用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆及其制备方法和用途。选择合适的自身免疫病患者，提取高表达自身抗体的Ｂ淋巴细胞和浆细胞，提取ＲＮＡ，扩增与克隆抗体基因，应用Ｈｅｌｐｅｒ噬菌体构建表面展示文库，多轮重复筛选该文库，酶切去除ｇｐⅢ基因片段，重新连接后转化感受态菌进行可溶性表达，选取单克隆抗体进行增菌表达，挑选出阳性克隆；该克隆能够用于筛选肿瘤坏死靶向抗体。本发明专利技术所选的供体合适，其自身抗体效价高，获得阳性克隆的几率高，且能同时获取多个克隆；还能进一步得到一种新的人源性抗体，该抗体无需人源化处理，使该抗体的生产成本大幅度降低，是一种操作简单易用、能快速产业化的实用方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆，其特征在于，该克隆是用以下方法制备得到的，该方法包括以下两个主要步骤：①构建人源自身抗体噬菌体表面呈现文库；Ａ．选择供体与提取ＲＮＡ；Ｂ．扩增与克隆抗体基因；Ｃ．应用Ｈｅｌ ｐｅｒ噬菌体，构建完成表面展示文库；②从该文库中筛选阳性克隆；Ａ．应用固相包被抗原，对文库进行多轮重复筛选；Ｂ．纯化噬粒载体酶切去除ｇｐⅢ基因片段，重新连接后转化感受态菌进行可溶性表达；Ｃ．选取单克隆抗体进行 增菌表达，再从中挑选阳性克隆。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：韩焕兴，倪健，杨子义，何玮，
申请(专利权)人：上海富纯中南生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]