携带截短抗肌萎缩蛋白基因表达框的AAV载体、制备方法及应用技术

本发明专利技术提供一系列携带截短抗肌萎缩蛋白基因表达框的重组腺相关病毒。体内实验表明，该重组腺相关病毒载体能够高效地导入体内，持续稳定地表达截短的抗肌萎缩蛋白，降低动物模型血液中的肌酸激酶，恢复其肌肉功能。结果提示，该重组腺相关病毒载体有希望开发成为新的杜氏肌营养不良症治疗药物。

AAV vector carrying truncated gene expression frame of dystrophin, preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
携带截短抗肌萎缩蛋白基因表达框的AAV载体、制备方法及应用
本专利技术涉及生物
，具体涉及重组腺相关病毒载体携带人为设计的截短的抗肌萎缩蛋白基因表达框的杜氏肌营养不良症基因药物。
技术介绍
Duchenne型肌营养不良(Duchennemusculardystrophy，DMD)是一种由抗肌萎缩蛋白基因的致病性变异所导致的X染色体连锁隐性遗传性肌病，其致病基因简称为DMD基因（dystrophinmusculardystrophygene，DMD）。DMD基因是人类最大的基因之一，位于Xp21，编码dystrophin蛋白，即抗肌萎缩蛋白。该基因在基因组序列上跨越了2.5Mb，占全部基因组序列长度的0.1%，占X染色体全长的1.5%，该基因99%的序列由内含子组成，编码区包括79个外显子及7个组织特异性的启动子，其mRNA序列长14kb，主要表达于骨骼肌、心肌，少量表达于脑组织。约60%～65%的DMD/BMD（Beckermusculardystrophy，Becker型肌营养不良）患者是由于DMD基因中一个或多个外显子的缺失突本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种截短的人抗肌萎缩蛋白基因的表达框，其特征在于，/n（Ⅰ）包含肌肉特异性启动子序列；/n（Ⅱ）含有优化的截短的人抗肌萎缩蛋白基因的编码序列；/n（Ⅲ）携带人miRNA靶序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种截短的人抗肌萎缩蛋白基因的表达框，其特征在于，
（Ⅰ）包含肌肉特异性启动子序列；
（Ⅱ）含有优化的截短的人抗肌萎缩蛋白基因的编码序列；
（Ⅲ）携带人miRNA靶序列。


2.如权利要求1所述的肌肉特异性启动子，具体为SEQIDNO.2序列和/或SEQIDNO.3序列和/或SEQIDNO.4序列。


3.如权利要求1所述的优化的截短的人抗肌萎缩蛋白基因编码序列，序列信息见SEQIDNO.5。


4.如权利要求1所述的人miRNA靶序列，具体为人miR-122的完全互补的靶序列。


5.重组腺相关病毒载体，其特征在于携带如权利要求1所述的基因表达框或权利要求2、3、4要求序列的组合。


6.如权利要求5所述的重组腺相关病毒载体，其特征在于，重组腺相关...

【专利技术属性】
技术研发人员：田文洪，董小岩，吴小兵，马思思，
申请(专利权)人：北京五加和分子医学研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11