【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗体、可活化抗体、双特异性抗体和双特异性可活化抗体及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2017年10月14日提交的美国临时申请号62/572,468、2017年10月25日提交的美国临时申请号62/577,140、2018年1月3日提交的美国临时申请号62/613,358、2018年5月2日提交的美国临时申请号62/666,065和2018年9月14日提交的美国临时申请号62/731,622的权益,其各自的内容以引用的方式整体并入本文中。
本文提供抗体、可活化抗体(AA)、双特异性抗体和双特异性可活化抗体(BAA)。本文还提供这些抗体、AA、双特异性抗体和BAA的制备方法和使用方法。对序列表的引用按照37C.F.R.§1.821以计算机可读形式(CRF)经由EFS-Web以文件名CYTX-045-US_SEQLIST_10-12-18_ST25.txt通过电子方式与本申请同时提交的“序列表”以引入的方式并入本文中。序列表的电子拷贝在2018年10月12日创建,并且盘上的大小是440千字节。
技术介绍
已经证明基于抗体的疗法有效治疗几种疾病,但在一些情况下,由于广泛靶表达引起的毒性限制了它们的治疗有效性。另外,基于抗体的治疗剂表现出其他限制,诸如在施用后从循环中快速清除。在小分子治疗剂领域,已经开发了提供活性化学实体的前药的策略。这样的前药以相对无活性(或显著较小活性)的形式施用。一旦施用,前药就在体内代谢成活性化合物。这样的前药策略可提供药物对其预期靶标的增加的选择 ...
【技术保护点】
1.一种双特异性可活化抗体(BAA),其中所述BAA在被活化时特异性结合两个靶标并且包含以下结构:/na.特异性结合第一靶标的IgG抗体(AB1),其中所述AB1包含两条重链(AB1 HC)和两条轻链(AB1 LC);并且其中所述AB1连接至第一掩蔽部分(MM1),所述第一掩蔽部分连接至第一可裂解部分(CM1)以形成MM1-CM1构建体,其中MM1-CM1构建体的羧基末端连接至所述AB1的每条轻链的每个氨基末端,其中/n所述MM1抑制所述AB1与其靶标的结合;并且/n所述CM1是充当第一蛋白酶的底物的多肽,/nb.两个scFv(各自为AB2),其各自特异性结合第二靶标,其中每个AB2包含连接至重链可变区的轻链可变区,其中每个AB2的羧基末端连接至每个AB1重链的氨基末端;并且其中每个AB2连接至第二掩蔽部分(MM2),所述第二掩蔽部分连接至第二可裂解部分(CM2)以形成MM2-CM2构建体,其中每个MM2-CM2构建体的羧基末端连接至每个AB2的氨基末端,其中/n所述MM2抑制所述AB2与其靶标的结合;并且/n所述CM2是充当第二蛋白酶的底物的多肽,/n并且其中所述BAA具有以下特征中 ...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171014 US 62/572,468;20171025 US 62/577,140;20181.一种双特异性可活化抗体(BAA),其中所述BAA在被活化时特异性结合两个靶标并且包含以下结构:
a.特异性结合第一靶标的IgG抗体(AB1),其中所述AB1包含两条重链(AB1HC)和两条轻链(AB1LC);并且其中所述AB1连接至第一掩蔽部分(MM1),所述第一掩蔽部分连接至第一可裂解部分(CM1)以形成MM1-CM1构建体,其中MM1-CM1构建体的羧基末端连接至所述AB1的每条轻链的每个氨基末端,其中
所述MM1抑制所述AB1与其靶标的结合;并且
所述CM1是充当第一蛋白酶的底物的多肽,
b.两个scFv(各自为AB2),其各自特异性结合第二靶标,其中每个AB2包含连接至重链可变区的轻链可变区,其中每个AB2的羧基末端连接至每个AB1重链的氨基末端;并且其中每个AB2连接至第二掩蔽部分(MM2),所述第二掩蔽部分连接至第二可裂解部分(CM2)以形成MM2-CM2构建体,其中每个MM2-CM2构建体的羧基末端连接至每个AB2的氨基末端,其中
所述MM2抑制所述AB2与其靶标的结合;并且
所述CM2是充当第二蛋白酶的底物的多肽,
并且其中所述BAA具有以下特征中的至少一种:
i.MM2包含氨基酸序列SEQIDNO:12;
ii.MM1包含选自由表7中提供的序列组成的组的氨基酸序列;
iii.AB2包含如SEQIDNO:2或SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域或如SEQIDNO:1或SEQIDNO:4中所示的轻链可变结构域;以及
iv.AB1包含Fc区,所述Fc区在如由如Kabat中所示的EU索引编号的氨基酸位置L234、L235、N297和P331中的至少一个处包含氨基酸取代,使得所述BAA具有降低的效应子功能。
2.如权利要求1所述的BAA,其中AB2包含如SEQIDNO:2或SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域和如SEQIDNO:1或SEQIDNO:4中所示的轻链可变结构域。
3.如权利要求1所述的BAA,其中所述AB1结合肿瘤靶标,并且所述AB2结合免疫效应靶标。
4.如权利要求1至3中任一项所述的BAA,其中所述BAA是T细胞接合双特异性(TCB)AA(TCBAA)。
5.如权利要求1至4中任一项所述的BAA,其中所述AB1结合EGFR,并且所述AB2结合CD3ε。
6.如权利要求1至5中任一项所述的BAA,其中所述MM1包含选自由表7中提供的序列组成的组的氨基酸序列。
7.如权利要求1至5中任一项所述的BAA,其中所述MM1包含选自由SEQIDNO:85和SEQIDNO:78组成的组的氨基酸序列。
8.如权利要求1至5中任一项所述的BAA,其中所述MM1包含SEQIDNO:78。
9.如权利要求1至8中任一项所述的BAA,其中所述MM2包含氨基酸序列SEQIDNO:12。
10.如权利要求1至9中任一项所述的BAA,其中所述CM包含SEQIDNO:14的氨基酸序列。
11.如权利要求1至9中任一项所述的BAA,其中所述CM包含SEQIDNO:17的氨基酸序列。
12.如权利要求1至9中任一项所述的BAA,其中所述CM所述CM包含SEQIDNO:16的氨基酸序列。
13.如权利要求1至9中任一项所述的BAA,其中CM1包含选自包含SEQIDNO:14和SEQIDNO:16的组的氨基酸序列。
14.如权利要求1至9中任一项所述的BAA,其中CM2包含选自包含SEQIDNO:14和SEQIDNO:17的组的氨基酸序列。
15.如权利要求1至14中任一项所述的BAA,其中AB1在氨基酸位置L234、L235和P331中的至少两个处包含氨基酸取代。
16.如权利要求15所述的BAA,其中AB1在氨基酸位置L234、L235和P331处包含氨基酸取代。
17.如权利要求15所述的BAA,其中AB1包含L234F、L235E和P331S氨基酸取代。
18.如权利要求15所述的BAA,其中所述AB1包含Fc区,所述Fc区在N297处包含氨基酸取代。
19.如权利要求1至14中任一项所述的BAA,其中AB1在氨基酸位置L234F、L235E、P331S和N297Q处包含氨基酸取代。
20.如权利要求1所述的BAA,其中所述AB1的重链包含SEQIDNO:69、SEQIDNO:70、SEQIDNO:71、SEQIDNO:72、SEQIDNO:73、SEQIDNO:74、SEQIDNO:75和SEQIDNO:76中的任一种,如表6中所示。
21.BAACI106,其包含如表11和实施例1中提供的布局和序列。
22.BAACI107,其包含如表11和实施例1中提供的布局和序列。
23.BAACI079,其包含如表11和实施例1中提供的布局和序列。
24.BAACI090,其包含如表11和实施例1中提供的布局和序列。
25.一种可活化抗体(AA),其包含:
a)特异性结合CD3的ε链(CD3ε)的抗体或其抗原结合片段(AB);
b)偶联至所述AB的掩蔽部分(MM),其中当所述AA处于未裂解状态时,所述MM减少或抑制所述AB与所述CD3ε的结合,其中所述MM包含氨基酸序列SEQIDNO:12;以及
c)偶联至所述AB的可裂解部分(CM),其中所述CM是充当蛋白酶的底物的多肽。
26.如权利要求25所述的AA,其中所述CM包含表4中所示的序列中的任一种。
27.如权利要求25所述的AA,其中所述CM包含可被丝氨酸蛋白酶或MMP裂解的底物。
28.如权利要求25所述的AA,其中所述CM包含选自由SEQIDNO:18-56组成的组的氨基酸序列。
29.如权利要求25所述的AA,其中所述蛋白酶是MMP。
30.如权利要求25所述的AA,其中所述蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。
31.如权利要求25所述的AA,其中所述特异性结合CD3的AB是如权利要求38-47中任一项所述的抗体。
32.一种可活化抗体(AA),其包含:
a.特异性结合表皮生长因子受体(EGFR)的抗体或其抗原结合片段(AB);
b.偶联至所述AB的掩蔽部分(MM),其中当所述AA处于未裂解状态时,所述MM减少或抑制所述AB与所述EGFR的结合,并且其中所述MM包含选自由表7中提供的序列组成的组的氨基酸序列;以及
c.偶联至所述AB的可裂解部分(CM),其中所述CM是充当蛋白酶的底物的多肽。
33.如权利要求32所述的AA,其中所述MM包含SEQIDNO:78的氨基酸序列。
34.如权利要求32至33中任一项所述的AA,其中所述CM包含可被丝氨酸蛋白酶或MMP裂解的底物。
35.如权利要求32至33中任一项所述的AA,其中所述CM包含选自由SEQIDNO:18-56组成的组的氨基酸序列。
36.如权利要求32所述的AA,其中所述CM包含SEQIDNO:14的氨基酸序列。
37.如权利要求32所述的AA,其中所述CM包含SEQIDNO:16的氨基酸序列。
38.一种特异性结合CD3的ε链(CD3ε)的抗体或其抗原结合片段(AB),其中所述抗体包含如SEQIDNO:2或SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域或如SEQIDNO:1或SEQIDNO:4中所示的轻链可变结构域。
39.如权利要求38所述的AB,其中所述抗体包含如SEQIDNO:2或SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域和如SEQIDNO:1或SEQIDNO:4中所示的轻链可变结构域。
40.如权利要求38所述的AB,其包含如SEQIDNO:2中所示的重链可变结构域。
41.如权利要求38所述的AB,其包含如SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域。
42.如权利要求38所述的AB,其中所述抗体包含如SEQIDNO:1中所示的轻链可变结构域。
43.如权利要求38所述的AB,其包含如SEQIDNO:4中所示的轻链可变结构域。
44.如权利要求38所述的AB,其包含如SEQIDNO:2中所示的重链可变结构域和如SEQIDNO:1中所示的轻链可变结构域。
45.如权利要求38所述的AB,其包含如SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域和如SEQIDNO:1中所示的轻链可变结构域。
46.如权利要求38所述的AB,其包含如SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域和如SEQIDNO:4中所示的轻链可变结构域。
47.如权利要求38所述的AB,其包含如SEQIDNO:2中所示的重链可变结构域和如SEQIDNO:4中所示的轻链可变结构域。
48.如权利要求32至47中任一项所述的AB,其中所述AB是双特异性AB。
49.如权利要求32至47中任一项所述的AA,其中所述抗体是scFv。
50.如权利要求32至47中任一项所述的AA,其中所述抗体是IgG1抗体。
51.一种可活化抗体(AA),其包含:
a)特异性结合CD3的ε链(CD3ε)的抗体或其抗原结合片段(AB),其中所述抗体包含如SEQIDNO:2或SEQIDNO:3中所示的重链可变结构域或包含如SEQIDNO:1或SEQIDNO:4中所示...
【专利技术属性】
技术研发人员:L·M·布斯坦,S·L·拉波特,B·A·欧文,J·G·弗兰德斯,
申请(专利权)人:西托姆克斯治疗公司,
类型:发明
国别省市:美国;US
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