本发明专利技术涉及一种烷氧羰基类氨基保护基保护的氨基酸的制备方法，该方法使保护基引入剂与氨基酸在溶剂中发生反应以获得所述的保护的氨基酸，所述保护基引入剂为烷基－２－吡啶乙腈肟碳酸酯，其中所述烷基为选自苄基、叔丁基、芴甲基、三甲基硅乙基以及烯丙基中的一种。本发明专利技术采用的烷基－２－吡啶乙腈肟碳酸酯为一类新型保护基引入剂，其主要特性是容易制备，稳定性高，有良好的晶型且活性高，通过传统的反应方法就可以高收率获得无杂质的烷氧羰基类氨基保护基保护的氨基酸。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于多肽合成领域，特别涉及一种烷氧羰基类氨基保护基保护的氨基酸的 制备方法。
技术介绍
烷氧基羰基类氨基保护基特别是芴甲氧羰基(Fmoc)以及烯丙氧羰基(Alloc)在 多肽合成中应用非常广泛。其中，Fmoc基团是a氨基保护的主要选择之一，而Alloc基团 可以在Fmoc以及B0C正交保护策略的多肽合成中使用。现有技术中，烷氧羰基类氨基保 护基的引入剂主要为酰氯，叠氮或活泼碳酸酯，通过使这些引入剂与氨基酸反应获得氨基 被保护的氨基酸。酰氯在这些引发剂中活性最高。然而，其在与氨基酸的反应过程中伴随 着很多副反应，使得反应后的产物中含有相当比例的副产物二肽甚至是三肽，这种较高比 例的二肽副产物将导致最后的多肽合成物中引入不需要的氨基酸。碳酸酯和叠氮的活性较 低，可以一定程度上降低副反应，然而，碳酸酯类引入剂在合成很多a氨基保护的氨基酸 时，产物中含有0.3%左右的杂质，给原料药的工业化生产带来很严重的问题。叠氮类引入 剂活性最弱，然而大量使用易爆炸的叠氮化合物，风险大，安全性差。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种改进的烷氧羰基类 氨基保护基保护的氨基酸的制备方法。为解决以上技术问题，本专利技术采取如下技术方案，该方法使保护基引入剂与 氨基酸在溶剂中发生反应以获得所述的保护的氨基酸，所述保护基引入剂为烷基-2-吡啶 乙腈肟碳酸酯，其中所述烷基为选自苄基、叔丁基、芴甲基、三甲基硅乙基以及烯丙基中的一种。根据本专利技术，所述反应可以在温度10 40°C以及pH7 9下进行，其中优选在 PH7. 5 8. 5下进行。所述溶剂至少包括水以及至少一种用于溶解所述保护基引入剂的有 机溶剂，用于调节所述PH的试剂优选为选自碳酸钠、碳酸氢钠以及三乙胺中的一种。根据本专利技术的一个具体方面，所述的保护基引入剂为芴甲基-2-吡啶乙腈肟碳酸 酯(Fmoc-肟)，有机溶剂为丙酮。根据本专利技术的又一具体方面，所述的保护基引入剂为烯丙基-2-吡啶乙腈肟碳酸 酯(A110C-肟)，有机溶剂为二氧六环。根据本专利技术，所述氨基酸不限定于某一具体氨基酸，其可以为甘氨酸、丙氨酸、缬 氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、 丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸、组氨酸或精氨酸等。但是本专利技术方法特别优选用于a氨基酸的制 备。由于上述技术方案的运用，本专利技术与现有技术相比具有如下优点本专利技术采用烷基-2-吡啶乙腈肟碳酸酯为保护基引入剂，其主要特性是容易制 备，稳定性高，有良好的晶型且活性高，通过传统的反应方法就可以高收率获得无杂质的烷 氧羰基类氨基保护基保护的氨基酸。将Fmoc-肟应用于在合成Fmoc-Gly-OH，取得非常好的 结果，几乎没有副反应发生，同样将A110C-肟应用于合成A110C-Gly-0H也获得非常高的收 率以及纯度，通过反相HPLC以及NMR检测几乎没有二肽的副反应发生。具体实施例方式甘氨酸由于碳链最短，在a氨基保护时最容易发生副反应。下面将以制备保护的 甘氨酸为例，对本专利技术做进一步详细的说明。实施例1一种芴甲氧羰基保护的甘氨酸(Fmoc-Gly-OH)的制备方法，其包括如下步骤(1)、合成芴甲基-2-吡啶乙腈肟碳酸酯(Fmoc-肟)取氯甲酸芴酯 2. 58g(10mmol)溶于30ml 二氯甲烷中，搅拌溶解后加入2-吡啶乙腈肟lOmmol，冰水浴冷却 温度至0°C，滴加碳酸钠2. lg(20mmol)溶于水20ml的混合溶液，滴完后保温搅拌0. 5h，然 后室温搅拌2h，TLC检测反应结束，加入50ml 二氯甲烷，静置分层，二氯甲烷层依次用30ml 水洗，饱和食盐水30ml洗涤后，经无水硫酸钠干燥，浓缩得粗品，用二氯甲烷重结晶即得白 色固体即为Fmoc-肟。mp 165_166°C ；收率93%。^NMIUCDCI》8 4. 38 (t, 1H, CH, J = 7. 7Hz) ,4. 62(d，2H，CH2, J = 7. 7Hz)，7. 36， 7. 44 (2t, 4H, Ar-H, J = 6. 9Hz)，7. 48-7. 51 (m, 1H, Ar-H) ,7. 66, 7. 79 (2d, 4H, Ar-H, J = 7. 7Hz)，7. 84 (t, 1H, Ar-H, J = 6. 9Hz)，8. 14 (d, 1H, Ar-H, J = 8. 4Hz)，8. 79 (d, 1H, Ar-H, J =4. 6Hz)；13C NMR 8 46. 53，72. 00，107. 94，120. 34，122. 08，125. 32，126. 89，127. 48， 128. 29，137. 35，139. 67，141. 43，142. 78，147. 16，150. 46，151. 97 ；元素分析其化合物分子式为C22H15N303。化学结构式如下<formula>formula see original document page 4</formula>(2)、合成 Fmoc-Gly-OH 将甘氨酸 1. 5g(20mmol)以及碳酸氢钠 4. 2g(50mmol)溶 于100ml水中，缓慢滴加20mmol步骤(1)制得的Fmoc-肟溶于100ml丙酮的溶液，室温搅 拌过夜后浓缩反应液中丙酮，水相用二氯甲烷萃取以除去未反应的Fmoc-肟，水相用10% 盐酸调节PH值至酸性，析出白色固体，过滤，固体水洗两遍后干燥，乙酸乙酯石油醚混合 溶剂重结晶得白色固体5. 44g，收率91.6%，mp 166-167°C, Fmoc-Gly-OH纯度为99. 9% (HPLC)，Fmoc-Gly-Gly-0H 含量 0. 01 %。实施例2一种烯丙氧羰基保护的甘氨酸(Alloc-Gly-OH)的制备方法，其包括如下步骤(1)合成烯丙基-2-吡啶乙腈肟碳酸酯(Alloc-肟)将12mmol 2_羟基_N_羟基 吡啶钾盐溶于40ml水中，冰水浴冷却至0°C，缓慢滴加12mmol氯甲酸烯丙酯溶于20ml 二氯 甲烷的溶液，于0°C剧烈搅拌0. 5h后室温搅拌3h，加入50ml 二氯甲烷后静置分层，有机相 用水洗(50ml X 2)，饱和食盐水洗涤(50ml X 2)，无水硫酸钠干燥后浓缩得粗品，二氯甲烷 和正己烷混合溶剂重结晶得淡褐色固体即为Alloc-肟，mp :102-103°C，收率81%。1H-NMR(CDCl3) δ 4. 85-4. 86 (dt, 2H, CH2)，5. 38-5. 40 (m, 1H, CH2)，5. 46-5. 50 (m, 1H, CH2)，5. 97-6. 07 (m, 1H, CH)，7. 47-7. 50 (m, 1H, Py-H)，7. 82-7. 86 (m, 1H, Py-H)， 8. 12-8. 15 (m, 1H, Py-H)，8. 77-8. 79 (m, 1H, Py-H)。13C-NMR(CDCl3) δ 70. 62，107. 98，120. 85，122. 16，126. 88，130. 48，137. 39， 139. 63，147. 34，150. 52，151.89。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种烷氧羰基类氨基保护基保护的氨基酸的制备方法，该方法使保护基引入剂与氨基酸在溶剂中发生反应以获得所述的保护的氨基酸，其特征在于：所述保护基引入剂为烷基－２－吡啶乙腈肟碳酸酯，其中所述烷基为选自苄基、叔丁基、芴甲基、三甲基硅乙基以及烯丙基中的一种。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：约阿夫卢森堡，费尔南多阿尔贝里科，朱勇，
申请(专利权)人：苏州昊帆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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