【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种辅助诊断原发性肝细胞癌的检测试剂盒，尤其是涉及一种可用于检测肝癌相关基因TM4SF1和NPY基因启动子区特异性位点甲基化水平的试剂盒及其应用。
技术介绍
肝癌是全球范围内致死率排名第三的恶性肿瘤，也是我国位居第二的癌症“杀手”。目前对肝癌的治疗主要以手术、放化疗为主，同时结合免疫治疗、中医等其他治疗方法；但由于对于肝癌的发病机制尚不明确及缺乏有效的治疗靶点，中后期的病人治疗效果不佳，生存率低。研究表明，肝癌发生发展是一个表观遗传学调控的过程。DNA甲基化是目前表观遗传学研究的热点之一，它是指在DNA甲基转移酶(DNAmethyltransferase，DNMT)介导下，以S-腺苷蛋氨酸为甲基供体，将甲基基团转移到DNA某些碱基上的过程。DNA甲基化异常被认为是发生肿瘤的一个重要原因。研究肝癌相关基因特异性位点甲基化的改变，有助于了解肝癌的发病机理，为肝癌的预防和治疗提供有效的作用靶点。TM4SF1(transmembrane4Lsixfamilymember1，四跨膜蛋白超家族成员1)基因位于3号染色体长臂，是细胞膜上的糖蛋白，调节细胞的发育、...
【技术保护点】
一种可用于检测与原发性肝细胞癌相关的TM4SF1基因启动子区特异位点甲基化水平的试剂盒，其特征在于：焦磷酸测序法定量检测TM4SF1基因特异性甲基化位点cg06800962，特异性甲基化位点的引物，包括PCR引物和甲基化测序引物，其中，PCR上游引物序列如SEQ ID NO.1所示：5’‑GAGAAGGTTGTTGGGAAAATTATAGA‑3’；下游引物序列如SEQ ID NO.2所示：biotin‑5′‑CCAACCTTTCTAAACCCTTTATATTAACT‑3；甲基化测序引物序列如SEQ ID NO.3所示：5′‑TGTTTATAGTAAGTTTTGTAGG‑3′。
【技术特征摘要】
1.一种可用于检测与原发性肝细胞癌相关的TM4SF1基因启动子区特异位点甲基化水平的试剂盒，其特征在于：焦磷酸测序法定量检测TM4SF1基因特异性甲基化位点cg06800962，特异性甲基化位点的引物，包括PCR引物和甲基化测序引物，其中，PCR上游引物序列如SEQIDNO.1所示：5’-GAGAAGGTTGTTGGGAAAATTATAGA-3’；下游引物序列如SEQIDNO.2所示：biotin-5′-CCAACCTTTCTAAACCCTTTATATTAACT-3；甲基化测序引物序列如SEQIDNO.3所示：5′-TGTTTATAGTAAGTTTTGTAGG-3′。2.权利要求1所述肝癌相关的TM4SF1基因特异性甲基化位点的应用，其特征在于：应用焦磷酸测序对TM4SF1基因cg06800962位点甲基化程度检测中，原发性肝细胞癌与对应的癌旁组织存在显著性差异；该位点在原发性肝癌中甲基化程度显著降低；该位点甲基化定量信息的测定，有助于开发肝癌的辅助检...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨小丽，张悦宁，李佳桐，刘坤，张成东，
申请(专利权)人：杨小丽，
类型：发明
国别省市：广西;45
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