水稻胚乳特异表达基因的启动子及表达模式鉴定制造技术

本发明专利技术属于植物基因工程领域。从水稻基因组中克隆了同一胚乳特异表达基因（登录号为ＧＩ：３１４１５９２４）上游６个不同长度的启动子（ＥｎＰ３、ＥｎＰ３－８５９、ＥｎＰ３－６７８、ＥｎＰ３－４７１、ＥｎＰ３－２９２和ＥｎＰ３－１１０），其核苷酸序列如ＳＥＱ?ＩＤ?ＮＯ：１－６所示；其中５个启动子（ＥｎＰ３、ＥｎＰ３－８５９、ＥｎＰ３－６７８、ＥｎＰ３－４７１和ＥｎＰ３－２９２）仅在转化植株的胚乳表达，并且随着胚乳发育阶段的不断进行，表达量呈现下降趋势；在其他组织如叶片、叶鞘、茎杆、根、花、颖壳及胚中均检测不到表达。启动子ＥｎＰ３－１１０在叶片、叶鞘、茎杆及颖壳这些绿色组织中可以检测到表达，但是在根、花及种子（包括胚和胚乳）中却检测不到表达，成为一个短的绿色组织特异表达启动子。公开了６个启动子及其相应表达载体的制备方法，以及通过农杆菌介导的转基因方法导入水稻的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物基因工程
，具体涉及到水稻中同一胚乳特异性表达基因 的不同长度启动子区域的分离克隆及表达模式鉴定。
技术介绍
通过分子生物学以及基因工程的手段去研究和改良作物在农业生产中具有很好 的应用前景。自1983年获得第一株转基因烟草以来(Zambryski et al.，1983)，在近30年 的时间里，植物基因工程的研究取得了突飞猛进的进展，已经成为现代生物学和育种学中 一项重要的方法和技术。但是在其广泛运用的过程中也逐渐暴露了一些问题。其中之一就 是现阶段研究中经常用组成型启动子来驱动外源基因表达，由于组成型启动子会使驱动的 目的基因在植物各组织中恒定而持续的表达，从而过度消耗细胞内的物质和能量，并且不 能从时间和空间上有效地调控目的基因的表达，所以有时会带来一些负面效应。如外源基 因在整株植物中表达，产生的大量异源蛋白质或代谢产物在植物体内积累，打破了植物原 有的代谢平衡，不利于产量和品质的提高；有些产物对植物并非必需甚至有毒，因而阻碍了 植物的正常生长,甚至导致死亡(Karlowsikiand Hirsch, 2003 ；Ehsani et al. ,200本文档来自技高网...

【技术保护点】
一个水稻胚乳特异性表达的启动子ＥｎＰ３，它的核苷酸序列如序列表ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：林拥军，叶荣建，陈浩，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]