酸；Ｘ↓［２］是谷氨酰胺，天冬氨酸，谷氨酸或精氨酸；Ｘ↓［３］是色氨酸或丙氨酸；Ｘ↓［４］是缬氨酸或丝氨酸；和Ｘ↓［５］是赖氨酸，谷氨酸或丙氨酸；　　　　（ｉｉ）ＥＩＮＰＳＴＧＧＸ↓［６］Ｘ↓［７］Ｘ↓［８］Ｘ↓［９］Ｘ↓［１０］Ｘ↓［１１］Ｘ↓［１２］ＫＡＫＡＴ（ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１２）　　　　其中Ｘ↓［６］和Ｘ↓［７］每个是苏氨酸，缬氨酸或丙氨酸；Ｘ↓［８］是酪氨酸或苯丙氨酸；Ｘ↓［９］是天冬酰胺或天冬氨酸；Ｘ↓［１０］是谷氨酰胺或谷氨酸；Ｘ↓［１１］是赖氨酸或谷氨酸，和Ｘ↓［１２］是苯丙氨酸或酪氨酸；　　　　（ｉｉｉ）ＹＹＣＡＲＸ↓［１３］Ｘ↓［１４］Ｘ↓［１５］Ｘ↓［１６］ＰＹＡＸ↓［１７］Ｘ↓［１８］ＹＷＧＱＧＳ（ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１３）　　　　其中Ｘ↓［１３］是苯丙氨酸，苏氨酸或甘氨酸；Ｘ↓［１４］是亮氨酸，丙氨酸或丝氨酸；Ｘ↓［１５］是色氨酸或丙氨酸；Ｘ↓［１６］是谷氨酸或赖氨酸；Ｘ↓［１７］是甲硫氨酸或丙氨酸，和Ｘ↓［１８］是天冬氨酸，赖氨酸或丝氨酸；　　　　（ｉｖ）ＧＹＮＸ↓［１９］Ｘ↓［２０］Ｘ↓［２１］Ｘ↓［２２］Ｘ↓［２３］Ｘ↓［２４］ＳＨＧＸ↓［２５］Ｘ↓［２６］ＬＥＷＩＧ（ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１４）　　　　其中Ｘ↓［１９］是甲硫氨酸或丙氨酸；Ｘ↓［２０］是天冬酰胺，天冬氨酸或精氨酸；Ｘ↓［２１］是色氨酸或丙氨酸；Ｘ↓［２２］是缬氨酸或丝氨酸；Ｘ↓［２３］是赖氨酸或谷氨酸；Ｘ↓［２４］是谷氨酰胺或丙氨酸；Ｘ↓［２５］是赖氨酸或谷氨酸，和Ｘ↓［２６］是丝氨酸或丙氨酸；　　　　（ｖ）ＹＹＣＡＲＸ↓［２７］Ｘ↓［...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2003-1-14 60/439,9181.一种药物组合物，其包括：水性载体；0.1mg/ml-20mg/ml的肽的药用盐的组合物，a)所述肽包括至少12个和至多30个连续氨基酸，其具有的序列相应于：(i)在人类单克隆抗-DNA16/6Id抗体的重或轻链的互补决定区(CDR)中发现的氨基酸的序列，或(ii)在病原性抗-DNA单克隆抗体的重或轻链的互补决定区(CDR)中发现的氨基酸的序列，所述单克隆抗体在小鼠中诱导类系统性红斑狼疮(SLE)的疾病反应，或b)所述肽包括连续氨基酸，其具有如下序列：(i)TGYYX1X2X3X4X5QSPEKSLEWIG(SEQ ID NO：11)其中X1是甲硫氨酸，丙氨酸或缬氨酸；X2是谷氨酰胺，天冬氨酸，谷氨酸或精氨酸；X3是色氨酸或丙氨酸；X4是缬氨酸或丝氨酸；和X5是赖氨酸，谷氨酸或丙氨酸；(ii)EINPSTGGX6X7X8X9X10X11X12KAKAT(SEQ ID NO：12)其中X6和X7每个是苏氨酸，缬氨酸或丙氨酸；X8是酪氨酸或苯丙氨酸；X9是天冬酰胺或天冬氨酸；X10是谷氨酰胺或谷氨酸；X11是赖氨酸或谷氨酸，和X12是苯丙氨酸或酪氨酸；(iii)YYCARX13X14X15X16PYAX17X18YWGQGS(SEQ ID NO：13)其中X13是苯丙氨酸，苏氨酸或甘氨酸；X14是亮氨酸，丙氨酸或丝氨酸；X15是色氨酸或丙氨酸；X16是谷氨酸或赖氨酸；X17是甲硫氨酸或丙氨酸，和X18是天冬氨酸，赖氨酸或丝氨酸；(iv)GYNX19X20X21X22X23X24SHGX25X26LEWIG(SEQ ID NO：14)其中X19是甲硫氨酸或丙氨酸；X20是天冬酰胺，天冬氨酸或精氨酸；X21是色氨酸或丙氨酸；X22是缬氨酸或丝氨酸；X23是赖-->氨酸或谷氨酸；X24是谷氨酰胺或丙氨酸；X25是赖氨酸或谷氨酸，和X26是丝氨酸或丙氨酸；(v)YYCARX27X28X29YGX30X31X32GQTL(SEQ ID NO：15)其中X27是丝氨酸或苯丙氨酸；X28是甘氨酸或丙氨酸；X29是精氨酸，丙氨酸或谷氨酸；X30是天冬酰胺或天冬氨酸；X31是酪氨酸或苯丙氨酸，和X32是色氨酸，组氨酸或丙氨酸；(vi)X33YYWSWIX34QX35PX36X37GX38EWIG(SEQ ID NO：16)其中X33是甘氨酸或苏氨酸甘氨酸；X34是精氨酸或赖氨酸；X35是脯氨酸或丝氨酸；X36是甘氨酸或谷氨酸；X37是赖氨酸或天冬氨酸；和X38是谷氨酸，亮氨酸或丝氨酸；(vii)YYCARX39LLX40X41X42X43X44DVDYX45GX46DV(SEQ IDNO：17)其中X39是甘氨酸或苯丙氨酸；X40是精氨酸或丙氨酸；X41是甘氨酸或丙氨酸；X42是甘氨酸或丙氨酸；X43是色氨酸或丙氨酸；X44是天冬酰胺或丙氨酸；X45是酪氨酸或色氨酸；X46是甲硫氨酸或谷氨酰胺；(viii)FSGYYWS(SEQ ID NO：8)；(ix)EINHSGSTNYKTSLKS(SEQ ID NO：9)；或(x)GLLRGGWNDVDYYYGMDV(SEQ ID NO：10)，或c)所述肽包括连续氨基酸，其具有a)和b)任何一个的序列，或在(a)(i)，(a)(ii)和(b)(i)-(b)(x)中的至少两个序列，或d)所述肽包含连续氨基酸，其具有的序列包括在(a)(i)，(a)(ii)和(b)(i)-(b)(x)中包括的至少两个相同序列；和溶解度增强剂，其选自由下列组成的组中：二甲基-乙酰胺，聚乙二醇，聚氧化的蓖麻油，N-甲基-2-吡咯烷酮，1-乙烯基-2-吡咯烷酮，聚氧乙烯山梨糖醇酯，和取代的β-环糊精，其中所述肽和溶解度增强剂都溶解在水性载体中；和其中所述组合物具有介于4-9之间的pH。2.权利要求1的药物组合物，其中至少0.5mg/ml的组合物是所述肽的药用盐。-->3.权利要求1或2的药物组合物，其中所述肽具有选自由下列组成的组的序列：NH2-Thr Gly Tyr Tyr Met Gln Trp Val Lys Gln Ser Pro Glu Lys Ser Leu Glu-Trp Ile Gly-COOH(SEQ ID NO：1)；NH2-Glu Ile Asn Pro Ser Thr Gly Gly Thr Thr Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Ala Lys Ala Thr-COOH(SEQ ID NO：2)；NH2-Tyr Tyr Cys Ala Arg Phe Leu Trp Glu Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Ser-COOH(SEQ ID NO：3)；NH2-Gly Tyr Asn Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly-COOH(SEQ ID NO：4)；NH2-Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Arg Tyr Gly Asn Tyr Trp Gly Gln Thr Leu-COOH(SEQID NO：5)；NH2-Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Glu Glu Trp Ile Gly-COOH(SEQ ID NO：6)；NH2-Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Leu Leu Arg Gly Gly Trp Asn Asp Val Asp Tyr Tyr Gly MetAsp Val-COOH(SEQ ID NO：7)；NH2-Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser-COOH(SEQ ID NO：8)；NH2-Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Lys Thr Ser Leu Lys Ser-COOH(SEQ IDNO：9)；和NH2-Gly Leu Leu Arg Gly Gly Trp Asn Asp Val Asp Tyr Tyr Tyr Gly Mer Asp Val-COOH(SEQ ID NO：10)。4.权利要求1的药物组合物，其中所述肽包括连续氨基酸，其具有如下序列：X33YYWSWIX34QX35PX36X37GX38EWIG(SEQ ID NO：16)其中X33是甘氨酸或苏氨酸甘氨酸；X34是精氨酸或赖氨酸；X35是脯氨酸或丝氨酸；X36是甘氨酸或谷氨酸；X37是赖氨酸或天冬氨酸；和X38是谷氨酸，亮氨酸或丝氨酸。5.权利要求1-4任一项的药物组合物，其中所述溶解度增强剂是取代的β-环糊精。6.权利要求5的药物组合物，其中取代的β-环糊精是羟基丙基、磺基丁基醚或磺基丙基醚取代的β-环糊精。7.权利要求6的药物组合物，其中取代的β-环糊精是取代的磺基丁基醚β-环糊精。8.权利要求1-7任一项的药物组合物，其中肽在溶液中的浓度至少是1mg/ml。-->9权利要求1-7任一项的药物组合物，其中肽在溶液中的浓度至少是2.5mg/ml。10.权利要求1-9任一项的药物组合物，其中所述组合物具有介于6.5和8.5之间的pH。11.权利要求10的药物组合物，其中所述组合物具有介于7.5和8.5之间的pH。12.权利要求1-11任一项的药物组合物，其中药用盐是乙酸盐。13.权利要求5的药物组合物，其中药用盐是乙酸盐，并且取代的β-环糊精是七-(磺基丁基醚)-β-环糊精。14.一种缓和人类受试者系统性红斑狼疮(SLE)症状的方法，其包括以缓和人类受试者SLE的症状的有效量向人类受试者施用权利要求1-13任一项的药物组合物。15.权利要求1-13任一项的药物组合物在治疗人类受试者中SLE的应用。16.一种制备权利要求1-13任一项的药物组合物的方法，其包括如下步骤：e)以预定浓度在水性载体中制备二甲基-乙酰胺，聚乙二醇，聚氧化的蓖麻油，N-甲基-2-吡咯烷酮，1-乙烯基-2-吡咯烷酮，聚氧乙烯山梨糖醇酯或取代的β-环糊精的溶液。f)加入预定量的肽的药用盐，1)所述肽包括至少12个和至多30个连续氨基酸，其具有的序列相应于：(i)在人类单克隆抗-DNA16/6Id抗体的重或轻链的互补决定区(CDR)中发现的氨基酸的序列，或(ii)在病原性抗-DNA单克隆抗体的重或轻链的互补决定区(CDR)中发现的氨基酸的序列，所单克隆述抗体在小鼠中诱导类系统性红斑狼疮(SLE)的疾病反应，2)所述肽包括氨基酸，其具有如下序列：(i)TGYYX1X2X3X4X5QSPEKSLEWIG(SEQ ID NO：11)其中X1是甲硫氨酸，丙氨酸或缬氨酸；X2是谷氨酰胺，天冬氨酸，谷氨酸或精氨酸；X3是色氨酸或丙氨酸；X4是缬氨酸或丝氨酸；和X5是赖氨酸，谷氨酸或丙氨酸；-->(ii)EINPSTGGX6X7X8X9X10X11X12KAKAT(SEQ ID NO：12)其中X6和X7每个是苏氨酸，缬氨酸或丙氨酸；X8是酪氨酸或苯丙氨酸；X9是天冬酰胺或天冬氨酸；X10是谷氨酰胺或谷氨酸；X11是赖氨酸或谷氨酸，和X12是苯丙氨酸或酪氨酸；(iii)YYCARX13X14X15X16PYAX17X18YWGQGS(SEQ ID NO：13)其中X13是苯丙氨酸，苏氨酸或甘氨酸；X14是亮氨酸，丙氨酸或丝氨酸；X15是色氨酸或丙氨酸；X16是谷氨酸或赖氨酸；X17是甲硫氨酸或丙氨酸，和X18是天冬氨酸，赖氨酸或丝氨酸；(iv)GYNX19X20X21X22X23X24SHGX25X26LEWIG(SEQ ID NO：14)其中X19是甲硫氨酸或丙氨酸；X20是天冬酰胺，天冬氨酸或精氨酸；X21是色氨酸或丙氨酸；X22...

【专利技术属性】
技术研发人员：S科恩韦雷德，E纳夫塔利，V魏因施泰因，A吉尔贝特，E克林格尔，
申请(专利权)人：特瓦制药工业有限公司，
类型：发明
国别省市：IL[以色列]