氨浓度的测定方法及氨诊断试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种氨浓度的测定方法及氨诊断试剂盒，利用谷氨酸脱氢酶与α－酮戊二酸、还原型辅酶生成谷氨酸，并使还原型辅酶氧化成为氧化型辅酶，从而得以测定还原型辅酶在３４０ｎｍ处吸光度下降的速度，通过测量３４０ｎｍ处吸光度下降的速度，可以测算氨浓度的大小，还利用谷氨酸氧化酶作为循环酶，将谷氨酸再次变回氨及α－酮戊二酸，使氨不断地被重复循环利用。该方法特异性高，不受内、外源物质的污染，测试结果精确、准确性好。将诊断试剂盒制成双剂或三剂可减少各成分的交叉影响，保持试剂的稳定性。该方法在普通紫外／可见光分析仪或者半自动／全自动生化分析仪上便可快速检测，测试成本低廉，便于推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药、食品、环境等领域内对氨浓度的检测，尤其涉及利用酶循环扩增法测定氨浓度的方法，以及由此制得的氨诊断试剂盒，属于氨浓度分析检测

技术介绍
氨测定的方法有微量扩散法、离子交换法、酶法和氨电极法等。目前应用最多的方法是酶法和基于离子选择电极的血氨测定仪分析法。扩散法是标本碱化后，释放出NH3，用酸滴定释放出的氨，或用Nessler反应形成棕黄色碘化双汞胺进行比色。这些方法需要碱化，内源性的氨形成造成影响，使其准确性和精密度受到影响，目前已很少应用；离子交换法比扩散法更准确，CV为8％～13％；离子选择电极法是利用NH3扩散到电极表面，引起电极的PH发生变化进行测定，该方法的CV为3.5％～4.8％，回收率高。结合具体实际，应以酶法测定为实用。检索中国专利，仅查出87105593.7专利申请公开了一种血氨测定速冻杯，却未发现比较理想的血氨测定方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种测定氨浓度的方法，以及应用该方法配制而成的氨诊断试剂盒。本专利技术的原理是利用酶循环扩增法(Enzymatic Recycling Method)来测定样品中氨的浓度，其主要技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
氨浓度的测定方法，包括以下步骤：①将测定的样品与含有α－酮戊二酸、谷氨酸脱氢酶、谷氨酸氧化酶和还原型辅酶的试剂混匀，使之发生以下反应，氨＋α－酮戊二酸＋还原型辅酶＊谷氨酸＋辅酶＋水谷氨酸＋水＋氧＊氨＋α－酮戊二酸＋过 氧化氢②将反应混合物置于紫外／可见光分析仪或者半自动／全自动生化分析仪下，检测主波长３４０ｎｍ的吸光度的下降速度，测算出样品中氨浓度大小。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王尔中，
申请(专利权)人：王尔中，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]